白细胞介素6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的观察重组人白细胞介素6（rIL-6）在体外对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达的影响。方法浓度为25ng／mL的IL-6刺激HK-2细胞,在0h、24h、48h、72h不同时间点,分别应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、免疫荧光技术检测HK-2细胞中α—SMA mRNA及蛋白的表达。结果与刺激前比较,IL-6以时间依赖方式上调HK-2细胞α—SMA mRNA的表达、α—SMA蛋白表达逐渐增强。结论IL-6可诱导体外培养的肾小管上皮细胞表达α—SMA。     

白细胞介素6刺激人近端肾小管上皮细胞-α-平滑肌肌动蛋白的表达的机制研究

目的观察白细胞介素6（IL-6）在体外对人近曲肾小管上皮细胞株（HK-2）信号转导因子和转录活化因子1（STAT1）酪氨酸磷酸化的影响,探讨IL-6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的分子机制。方法采用流式细胞仪检测10、25、50 ng/mL浓度的IL-6刺激48 h后α-SMA阳性细胞表达百分数;采用Western blot方法检测0、5、10、25、50 ng/mL的IL-6刺激30 min以及IL-6（25 ng/mL）刺激0、15min、30min、60min、120min后P-STAT1蛋白的表达水平;同样方法检测,AG490预处理细胞4 h,IL-6（25 ng/mL）分别刺激30 min后及48 h后P-STAT1和α-SMA蛋白表达水平。结果与刺激前比较,IL-6以剂量依赖方式上调α-SMA阳性细胞表达百分数;与刺激前比较,IL-6以时间和剂量依赖方式上调HK-2细胞P-STAT1的表达,高峰发生在30 min;AG490部分抑制STAT1激活,下调α-SMA蛋白的表达。结论HK-2细胞中,信号蛋白STAT1酪氨酸磷酸化介导了IL-6诱导的α-SMA的表达,参与了肾间质纤维化的发病过程。     

IgA肾病患者肾组织2型补体受体的表达及参与补体C3沉积的可能机制

目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy, IgAN)患者肾组织系膜细胞2型补体受体(complement receptor 2, CR2)的表达及其参与补体C3沉积的可能机制。方法选取广东省人民医院2021年8月至2022年5月肾活检确诊的IgAN患者, 按照系膜区补体C3沉积强度将患者分为补体C3沉积<2+组和补体C3沉积≥2+组, 收集基线资料、血浆和肾组织样本(以肾癌周围正常肾组织作为对照组), 采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测患者的血浆IgA和补体C3浓度, 比较不同补体C3沉积组IgAN患者的临床和病理指标、血浆IgA和C3浓度;采用免疫荧光法检测IgAN患者肾组织和肾癌周围正常肾组织中IgA、补体C3和CR2表达及共定位情况。体外培养系膜细胞, 随机分为对照组和实验组, 实验组使用IgA蛋白(2 g/L)刺激系膜细胞8 h, Western印迹法和实时荧光定量PCR法检测系膜细胞CR2的表达;通过基因本体(gene ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto e...