人肝癌细胞MHCC-97H裸小鼠原位移植模型的建立

【目的】建立人肝癌细胞MHCC-97H原位移植裸鼠模型并检测其中甲胎蛋白（AFP）基因的表达。【方法】原位移植造模;提取模型肝癌组织中的总RNA和总蛋白,采用RT-PCR及Westernblomng两种方法分别检测AFP基因在转录水平和翻译水平的表达情况。【结果】模型肝癌组织在转录和翻译两个水平均检测出AFP基因的表达。【结论】该肝癌裸鼠模型建立成功,可作为肝癌研究的动物模型。     

布比卡因聚乳酸微球在家兔体内的缓释效应

背景布比卡因广泛应用于治疗及缓解因手术、炎症、肿瘤等引起的急、慢性疼痛,其镇痛作用时间不能满足临床对药物缓慢释放延长镇痛时间的要求.目的采用高效液相色谱法和仿豚鼠皮丘法,检测以高分子聚合物--聚乳酸为载体制成的布比卡因聚乳酸微球在家兔体内所具有的缓释效应.设计完全随机对照动物实验.单位解放军第二军医大学药学院.材料新西兰兔16只,体质量(2.58±0.17)kg.干预实验于2002-09/11在解放军第二军医大学药学院药剂教研室完成.①采用仿豚鼠皮丘法建立动物模型.①新西兰兔16只,随机分为两组,每组8只.注射组皮下注射布比卡因注射液5 mg/kg;微球组皮下植入布比卡因微球5 mg/kg.注射组兔于射液后5,10,20,30,45 min,1,2,3,4,6,8,12,24 h及微球组兔于给药后0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48和60 h耳缘静脉采血1.5 mL进行指标测定.③高效液相色谱法测定血浆中布比卡因浓度及进行药物缓释作用测定.主要观察指标血浆中布比卡因浓度的变化和局麻药作用直径.结果16只兔进入结果分析.①血药浓度变化结果注射组血药浓度迅速达到峰值,且浓度较高,为2.466 4 mg/L,随后浓度快速下降.微球组血药浓度相对较平稳,达峰较晚,峰浓度=0.778 1 mg/L,且血药浓度一直维持较低水平,平均滞留时间明显延长(P＜0.05).②药效缓释作用结果发现布比卡因微球组的镇痛作用时间较布比卡因注射液组明显延长(P＜0.05).结论布比卡因微球制剂在家兔体内具有缓慢释放镇痛效应的作用.     

滥用抗生素的现状与对策

自1940年青霉素应用于临床以来,目前已发现或发明的抗生素约5000～10000种,其中用于临床的约100种。半个世纪以来,氨基糖甙、氯霉素、四环素、大环内酯、多肽、头孢菌素等不同类别的抗生素相继问世,其后又研制出酰脲青霉素、头霉素、单氨菌素碳青霉烯类、氧头孢烯类、     

细胞膜仿生纳米载体的制备及应用研究进展

由有机或无机纳米材料制备的药物载体系统广泛用于药物靶向递送和疾病的诊断治疗研究。但其存在靶向性差、体内循环时间短、生物相容性欠佳亟需提高等问题。仿生纳米药物系统是以不同种类的细胞膜修饰纳米载体,利用内源性的细胞膜提高载体的体内生物相容性、实现更精准的靶向、甚至由细胞自身的免疫原性产生免疫治疗作用。对细胞膜仿生纳米载体技术的原理、方法及其靶向机制和治疗作用作一综述,为新型给药系统研究提供思路。     

原位移植人肝癌裸鼠模型AFP基因的异常甲基化检测

[目的]研究原位异种移植肝癌模型AFP基因启动子区异常甲基化状态的检出状况,探讨其在肝癌发病机制研究中的应用.[方法]采用甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐测序法(BSP),以人成纤维细胞基因组甲基化状态为正常对照,对10例原位移植人肝癌裸鼠模型肝癌组织中AFP基因启动子区甲基化状态进行分析和定位.[结果]10 例模型肝癌组织中AFP基因启动子区甲基化状态均发生了不同程度的异常.[结论]原位移植人肝癌模型的肝癌组织中可以检测到AFP基因启动子区的去甲基化变化,MSP和BSP作为简便而有效的技术组合可以应用于基因甲基化状态的鉴定中.     

中医外治法在肝硬化腹水中的应用进展

近年来中医外治法在肝硬化腹水方面的研究取得了长足的进步,主要包括中药敷脐疗法、中药灌肠疗法、针灸疗法、艾灸疗法、光疗法等。中医外治法在缓解肝硬化腹水临床症状方面与中药内服疗效相当,且无胃肠道不良反应。回顾了近年来中医外治法治疗肝硬化腹水的研究进展,未来建立统一的研究方案、拓宽中医外治法的应用范围是研究的新方向。     

肝病红外治疗仪联合针灸对肝郁脾虚型肝硬化患者的临床疗效观察

目的:观察肝病红外治疗仪联合针灸对肝郁脾虚型肝硬化代偿期患者的临床疗效。方法:选取2014年12月至2016年12月在上海市公共卫生临床中心的中医科住院患者及门诊治疗的肝郁脾虚型肝硬化患者患者87例,随机分为肝病红外治疗仪组40例和肝病红外治疗仪联合针灸组47例。肝病红外观察组在常规治疗基础上采用肝病红外治疗仪进行治疗30 min/d;肝病红外治疗仪联合针灸组在常规治疗基础上予肝病红外治疗仪联合针灸治疗。30个工作日为1个疗程。观察并比较2组Fibro Scan、中医临床症状评分。结果:治疗后2组中医临床症状评分:胁痛、腹部胀满评分及Fibro Scan均较治疗前有所改善(均P0.05),组间比较,肝病红外治疗仪联合针灸组对失眠、腹部胀满、恶心厌食、腹泻、乏力倦怠的疗效优于肝病红外治疗仪组(P0.05)。在中医临床症状疗效比较中,肝病红外治疗仪联合针灸组总有效率为41.2%,肝病红外观察组总有效率为23.22%,总有效率有统计学意义。在临床疗效分级构成比方面,肝病红外治疗仪联合针灸组明显优于肝病红外观察组(P0.05)。在患者临床指标比较中,2组患者治疗后Fibro Scan指标均有明显改善(P0.05)。结论:肝病红外治疗仪联合针灸治疗能有效改善肝郁脾虚型肝硬化代偿期患者的中医临床症状及Fibro Scan指标。     

聚合物囊泡的稳定性及H+透膜特性考察

目的 以嵌段聚合物制备聚合物囊泡并考察其稳定性，测定聚合物囊泡膜层的H⁺跨膜渗透特性，及1,4-二氧六环对膜渗透性能的影响，作为聚合物囊泡载药的基础。方法 以二嵌段共聚物PEG-PLGA在溶液中自组装制备聚合物囊泡，采用pH敏感荧光探针HPTS对囊泡的H⁺透膜特性进行考察，并与PBD-b-PEO、PS-b-PEO制备的囊泡及脂质体进行比较。考察不同浓度的1,4-二氧六环对聚合物囊泡膜渗透特性的作用。结果 HPTS的荧光激发光谱有pH依赖性，囊泡外水相中H⁺浓度与t^1/2呈线性相关，不同膜壁厚度的聚合物囊泡的膜渗透能力有显著区别。3种聚合物囊泡对比脂质体，H⁺透膜系数分别降低了2.39×10⁴ 、3.38×10⁴、5.48×10⁸倍。1,4-二氧六环对囊泡膜的渗透性具有调节作用，且存在浓度依赖关系。结论 聚合物囊泡的膜渗透显著低于脂质体，稳定性更好，1,4-二氧六环可调节囊泡膜的渗透性，从而调节药物的装载和释放。     

微小RNA传递载体聚乙二醇-b-聚赖氨酸的合成及细胞毒性研究

目的制备微小RNA（miRNA）传递载体聚乙二醇-b-聚赖氨酸（PEG-b-PLL）,并且选用模型细胞对其进行毒性考察。方法通过核磁谱测定聚赖氨酸的聚合度,用4%琼脂糖凝胶电泳检测聚复合物对miRNA的包封,用动态光散射法测定制备所得聚复合物粒径、多分散性指数（PDI）,Zeta电位,用荧光标记的FAM-hsa-miR-15a进行包封率的测定,采用CKK-8试剂盒测定K562细胞（人慢性淋巴白血病细胞）活力考察PEG-b-PLL的细胞毒性。结果用PEG-b-PLL制备的聚阳离子胶束/miRNA复合物特性符合应用要求,并且细胞毒性显著低于聚乙烯亚胺（PEI）,lipo2000。结论离子聚合物载体PEG-bPLL符合应用要求,同时毒性较低,有望成为基因转染的有效载体。     

反相高效液相色谱法测定布比卡因血药浓度

目的 :建立血浆中布比卡因反相高效液相色谱测定法 ,为临床监测血药浓度提供方法学基础。方法 :采用液 液萃取法并选用利多卡因为内标 ,以KromasilC18柱 ,流动相为甲醇 水 二乙胺 冰醋酸 (30 0∶10 0∶0 .4∶0 .2 ) ,紫外 2 30nm检测。结果 :本法在 0 .0 5～ 4 .0 μg·ml-1范围内线性良好 (r =0 .9998,n =6 ) ;最低检测限为 2 0ng(S/N≥ 3) ;绝对和相对回收率分别为(91.0± 2 .2 ) %和 (98.1± 1.0 ) % ;日内和日间精密度都小于 4 %。结论 :本方法简便可行 ,快速可靠