重组人Delta-like 1蛋白表达及其对脐带血CD34+细胞扩增作用

目的构建pET32a(+)-hDll1DSL原核表达载体,表达、纯化hDll1DSL蛋白,观察其对脐带血CD34+细胞的体外扩增作用。方法克隆hDll1DSL,构建pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。转化大肠杆菌BL21,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。重组信号结合蛋白(RBP-J)报告基因实验及Notch下游分子Hes1检测证实hDll1DSL活性。磁珠分选脐带血CD34+细胞,加入hDll1DSL或联合干细胞因子(SCF)、Flt3配体(FL)、血小板生成表(TPO)孵育1周,观察体外扩增作用。结果成功克隆hDll1DSL,并构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hDll1DSL融合蛋白,经镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hDll1DSL融合蛋白。配体活性实验显示,可溶性的Trx-hDll1DSL蛋白可以激活RBP-J报告基因,并且能上调Notch下游分子Hes1的表达,证明其能够激活Notch信号通路。此外,Trx-hDll1DSL融合蛋白与SCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用。结论成功构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体,表达、纯化了具有生物学活性的Trx-hDll1DSL融合蛋白,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用,为造血干/祖细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础。     

CT、MRI对脊柱转移瘤的诊断价值

目的探讨CT、MRI诊断脊柱转移瘤的价值。方法回顾性分析55例经病理、临床证实脊柱转移瘤患者的CT和MRI表现。结果 CT、MRI检出55例脊柱转移瘤123个椎体受累,累及附件89个,累及椎管53处,椎旁软组织肿块65处,病理性骨折12处。CT表现为溶骨型、成骨型、混合型三种骨质改变。MRI表现为多数椎体形态无改变,少数椎体楔形变,双凹变形或伴前后径增大。椎体信号呈三种类型改变:均匀或略不均匀长T1、长T2信号;长T1短T2信号;T1WI不均匀低信号,T2WI混杂信号。MRI增强后病灶呈不同程度强化。结论 CT、MRI诊断脊柱转移瘤各有优势。CT显示脊柱转移瘤的骨质破坏改变优于MRI。MRI在鉴别诊断脊柱转移瘤病理性压缩骨折和诊断早期脊柱转移瘤中明显优于CT。     

HSP27在左侧结肠癌和右侧结肠癌差异表达的实验研究

目的：应用蛋白质组学技术筛选左侧结肠癌和右侧结肠癌组织中差异表达的蛋白,为左侧结肠癌（1eft sided coloncan cer,LSCC）和右侧结肠癌（right sided colon cancer,RSCC）在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据。方法：收集人LSCC和RSCC组织标本,置-80℃超低温冰箱中保存。应用双向凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定LSCC和RSCC中差异表达的蛋白质。应用RT—PCR,Western印迹和免疫组织化学技术检测差异表达蛋白的表达状态。结果：筛选出55个差异蛋白质点,成功鉴定出21种差异蛋白质。与RSCC比较,14种蛋白在LSCC表达上调,7种蛋白在LSCC表达下调,其中LSCC中HsP27表达下调。通过RT—PCR,Western印迹和免疫组织化学方法证实：在mRNA和蛋白水平,LSCC中HSP27的表达均低于RSCC。结论：LSCC和RSCC的蛋白质组存在差异表达,特别是HSP27在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是LSCC和RSCC生物学行为差异的分子遗传学基础。     

枯草杆菌二联活菌颗粒辅助治疗小儿轮状病毒肠炎临床疗效观察

目的 观察枯草杆菌二联活菌颗粒治疗小儿轮状病毒肠炎的疗效.方法 将200例确诊为小儿轮状病毒肠炎的患儿随机分为两组.其中治疗组100例,对照组100例,治疗组在综合治疗的同时给予枯草杆菌二联活菌颗粒口服,剂量为1袋/次,2次/d,40℃以下温开水冲服.对照组采用综合治疗.结果 治疗组愈显率为96%,对照组为66%,有显著差异,P＜0.01,治疗组止泻天数明显缩短于对照组.结论 枯草杆菌二联活菌治疗小儿轮状病毒肠炎疗效显著,且药源充足,价格低廉,无任何毒副作用,为目前治疗小儿轮状病毒肠炎的理想药物.     

血小板功能特性质量检测方法学研究

目的建立血小板功能特性质量检测方法,保障血小板输注的质量和效果。方法抽检40份机采血小板常规形态学项目,并增加血小板聚集、黏附和Ca2+释放功能试验。结果 40份机采血小板中常规形态学、血小板黏附和Ca2+释放功能结果无差异,其中2份血小板聚集功能与另外38份有较大差异。结论 血小板在采集后除了检测常规形态学项目外,还应进行血小板功能试验。相关部门应建立血小板功能试验的方法和标准。     

人工股骨头置换治疗高龄股骨粗隆间不稳定骨折

目的：探讨人工股骨头置换治疗高龄股骨粗隆间不稳定骨折的疗效。方法：2004年2月～2009年12月共收治高龄股骨粗隆间不稳定骨折46例,对其采用人工股骨头置换术治疗。结果：本组46例均得到随访。并发肺部感染1例,泌尿系统感染1例,切口浅表感染1例,右下肢深静脉栓塞1例,股骨头下沉疼痛1例,并发症发生率为10.87%。疗效按Harris评定标准,优良率为76.09%。结论：人工股骨头置换术治疗高龄股骨粗隆间不稳定骨折疗效较好,生活质量高,可以成为治疗高龄股骨粗隆间不稳定骨折的主要方法     

HSP27在左侧结肠癌和右侧结肠癌差异表达的实验研究(英文)

目的:应用蛋白质组学技术筛选左侧结肠癌和右侧结肠癌组织中差异表达的蛋白,为左侧结肠癌(1eft sided colon cancer,LSCC)和右侧结肠癌(right sided colon cancer,RSCC)在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据.方法:收集人LSCC和RSCC组织标本,置-80℃超低温冰箱中保存.应用双向凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定ISCC和RSCC中差异表达的蛋白质.应用RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学技术检测差异表达蛋白的表达状态.结果:筛选出55个差异蛋白质点,成功鉴定出21种差异蛋白质.与RSCC比较,14种蛋白在LSCC表达上调,7种蛋白在LSCC表达下调,其中LSCC中HSP27表达下调.通过RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学方法证实:在mRNA和蛋白水平,LSCC中HSP27的表达均低于RSCC.结论:LSCC和RSCC的蛋白质组存在差异表达,特别是HSP27在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是LSCC和RSCC生物学行为差异的分子遗传学基础.     

动脉导管未闭的手术治疗(附57例报告)

本文报告了57例动脉导管未闭的治疗。54例单纯动脉导管未闭在双重结扎的基础上贯穿缝扎。其中1例术中导管破裂缝合止血。切断缝合术1例,术中出血死亡。合并房间隔和室间隔缺损各1例,在体外循环深低温低流量下切开主肺动脉缝合导管内口。全组死亡率1.75％。无喉返神经损伤。术后发生高血压脑病1例,随访无再通。     

Duffy血型研究及临床应用新进展

Duffy血型是人类最重要的血型系统之一,Duffy血型不仅仅与输血安全及母婴血型不合引起的新生儿溶血病密切相关,Duffy抗原作为趋化因子还在人类疟疾疟原虫受体、炎症、肿瘤、移植排斥等方面发挥着重要作用。本文从Duffy抗原表达和基因结构、Duffy血型在人群中的分布、Duffy血型的检测方法、Duffy血型生物学功能及临床应用等方面,综述国内外关于Duffy血型研究与临床应用的现状及最新进展。     

Calpain活化在H2O2诱导的成年小鼠心肌细胞损伤中的作用

目的探讨Calpain(钙蛋白酶)在ROS介导的心肌细胞损伤中的作用。方法原代培养的成年小鼠心肌细胞分为3组:对照组;H2O2组(用25μM H2O2处理原代培养的成年小鼠心肌细胞3h来模拟ROS介导的心肌细胞损伤);PD+H2O2组,H2O2处理前用20μM PD150606(Calpain抑制剂)预处理心肌细胞30min。检测各组细胞的存活率、Calpain活性、caspase-3活性、细胞色素C的释放以及Ca2+浓度的变化情况。结果与对照组相比较,H2O2组的细胞存活率下降;Calpain及caspase-3活性增高,细胞色素C的释放以及细胞内Ca2+均明显增加(P<0.05)。然而,用PD150606预处理细胞30min能抑制H2O2引起的上述变化。结论 Calpain活化在ROS介导的心肌细胞损伤中可能具有重要作用。