HIV包膜蛋白的结构及其相应的病毒进入抑制剂

HIV-1病毒包膜蛋白gp120和gp41在病毒感染中起着重要的作用。在病毒进入细胞的过程中,gp120先和CD4分子结合,发生构象改变,进而导致gp41构象的变化,使病毒包膜和细胞膜融合而感染细胞。与gp120或者gp41相结合的多肽、大分子和小分子化合物,都可能影响HIV-1病毒包膜和靶细胞膜结合的过程,从而起到抗HIV-1病毒的作用。该文对gp120和gp41的结构及其相互作用,以及以HIV-1包膜糖蛋白为靶点的病毒进入抑制剂类抗艾滋病药物进行综述。     

抗凝组分Acoagulatin的纯化鉴定及其抗凝特性

目的 从蝮蛇毒中分离纯化一种组分acoagulatin并进行鉴定。观察其抗凝作用。方法 经DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-sepharose Fast Flow离子交换柱层析，从蝮蛇毒中分离、纯化得到acoagulatin，分别采用Biosep-sec-S2000型HPLC分子筛柱层析、还原性SDS-PAGE(5％浓缩胶，12％分离胶)电泳进行纯度和相对分子质量测定，将不同浓度acoagulatin与抗凝兔血混合，测定凝血时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)。结果 Acoagulatin的相对分子质量为31400，由两个亚基组成，相对分子质量分别为14400和17000，能显著地延长PT和APTT，对TT没有影响。结论 采用DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-sepharose Fast Flow两种离子交换柱层析分离蛇毒，能分离出纯度高的组分acoagulatin，该组分具有抗凝活性。     

本科生生物技术制药双语教学的实践与思考

双语教学是当前教学改革的重点和热点。从双语教学的必要性、双语比例的设置、教材的选择、教师队伍建设、教学方法和考核方式的选择等几方面论述了生物技术制药双语教学的一些实践和经验,并在此基础上给出了提高双语教学质量的一些方法。     

药学本科抗病毒药物和分子病毒学双语教学探索和思考

抗病毒药物和分子病毒学是药学本科生开设的中英文双语教学课程.从授课对象和目的、授课形式与内容、授课的效果等方面总结了教学实践过程和体会,并根据出现的问题提出了改进的方案和想法.     

端粒酶抑制剂筛选模型诱饵载体的构建与转化

目的构建含不同人端粒酶RNA基因片段的诱饵融合表达载体并转化酵母,用于酵母三杂交方法筛选端粒酶抑制剂。方法采用RT—PCR方法从肿瘤细胞中扩增人端粒酶RNA（hTR）基因后,分别扩增hTR基因假结合体区CR4-CR5及H／ACA和CR7区hTR基因片段,纯化分离定向克隆到pRH3诱饵质粒,构建包含不同hTR目的基因片段的重组质粒,转化大肠杆菌,经PCR、酶切、测序鉴定后,将阳性重组质粒转化酵母菌,进行毒性自激活检验。结果测序结果证实,含不同hTR基因片段诱饵重组质粒pRH3-hTR构建成功,转化酵母后无毒性和自激活性。结论成功构建了酵母三杂交系统诱饵载体,可于酵母三杂交系统筛选端粒酶抑制剂及在酵母中研究hTERT和hTR间的相互作用．     

高脂饮食+STZ诱导2型糖尿病动物模型的优化和评价

目的在原有基础上进一步缩短造模时间,优化模型,使模型更加接近于2型糖尿病并且明确模型的适用范围,为抗糖尿病药物的筛选和评价提供一个更好的平台。方法进行三因素三水平的正交实验,考察不同因素间的组合对模型的影响,筛选出最佳的组合。对最佳组合进行模型稳定性和重复性考察:按照正交实验结果,对最佳的组合进行8周以上的观察,以考察其稳定性;用不同批次小鼠进行造模以考察其重复性。对优化后的模型进行药效学评价。结果正交实验筛选出的最佳组合是第三周开始注射streptozotocin(STZ),注射剂量为85mg/kg(注射两次,每次间隔5d),病理切片显示胰岛有一定的破坏但又恰到好处。模型具有很好的重复性和稳定性,造模的成功率在90%以上,血糖水平在注射STZ后稳定上升,注射1周后(第5周)维持稳定并且可以持续到8周以上。模型对药物的评价效果:优化后的模型对二甲双胍和匹格列酮具有很好的评价效果;同时也很好地改善了对促胰岛素分泌类药物如格列美脲的评价功效。结论成功地优化了模型,使得其更加接近于人类2型糖尿病状态,能够更好地用于评价治疗2型糖尿病的常见药物以及新药的筛选。     

自拟定喘汤治疗支气管哮喘疗效观察

目的：观察自拟定喘汤对支气管哮喘的疗效。方法：将36例患者随机分为2组各18例,治疗组服用自拟定喘汤,对照组服用桂龙咳喘宁,急性发作时可酌情使用抗生素。2组均以7d为1个疗程,2—3个疗程观察疗效。结果：治疗组疗效优于对照组,有统计意义（P〈0．05）;在肺功能改善方面,治疗组优于对照组（P〈0．05）;对IgE、EO、NEUT％检测结果,治疗组优于对照组（P〈0．05）。结论：自拟定喘汤对于治疗支气管哮喘具有良好疗效。     

高通量端粒酶抑制剂筛选模型融合表达载体的构建及转化

目的 构建含不同结构域的人端粒酶逆转录酶(hTERT)酵母三杂交系统融合蛋白表达载体并转化酵母.方法 采用PCR法从pCLXSN-hTERT质粒中提取不同的hTERT cDNA片段,纯化分离定向克隆到pYESTrp3质粒,构建包含不同hTERT蛋白结构域的编码序列的重组质粒,转化大肠杆菌,经PCR、酶切、测序鉴定,将阳性重组质粒转化酵母菌,进行毒性和自激活检验.结果 经过测序验证,重组融合蛋白表达载体pYESTrp3-hTERT构建成功,转化酵母无毒性和自激活性.结论 成功构建能用于酵母三杂交系统的融合蛋白表达载体,可于酵母三杂交系统筛选端粒酶抑制剂及hTERT和hTR间的相互作用.     

Wnt通路抑制因子FrpHE的表达作用

目的研究Wnt通路抑制因子FrpHE（frizzled related—protein）表达的调控作用。方法将携带p53基因的复制缺陷型腺病毒载体（Adp53）导入到p53缺失的人肝癌细胞株Hep3B中，并以wnt通路的关键因子}eatenin的改变为功能指标评价wnt通路的变化。以RT—PCR技术检测Wnt通路抑制因子FrpHE表达的调节作用，以流式细胞术检测Adp53的转基因情况和β-catenin的表达。结果FrpHE mRNA水平在转染p5320小时后即有明显升高，其中以32小时达最高水平，随后逐渐降低。量效关系研究表明在转染剂量为0．05、0．5、5、50pfu／cell时FrpHEmRNA表达均有显著增高，尤以5pfu／cell时表达水平最高。β-catenin表达水平随着转染时间和转染剂量的增加，阳性细胞百分比强度和平均荧光量强度表达水平逐渐下降。结论外源性p53能够诱导Wnt通路抑制因子FrpHE的表达，进而产生抑制Wnt通路的作用。