葛根素微透析线性探针相对回收率影响因素的研究

目的考察影响葛根素微透析相对回收率相关影响因素,探索提高微透探针相对回收率的方法。方法采用高效液相色谱法考察不同pH值（5.1、6.0、7.4、8.1）,不同浓度丙二醇（1%、5%、10%、20%、30%）,不同浓度羟丙基-β-环糊精（1%、5%、10%、20%）的灌注液对葛根素微透析线性探针相对回收率的影响。结果微透析灌注液pH值5.1,羟丙基-β-环糊精含量5%时,葛根素相对回收率提高至（90.07±1.24）%。灌流液中丙二醇会对微透析线性探针的传递率产生负影响,降低相对回收率,在以葛根素为模型药物的微透析实验灌流液中不建议添加。结论本实验方法灌流液中添加增溶剂羟丙基-β-环糊精,可使葛根素经过半透膜时流失量减少,显著提高葛根素微透析线性探针相对回收率。     

正交实验法优选六味参苓颗粒的提取工艺

目的优选六味参苓颗粒的提取工艺。方法以处方君药西洋参中的人参皂苷Re的提取率和出膏率为考察指标,进行综合评分,通过正交实验考察不同因素和水平对六味参苓颗粒提取的影响。结果最佳提取工艺为:药材加12倍量水,加热提取2次,每次2h。结论该提取工艺合理,操作简便,可行性佳,能够为生产实际提供理论依据。     

肺移植术后的免疫抑制剂应用进展

肺移植是肺脏疾病终末期的治疗选择,闭塞性细支气管炎、巨细胞病毒感染都是移植后第1年常见的慢性排斥反应。所有的肺移植患者终生服用3种免疫抑制药物,包括钙调神经磷酸酶抑制剂、抗代谢药物及小剂量激素。不同的医疗机构使用的免疫抑制剂的方案存在差异,肺移植使用免疫抑制剂的共识尚未形成。本综述主要探讨肺移植术后诱导和维持免疫抑制治疗药物与方案,为规范治疗提供参考。     

重型再生障碍性贫血发病相关T淋巴细胞基因表达谱的生物信息学分析及作为药物筛选新方法的探索

本研究初步探索重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)发病相关的T淋巴细胞基因表达谱特征,并根据药物与疾病基因表达谱相似性对比的原理,探索SAA治疗药物新的筛选方法。以SAA和T淋巴细胞为关键词,在人类基因表达数据库和基因芯片数据库中检索与SAA发病相关的基因表达数据库,并对此基因表达数据库进行显著性检验后筛选与SAA发病相关的基因表达谱,并进行聚类分析。然后,在3 000种药物基因表达谱数据库中筛选与SAA发病相关基因表达谱特征相反者。结果表明,在上述数据库中检索到1个满足条件的相关基因表达数据库GSE3807。与SAA发病相关的T淋巴细胞基因一共有515个(表达水平变化超过2倍),其中上调者202个,下调者313个。聚类分析发现,这些基因分别属于核酸代谢、泛素依赖的蛋白降解通路、免疫球蛋白/主要组织相容性复合体、高尔基体蛋白运输以及蛋白质磷酸化等通路。SAA发病相关基因与药物基因表达谱相似性分析发现,羟基喜树碱、盐酸二甲双胍可能具有治疗SAA的作用。结论:采用生物信息学方法,比较疾病发病相关基因表达谱与药物基因表达谱的相似性,有可能成为SAA治疗药物筛选的新方法。     

LC-MS／MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度

目的高效液相色谱·串联质谱联用法（LC—MS／MS）同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。方法样品用甲醇进行沉淀蛋白后进样,Zorbax Eclipse TC—C18色谱柱,以甲醇旬．1％甲酸的1mmol·L^-1甲酸铵溶液,采用梯度洗脱进行分离,3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测（MRM）扫描方式进行检测。结果对乙酰氨基酚线性范围为：0．05-20μg·mL^-1,定量下限为0．05μg·mL^-1,准确度与精密度结果显示对乙酰氨基酚日间、日内RSD均≤5．50％,相对偏差一8．08％～5．73％,方法提取回收率92．0％～99．0％,稳定性测定值与添加值的相对偏差均〈15％;右氯苯那敏线性范围为：0．05～20ng·mL^-1,定量下限为0．05ng·mL^-1,准确度与精密度结果显示右氯苯那敏日间、日内RSD均≤13．71％,相对偏差-1．29％～1．71％,方法提取回收率89．8％～101．4％,稳定性测定值与添加值的相对偏差均〈15％。结论本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重复性高,可用于同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。     

金丝桃素体外抗巨细胞病毒效应的实验研究

目的:探讨金丝桃素单体溶液体外抗人巨细胞病毒(HCMV AD169)的效应。方法:采用细胞病变效应(CPE)抑制法观察金丝桃素单体溶液对HCMV AD169毒株的抑制作用,使用MTT比色法检测细胞的损伤程度,并利用吸光度(A)值评价金丝桃素单体溶液的抗HCMV的效应。结果:金丝桃素单体溶液半数中毒浓度(TC50)为195.96 mg/L,半数抑制浓度(IC50)为19.15 mg/L,治疗指数(TI)为10.23。金丝桃素单体溶液具有抗HCMV的作用,且随药物浓度的增高其作用而增强,在6.25-100 mg/L浓度时对巨细胞病毒均有明显抑制作用。结论:体外实验证实,金丝桃素单体是理想的抗HCMV中药。     

由DL-5-苯乙内酰脲酶法生产D-苯甘氨酸的菌种选育

本实验以假单孢菌Pseudomonas SP.27为出发菌株由DL-5-苯乙内酰脲发酵生产D-苯甘氨酸。野生菌产量为15.85μg/ml.首先对其进行紫外诱变处理1min,筛选出菌株Q_6,其产量为256.7μg/ml.然后用Q-6制备球形体,进行亚硝基胍诱变处理60min,得到Q_(68)菌株,其产量为453.4μg/ml.     

5-羟色胺对培养胃底平滑肌细胞内游离钙动员的影响

目的　研究 5 - HT诱导胃底平滑肌细胞内钙动员的机制 .方法　采用 Ca2 +指示剂 Fluo- 3/ AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的胃底平滑肌细胞 ,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化 .结果　基础状态下 SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (FI)为 2 6 4± 15 ,5 - HT 10μmol· L- 1 使荧光强度的变化 ΔFI为 16 .5± 2 .6 ;细胞外无钙时 ,5 - HT升高[Ca2 + ]作用被减弱 ,但除去细胞外钙 ,并使用内罗啶 (ryan-odine)孵育后 ,5 - HT 不再引起荧光强度的变化 ;10μmol· L- 1 米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 - HT升高[Ca2 + ]i 的作用 ,赛更定 (cyprohetadine)不能抑制 5 - HT升高的胞内钙 ;Mn92 0 2和拉西地平 (lacidipine)均能完全抑制 5 -HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 .结论　 5 - HT可通过促进外钙内流及钙池 (SR)释放使 [Ca2 + ]i 升高 ;在胃底平滑肌 5 - HT升高胞内钙部分通过 5 - HT2 受体 ,而不是通过 5 - HT1 C受体 ;5 -羟色胺通过 L型钙通道促外钙内流 ;二氢吡啶类钙拮抗剂能通过阻滞 L 型钙通道 ,而完全抑制 5 - HT促胞内钙升高的作用