巨噬细胞移动抑制因子在狼疮性肾炎中的作用

目的了解狼疮性肾炎肾组织巨噬细胞移动抑制因子（ＭＩＦ）的表达及其与肾脏病理和功能损害的关系。方法采用微波免疫组化双重染色的方法，观察正常肾和狼疮肾组织ＭＩＦ表达及狼疮肾皮质ＭＩＦ＋、小鼠抗人ＣＤ６８抗体（Ｋｐ１＋）、ＭＩＦ＋Ｋｐ１＋细胞数与狼疮肾组织活动指数、肾脏组织功能损害的关系。结果狼疮性肾炎肾组织ＭＩＦ表达较正常组明显增多、增强，狼疮组肾组织ＭＩＦ＋、Ｋｐ１＋、ＭＩＦ＋Ｋｐ１＋细胞数与狼疮肾组织活动指数、肾脏病理和功能损害明显相关。结论ＭＩＦ在介导狼疮性肾炎病损中起重要作用，其上调表达可作为反映狼疮肾活动及进行性肾损害的指标。     

连续性肾替代治疗中高糖和低糖置换液、透析液对血糖的影响

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)置换液或透析液糖浓度对患者血糖的影响。方法:在23例急性肾功能衰竭(ARF)的患者中,分别采用高糖和低糖置换液或透析液行CRRT,高糖组8例使用葡萄糖浓度高于50mmol/L的置换液或透析液,低糖组15例使用葡萄糖浓度低于10mmol/L的置换液或透析液,比较CRRT前后血糖浓度的变化。结果:高糖组CRRT后第一日血糖为(27.2±5.3)mmol/L,经置换液中加入胰岛素(每2g～4g葡萄糖加入1U胰岛素),以及皮下、静脉给予胰岛素后,5例血糖降至8.7mmol/L～17.3mmol/L,3例血糖仍在20.0mmol/L以上;低糖组患者CRRT后第一日血糖水平为(9.5±3.1)mmol/L,无需另外加用胰岛素,没有发生低血糖。结论:CRRT时使用低糖置换液或透析液,患者的血糖控制较好。     

CD40在大鼠腹膜间皮细胞的表达及其功能研究

目的 研究腹膜间皮细胞CD40的表达。调节因素及其活化后与细胞间黏附分子1（ICAM-1）分泌的相关性。方法 分离，培养大鼠腹膜间皮细胞，用IFN-γ，TNF-α，IL-1刺激24h，通过逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）及流式细胞仪（FACS）检测分析间皮细胞CD40表达。通过CD40单克隆抗体（CD40mAb)活化间皮细胞CD40，用FACS检测分析间皮细胞ICAM-1的表达。结果 间皮细胞结构性表达低水平的CD40。IFN-γ，IL-1可显著增加间皮细胞表面CD40mRNA及其蛋白的表达。而以IFN-γ增幅最大，TNF-α对间皮细胞CD40mRNA及其蛋白的表达无显著增加作用。用IFN-γ增加间皮细胞CD40表达的同时，加入CD40mAb活化CD40受体可显著增强间皮细胞ICAM-1的表达。结论 腹膜间皮细胞功能性表达CD40，其与腹腔中阳性CD40配体（CD40L^ )细胞相互作用。可能在腹腔局部防御中发挥重要作用，其结果对于限制炎症的发生和发展具有积极意义。     

NADPH氧化酶在TGF-β1诱导大鼠小管上皮细胞表达炎症因子中的作用

【目的】观察转化生长因子β1（TGF—β1）对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1（MCP-1）及白细胞介素-6（IL-6）表达的影响，并探讨NADPH氧化酶在其中的作用。【方法】以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，采用TGF—β1（10ng／mL）刺激0h，2h，4h，8h，12h，24h分别收取RNA；刺激0h，12h，24h，48h，72h分别收取细胞上清液；部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI（0．1，1，5，10μmol／L）预处理1h，然后含10ng的TGF—β1无血清DMEM／F12培养液分别培养12h（收集RNA）和24h（收集细胞上清液）。所有实验重复3次。细胞内活性氧（ROS）的产生采用激光共聚焦显微镜观察。NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6mRNA的表达采用RT—PCR检测。细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测。【结果】TGF—β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达，8h为对照的2．43倍（P〈0．01），24h达3．59倍（P〈0．01）。但对p22phox、gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响。TGF—β1显著增加细胞内ROS产生，DPI预处理后ROS产生较TGF—β1刺激组降低了43．69％（P〈0．05）。TGF—β1可显著上调MCP-1和IL-6mRNA及蛋白的表达。DPI预处理可明显逆转TGF—β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达。【结论】TGF—β1可促使细胞ROS产生增加。TGF—β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达。     

NADPH氧化酶在TGF-β1诱导大鼠小管上皮细胞 表达炎症因子中的作用

 【目的】 观察转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及白细胞介素-6 (IL-6) 表达的影响,并探讨NADPH氧化酶在其中的作用?【方法】 以大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为研究对象,采用TGF-β1(10 ng/mL)刺激0 h, 2 h, 4 h, 8 h, 12 h, 24 h分别收取RNA;刺激0 h, 12 h, 24 h,48 h, 72 h分别收取细胞上清液;部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI (0.1, 1, 5, 10 μmol/L)预处理1 h, 然后含10 ng的TGF-β1无血清DMEM/F12培养液分别培养12 h (收集RNA)和24 h (收集细胞上清液)?所有实验重复3次?细胞内活性氧(ROS)的产生采用激光共聚焦显微镜观察?NADPH氧化酶p22phox?gp91phox?p47phox和 p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6 mRNA的表达采用RT-PCR检测?细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测?【结果】 TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达, 8 h为对照的2.43倍 (P < 0.01),24 h达3.59倍(P < 0.01)?但对p22phox?gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响?TGF-β1可显著增加细胞内ROS产生, DPI预处理后ROS产生较TGF-β1刺激组降低了43.69% (P < 0.05)? TGF-β1可显著上调MCP-1和IL-6 mRNA及蛋白的表达?DPI预处理可明显逆转TGF-β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达?【结论】 TGF-β1可促使细胞ROS产生增加?TGF-β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达?     

Aquarius血液净化系统临床应用常见报警原因及处理

目的回顾分析Aquarius血液净化系统临床应用常见报警原因,并针对原因及时、正确地处理报警故障,确保治疗顺利进行。方法总结我科2006年4月至2007年8月,应用A-quarius危重症血液净化系统治疗重症急慢性肾功能衰竭(acute and chronic renal failure,ARF)和多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction,MODS)患者996例次,共治疗13130小时,在治疗的过程中出现报警的原因,分析Aquarius血液净化系统的特点、使用方法及处理常见报警原因。结果152例次患者在使用Aquarius危重症血液净化系统进行连续性肾脏替代治疗(continuousrenal replacement therapy,CRRT)时出现报警故障,140例经过原因分析,及时消除报警故障,12例寻求工程师维修。结论及时、正确处理Aquarius血液净化系统的报警故障,可保证CRRT的顺利进行,延长透析器及管道的使用时间。     

随机对照观察托拉塞米片治疗水肿性疾病的疗效和安全性

目的观察国产托拉塞米片在水肿性疾病中的利尿效果及安全性。方法采用随机、双盲、多中心对照研究方法。国产托拉塞米片与呋塞米片的用药剂量比为1∶2。结果共观察了214例肾病水肿、心力衰竭和肝硬化腹水患者,其中托拉塞米组106例,呋塞米组108例。用药前托拉塞米组和呋塞米组尿量分别为(1 067.1±514.5)和(1 111.8±528.0)mL.d-1(P=0.428),用药后d 3尿量即增至(1 714.7±760.4)和(1 566.0±643.3)mL.d-1(与用药前比较,P均<0.01);2组利尿有效率分别为90.0%和86.5%(P=0.443)。同时2组患者用药后体重、腹围也显著降低(P<0.05),心力衰竭患者在用药后心功能也得到一定程度改善。血清电解质紊乱是2组患者主要的不良事件,发生率分别达11.3%和10.2%,但没有见到严重不良事件发生。结论国产托拉塞米片治疗水肿性疾病利尿效果显著,不良反应较小,与呋塞米片无显著差异。     

清道夫受体AⅠ/Ⅱ对小鼠脂质代谢的影响

目的:鉴定清道夫受体AⅠ/Ⅱ(SR-AⅠ/Ⅱ)基因敲除小鼠, 观察SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除对小鼠脂质代谢的影响。方法:应用SR-AⅠ/ⅡcDNA基因部分序列作探针, 用Southernblot方法检测SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除小鼠及其同系对照小鼠靶基因敲除结果, 用生化分析仪检测血脂、载脂蛋白和血肌酐, 观察SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除和未敲除小鼠分别在普通饮食和高脂饮食情况下脂质代谢的改变情况。结果:SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除后小鼠的低密度脂蛋白(LDL)、体重较正常对照小鼠明显增高(P<005), 出现了脂质代谢严重失衡, 在高脂饮食情况下这种失衡更为明显, 体重、LDL的升高幅度均大于对照组(P<0.01).结论:SR-AⅠ/Ⅱ参与对组织和循环中的LDL的摄取和清除, 有利于保持机体脂质代谢的正常调节。小鼠SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除后脂质代谢发生了明显紊乱, 机体对脂质代谢的调节功能减弱。     

骨髓间充质干细胞共培养减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞损伤

目的：观察骨髓间充质干细胞对顺铂所致的肾小管上皮细胞损伤影响并探讨其机制。方法:①从小鼠骨髓中分离及鉴定间充质干细胞；②流式细胞仪检测顺铂所致肾小管上小管上皮细胞的坏死及凋亡状况。③骨髓间充质干细胞与肾小管上皮细胞共培养后，观察肾小管上皮细胞的坏死及凋亡状况。结果:细胞凋亡是顺铂致肾小管上皮细胞损伤的重要机制；骨髓间充质干细胞与肾小管上皮细胞间接共培养条件下，肾小管上皮细胞数量明显增高而肾小管上皮细胞的凋亡百分率明显降低；直接共培养较间接共培养肾小管上皮细胞数量增加更为明显。结论:骨髓间充质干细胞抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡及促进肾小管上皮细胞增殖，这一作用可能与骨髓间充质干细胞的旁分泌作用密切相关。     

透析方式不影响慢性肾衰患者血浆内皮素、心钠素和甲状旁腺素水平的变化

对１２例持续非卧床腹膜透析（ＣＡＰＤ）维持一年以上和１６例维持一年以上血液透析的慢性肾衰透析患者（其中９例合并高血压），用放射免疫分析测定血浆内皮素（ＥＴ）、心钠素（ＡＮＰ）和甲状旁腺素（ＰＴＨ）的水平，以观察经ＨＤ和ＣＡＰＤ的慢性肾衰患者血浆ＥＴ、ＡＮＰ和ＰＴＨ的变化。慢性肾衰患者血浆ＥＴ、ＡＮＰ和ＰＴＨ浓度均较对照组显著升高，而透析８周前、后差异不显著，合并高血压的透析患者ＥＴ、ＡＮＰ和ＰＴＨ较对照组显著升高，但与无高血压的透析组比，差异也不显著。结果表明ＥＴ、ＡＮＰ和ＰＴＨ在慢性肾衰的发病机制中起重要作用，但ＣＡＰＤ与ＨＤ对ＥＴ、ＡＮＰ和ＰＴＨ水平的影响无明显差异。