创伤后信号传导的变化

创伤后在各种刺激因素作用下，机体细胞信号传导过程发生复杂的变化，最终产生各种各样的生物学效应，影响着创伤的病理生理进程。本文就受体介导的信号传导系统某些方面的变化作一简要综述。     

兔脂肪干细胞的分离培养及定向诱导为软骨细胞的实验观察

目的：探索从脂肪组织中分离、培养干细胞的方法；研究脂肪干细胞向软骨方向定向诱导的可行性。方法：从成年兔颈后部脂肪组织取材，酶消化法分离、培养脂肪干细胞；免疫荧光测定CD34抗原的表达：诱导培养基定向软骨细胞方向诱导；组化及免疫组化鉴定软骨细胞特性。结果：从兔脂肪组织中能够分离出生长旺盛的干细胞，CD34表达阳性，定向诱导后表现出软骨细胞的特性。结论：从兔颈后部脂肪组织中能够分离出干细胞，并能定向软骨细胞方向诱导，说明脂肪干细胞作为软骨组织工程种子细胞有一定的可行性。     

去分化关节软骨细胞生物反应器培养反分化的实验研究

目的 观察体外经传代培养去分化的成人关节软骨细胞，在生物反应器培养后生物学性状的变化，探索去分化软骨细胞反分化的手段，为软骨细胞移植修复关节软骨缺损建立合适的体外培养方法。方法 无菌条件下取成人关节软骨组织，Ⅱ型胶原酶消化法（0．2％，37C，3h）分离软骨细胞，分成两组：一组常规单层传代培养，另一组添加重组人的生长因子（1ng／ml转化生长因子β1＋5ng／ml成纤维细胞生长因子2）体外培养传代大量扩增后，无微载体生物反应器内培养3周。血小板计数器行细胞计数，计算各代细胞倍增时间；细胞爬片和石蜡、冰冻切片进行HE、蕃红O、阿利新蓝染色，Ⅰ、Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组织化学检测，观察细胞表型变化。结果 成人关节软骨细胞体外培养3代后迅速去分化，增殖缓慢。添加生长因子培养细胞去分化速度减缓；传10代，细胞扩增2000倍以上，部分去分化，但细胞扩增增殖能力仍很强；传20代软骨细胞表型基本丢失，但仍有增殖能力；置于生物反应器继续培养3周，细胞番红O染色强阳性、aggrecan和Ⅱ型胶原阳性，Ⅰ型胶原阴性，表型恢复良好。结论 软骨细胞在体外大量扩增后，在生物反应器培养，可恢复其表型，可望用于在体外培养时去分化软骨细胞的再分化。     

生长因子对成人关节软骨细胞的促增殖作用

目的观察不同生长因子对成人关节软骨细胞（adult human articular chondrocytes，AHAC）增殖的影响，探索AHAC体外大量扩增的方法。方法以酶消化法从成人关节软骨分离细胞，条件培养基培养；传2代细胞分别用不同浓度成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2，FGF-2）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF—β1）、血小板衍生因子bb（platelet derived growth factor-bb，PDGF-hb）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）或其不同组合作用。用MTT法比较细胞增殖情况，用组化和免疫组化检测观察细胞表型变化。结果FGF-2、TGF—β1、PDGF—bb、HGF均有促AHAC增殖的作用，其最大效应剂量分别是50ng/ml、1ng／ml、1ng／ml、20ng／ml。5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最强的促增殖作用，继续加用PDGF—bb和（或）HGF无进一步促进作用；用这一因子组合培养AHAC，可以传10代以上，细胞扩增2000倍以上，且传9代细胞仍弱表达Ⅱ型胶原和aggrecan。结论FGF-2、TGF-β1、PDGF—bb、HGF均对AHAC有一定的促增殖作用；5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最大的促增殖效应，细胞短期内大量扩增，且在大量扩增的同时维持了一定的软骨细胞表型，因此是合适的AHAC体外大量扩增促进剂。     

前路一期手术治疗胸椎及胸腰段脊柱结核

目的观察前路一期病灶清除联合植骨融合内固定治疗胸椎及胸腰段脊柱结核的外科治疗效果。方法 2004－2008年收治胸椎及胸腰段脊柱结核初治病例184例,经胸或胸腹前路行一期病灶清除、椎间肋骨（钛网）植骨、椎体棒板系统内固定术。术后根据药物敏感试验以个体化的化疗方案治疗1.0－1.5年。结果伤口均Ⅰ期愈合。并发症包括肋间神经痛、气胸/胸腔积液。随访1－4年,平均2.3年,随访期内结核无复发,神经损害改善或完全恢复,所有患者均显示骨性融合,后凸畸形平均矫正29.5°。结论经胸或胸腹前路一期病灶清除联合肋骨（钛网）植骨及钢板内固定术是治疗胸椎或胸腰段脊柱结核较好的手术方式之一。     

取向聚乙醇酸聚乳酸共聚物支架的制备及初步实验观察

目的 研制聚乙醇酸聚乳酸共聚物(PLGA)材料的纵向取向支架,观察体外生物相容性、细胞在支架内分布等特性,探讨其作为关节软骨组织工程支架的可能性.方法 相分离法制备纵向取向PLGA支架,等离子改性、胶原包埋处理,体外接种关节软骨细胞,在环境扫描电镜下观察细胞生长、分布情况.结果 研制的PLGA取向支架生物相容性明显提高,细胞沿纵向管道垂直排列,细胞分布均匀,单侧加载细胞进入深度可达2.5 nlln.结论 取向支架能明显改善细胞在载体内的分布,细胞纵向排列接近关节软骨细胞排列方式.     

脂肪干细胞与骨髓干细胞生物学性状的比较

脂肪干细胞(ATSCs)具有多向分化潜能,是重要的种子细胞,但它与骨髓干细胞(MSCs)的异同研究报道较少[1,2].本研究对两种干细胞在生物学特性及向软骨细胞分化方面进行了初步探讨.     

血清对体外培养成年人关节软骨细胞生长的影响

目的观察不同血清及血清浓度对成人关节软骨的细胞（AHAC）生长的影响，为软骨细胞移植的临床应用提供血清选择。方法用无血清、胎牛血清（FBS）和人AB血清及不同浓度血清在加或不加生长因子条件下培养成年人关节软骨细胞，比较细胞增殖和生长情况。结果对于AHAC，人AB血清培养优于FBS；合适的人AB血为10％；合适的FBS浓度为20％；无血清培养细胞增殖非常缓慢；不加因子用人AB血清培养细胞梭形化明显，加用生长因子后与使用FBS在形态上一致。结论10％浓度的人血清是AHAC体外培养的合适血清和浓度选择。     

组织工程关节软骨研究进展

软骨损伤是骨科较为常见的疾患。创伤、骨软骨炎、骨性关节炎、髌骨软化等均可引起软骨损伤。研究表明[1～3 ] ,成年关节软骨修复能力非常有限,直径<3mm可部分或全部修复,直径>4mm不能自行修复。1　软骨缺损的常用修复手段1.1　软骨下穿透术软骨下钻孔,微骨折,短期内能恢复破坏