NO的生物代谢及检测方法

一氧化氮（ＮＯ）在机体内通过一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的作用而生成，ＮＯ生物合成的调节可通过对底物、辅助因子、产物、催化反应的酶进行选择性干预。组织细胞ＮＯ含量的检测方法有：电化学方法的Ｃｌａｒｋ电极法和聚合卟啉微感器法、ＥＳＲ法、ｃＧＭＰ检测、瓜氨酸量的测定、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量的测定、形态学方法、血红蛋白测定法、化学发光法、分子生物学技术     

叉状头/翅膀状螺旋转录因子在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达

目的观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达,探讨Foxp3在狼疮性肾炎中可能的免疫耐受诱导作用及机制。方法选取8周龄及16周龄雄性BXSB小鼠各6只,以8周龄C57BL/6雄性小鼠6只为正常对照,用免疫组织化学及实时荧光定量PCR方法,检测Foxp3在小鼠肾脏中的表达。结果正常对照组C57BL/6小鼠肾组织Foxp3阳性表达,细胞呈深棕色着色,广泛分布于肾小管;8周龄及16周龄BXSB小鼠肾脏组织Foxp3弱阳性表达,细胞呈浅棕色着色,分布于肾小管。8、16周龄BXSB组小鼠肾组织内Foxp3mRNA表达水平[(0.55±0.06),(0.51±0.07)]均较正常对照组(1.02±0.08)降低,差异有统计学意义(均P<0.01);16周龄BXSB组小鼠的Foxp3mRNA表达水平较8周龄BXSB组降低,但差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 BXSB小鼠狼疮肾炎的发病机制可能与调节性T细胞的Foxp3表达下调相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞CD226基因表达的研究

目的 研究CD226基因在系统性红斑狼疮(SLE)患者与健康人外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及其与CD226-Gly307Ser多态性、疾病活动度的相关性.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应检测SLE患者组90例及健康对照组30名PBMCs CD226 mRNA表达水平,同时应用单因素方差分析CD226基因表达量在3种基因之间是否存在差异,并且探讨其与临床指标的相关性以及CD226-Gly307Ser多态性的3种基因型进行Pearson相关性分析.结果 SLE组与健康对照组相比,CD226基因表达水平明显降低(P＜0.01);SLE组3种基因型之间的CD226 mRNA表达量差异无统计学意义(6.8±1.1与26.5±6.7,P＞0.05);红细胞沉降率、尿蛋白定量(24 h)、抗核抗体滴度、SLE疾病活动指数(SLEDAI)及血清补体C3水平与CD226基因表达均没有相关性.结论 在中国湖北汉族人群中,CD226-Gly307Ser多态性与SLE发病相关;T危险等位基因未影响CD226的mRNA表达水平,CD226分子在自身免疫性疾病中作用需进一步探讨.

Abstract：

Objective To investigate the expression level of CD226 mRNA in the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and explore the relation between the gene expression and disease activity, and the relation between the gene expression and Gly307Ser polymorphism of CD226 was also examined. Methods CD226 gene was measured with real-time polymerase chain reaction (qRT- PCR) in PBMCs. The expression levels of CD226 gene in PBMCs were compared between 90 SLE patients and 30 healthy individuals. One-way ANOVA and pearson correlation were used for statistical analysis. Results The expression level of CD226 in the PBMCs of SLE patients (6.8±1.1) was significantly decreased compared to healthy individuals (26.5±6.7) (P＜0.01), while there was no association between mRNA level and genotype (P＞0.05). No correlation between ESR, CRP, ANA, SLEDAI scores, C3 and the expression level of CD226 gene was discovered. Conclusion In Hubei Chinese Han population, CD226-Gly307Ser locus is associated with the development of SLE, while T allele does not impact the expression of CD226 gene, thus the role of CD226 gene in autoimmune diseases should be explored in the future.     

抗CCP、抗RA33等4种自身抗体在类风湿关节炎诊断中的应用

目的　探讨类风湿关节炎 (RA)患者检测血清抗环瓜氨酸肽 (CCP)抗体、抗RA33抗体、抗角蛋白抗体(AKA)的临床意义。方法　采用ELISA检测抗CCP和抗RA33,间接免疫荧光法检测AKA ,免疫比浊法检测类风湿因子 (RF)。共检测 4 6例RA患者、30例系统性红斑狼疮 (SLE)患者、2 4例骨关节炎 (OA)患者和 30名正常对照。结果　 4 6例RA患者中抗CCP、抗RA33、AKA和RF的阳性率分别为 5 2 .2 % (2 4 / 4 6 )、17.8% (8/ 4 6 )、2 1.7% (10 / 4 6 )和 6 9.6 % (32 / 4 6 )。而 30例SLE患者其阳性率分别为 3.3% (1/ 4 6 )、6 .7% (2 / 4 6 )、0 % (0 / 4 6 )和2 6 .7% (8/ 4 6 ) ,2 4例OA患者无一例阳性。 30名正常对照者中仅 1例抗CCP阳性 ,其余指标均为阴性。结论　抗CCP、抗RA33和AKA均是RA特异性诊断指标 ,但三者与RF可相互补充 ,选择适当的指标联合检测有助于提高诊断的敏感性和特异性。