狼疮肾炎患者尿蛋白通过p38丝裂素活化蛋白激酶信号途径刺激近端肾小管上皮细胞上调表达骨调素

目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在狼疮肾炎(LN)尿蛋白介导近端肾小管上皮细胞(HK-2)表达骨调素(DPN)中的作用。方法收集狼疮肾炎患者24h的尿液提纯总蛋白，体外刺激HK-2细胞，分别用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western印迹法观察应用p38MAPK特异性阻断剂SB203580对。HK-2细胞表达OPN mRNA及蛋白的影响：免疫荧光法检测OPN及其受体CD44在细胞中的表达。结果狼疮肾炎患者尿蛋白可刺激HK-2细胞OPN mRNA及蛋白上调表达，并呈时间和浓度依赖性，而SB203580可明显抑制这一作用。结论狼疮肾炎尿蛋白可通过p38MAPK途径刺激HK-2细胞OPN mRNA和蛋白上调表达。     

Pro-inflammatory effect of transforming growth factor β1 in rat peritoneal mesothelial cells

Objective To investigate the pro-inflammatory effect of transforming growth factor β1 (TGF-β1) in rat peritoneal mesothelial cells (RPMCs) and its machanism. Methods TGF-β1-induced RPMCs model in vitro was established, and the expression of MCP-1 in the TGF-β1-induced RPMCs was observed. The intervention of Smad7 on the expression of MCP-1 and p38 signal proteins induced by TGF-β1 in RPMCs was explored as well as the intervention of p38 inhibitor SB203580 on the expression of MCP-1 induced by TGF-β1 in RPMCs. Results TGF-β1 could stimulate MCP-1 expression in RPMCs. Compared with control group, MCP-1 mRNA levels were significantly increased after 3 h treatment with TGF-β1 (P<0.05), peak MCP-1 induction occurred at 6 h (P<0.01), and the stimulatory effect of TGF-β1 persisted through 24 h (P<0.05). MCP-1 protein levels were significantly increased after 6 h treatment with TGF-β1(P<0.05), peak MCP-1 induction occurred at 48 h(P<0.01). Over-expressed Smad7 and p38 inhibitor could reduce the expression of MCP-1 induced by TGF-β1 (P<0.05). TGF-β1 could activate p38 signaling pathway, but over-expressed Smad7 could inhibit this role of TGF-β1. Compared with control group, the expression level of p-p38 was increased in TGF-β1-stimulated group. Compared with TGF-β1-stimulated group, the expression level of p-p38 was reduced in Smad7 gene transfer group. Conclusions TGF-β1-induced MCP-1 expression in rat peritoneal mesothelial cells is p38MAPK dependent.     

结缔组织生长因子介导转化生长因子促肾小管上皮细胞转分化

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)在体外能否够促进肾小管上皮细胞的表型转化，以及这一作用与转化生长因子β(TGF—β)的关系。方法 将NRK52E肾小管上皮细胞株细胞分组处理，采用RT—PCR和Western印迹的方法检测CTGF mRNA水平和蛋白水平的表达；Western印迹和流式细胞仪观察α—SMA的表达。结果 正常体外培养的NRK52E肾小管上皮细胞表达少量的CTGF，加入TGF—β1 10ng／ml刺激48h后，CTGFmRNA和蛋白水平的表达都显著升高，α—SMA蛋白表达和荧光强度也明显增加；同时加入TGF—β1中和抗体后，CTGF和α—SMA的表达都显著降低。经过反义寡核苷酸处理48h，几乎检测不到CTGF mRNA和蛋白的表达，并且CTGF反义寡核苷酸可以基本消除TGF—β1引起的细胞α—SMA表达增强，而相同时间和剂量的CTGF正义寡核苷酸不能引起相应的改变。结论 CTGF和TGF—β1都可以促使体外培养的肾小管上皮细胞α-SMA表达增强，并且CTGF作为TGF—β1的下游效应介质而起作用，提示CTGF参与了肾小管上皮细胞的转分化。     

白细胞介素6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的观察重组人白细胞介素6（rIL-6）在体外对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达的影响。方法浓度为25ng／mL的IL-6刺激HK-2细胞,在0h、24h、48h、72h不同时间点,分别应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、免疫荧光技术检测HK-2细胞中α—SMA mRNA及蛋白的表达。结果与刺激前比较,IL-6以时间依赖方式上调HK-2细胞α—SMA mRNA的表达、α—SMA蛋白表达逐渐增强。结论IL-6可诱导体外培养的肾小管上皮细胞表达α—SMA。     

白细胞介素6刺激人近端肾小管上皮细胞-α-平滑肌肌动蛋白的表达的机制研究

目的观察白细胞介素6（IL-6）在体外对人近曲肾小管上皮细胞株（HK-2）信号转导因子和转录活化因子1（STAT1）酪氨酸磷酸化的影响,探讨IL-6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的分子机制。方法采用流式细胞仪检测10、25、50 ng/mL浓度的IL-6刺激48 h后α-SMA阳性细胞表达百分数;采用Western blot方法检测0、5、10、25、50 ng/mL的IL-6刺激30 min以及IL-6（25 ng/mL）刺激0、15min、30min、60min、120min后P-STAT1蛋白的表达水平;同样方法检测,AG490预处理细胞4 h,IL-6（25 ng/mL）分别刺激30 min后及48 h后P-STAT1和α-SMA蛋白表达水平。结果与刺激前比较,IL-6以剂量依赖方式上调α-SMA阳性细胞表达百分数;与刺激前比较,IL-6以时间和剂量依赖方式上调HK-2细胞P-STAT1的表达,高峰发生在30 min;AG490部分抑制STAT1激活,下调α-SMA蛋白的表达。结论HK-2细胞中,信号蛋白STAT1酪氨酸磷酸化介导了IL-6诱导的α-SMA的表达,参与了肾间质纤维化的发病过程。     

抗体靶向寡核苷酸复合物及SPA-PLL交联物对培养细胞的毒性作用

目的评价新型抗体靶向基因导入系统及其核心组分:葡萄球菌A蛋白-多聚赖氨酸交联物(SPA-PLL交联物)对细胞的毒性作用。方法将SPA-PLL交联物、CD44抗体和反义寡核苷酸以适宜的质量比混合即可组装成抗体靶向寡核苷酸复合物;采用噻唑蓝比色法测定该靶向复合物或SPA-PLL交联物对培养细胞存活率的影响。结果该靶向复合物和交联物在低浓度范围内(0~62.5μg/mL)对细胞毒性作用较小,在高浓度(>125μg/mL)时对细胞毒性作用显著增强;游离PLL对细胞的毒性作用较强,但游离SPA无毒性作用。结论抗体靶向寡核苷酸复合物和SPA-PLL交联物在常用浓度范围内对转染细胞无毒性作用。     

人免疫缺陷病毒合并结核分枝杆菌感染的诊治进展

结核病(TB)一直是世界范围内感染性疾病引起死亡的主要病因,并且是人免疫缺陷病毒(H IV)感染患者机会性感染和致死的主要原因[1].我国TB疫情十分严重,在全球22个结核病高负担国家中仅次于印度,位于第二位[2].感染HIV的患者较未感染人群,潜伏性结核分枝杆菌感染复燃和获得新结核分枝杆菌感染的风险增加,并且较少表现为经典的TB临床或放射学特征[3-4].此外,由于抗逆转录病毒治疗和抗TB治疗之间的重叠药物毒性和药物相互作用,以及可引发免疫重建炎症性疾病,使得HIV感染合并TB的治疗较为复杂.     

不同钙浓度透析液对维持性血液透析患者影响的对照研究

目的观察不同钙浓度(1.25mmol/L和1.75mmol/L)透析液治疗6个月对患者血压、钙、磷和甲状旁腺素影响。方法选择中山大学附属第三医院肾内科维持性血液透析患者20例,首先接受钙离子1.75mmol/L(高钙)透析液治疗6个月,而后接受钙离子1.25mmol/L(低钙)透析液治疗6个月,其它治疗不变。检测两种治疗组入组时、后3个月和6个月患者透析前后血压、血清钙、磷、甲状旁腺素、碱性磷酸酶的水平。结果使用低钙透析液单次治疗4h后血压下降(P<0.05),血钙下降7.5%(P>0.05),甲状旁腺素升高(P<0.05);而高钙透析液治疗后血压和血钙均升高(P<0.05),甲状旁腺素有所下降(P>0.05);治疗6个月后,使用低钙透析液,患者血压下降(P>0.05),血钙下降(P>0.05),血磷和钙磷乘积显著下降(P<0.05),甲状旁腺素升高(P>0.05),碱性磷酸酶升高(P<0.05);两种钙离子浓度透析液应用后收缩压、甲状旁腺素和碱性磷酸酶的变化相比差异有显著性(P<0.05)。结论单次应用低钙透析液进行透析,透析后甲状旁腺素升高,血压下降;与使用高钙透析液相比,长期应用(6个月)低钙透析液进行透析,钙负荷减轻,血钙磷乘积和收缩压下降,血清甲状旁腺素和碱性磷酸酶升高。     

深静脉置管行血液净化治疗临床病例分析

目的总结血液净化治疗患者留置临时性中心静脉导管的经验,探讨中心静脉留置导管在血液净化治疗中的应用以及中心静脉留置导管并发症的防治.方法2004年2月～2005年6月,中山大学附属第一医院肾内科行临时性单针双腔静脉导管留置术血液净化治疗病例223例,其中颈内静脉置管193例(右181例,左12例),右锁骨下静脉置管21例,股静脉置管9例(右8例,左1例).分析不同置管方法临床并发症的发生率及处理方法.结果置管术中的常见并发症有:误穿动脉8例(3.6%),皮下血肿10例(4.5%),穿刺部位渗血3例(1.3%).置管术常见远期并发症有:导管相关感染28例(12.6%),导管栓塞9例(4.0%),导管意外脱落5例(2.2%),血流量不足(血流＜180ml/min)21例(9.0%).带管时间3～155天.结论临时性中心静脉留置导管是建立血液净化治疗血管通路的一种方便快捷方法,操作技术简便,并发症低,并能提供稳定血流量,是建立血液净化治疗临时性血液通路的理想选择.     

维持性血液透析患者透析充分性与生活质量关系研究

目的：探讨血液透析不同相时分子质量毒素的透析充分性与生活质量之间的关系，为改善透析患者生活质量提供临床依据。方法：使用肾病血液透析患者生活质量表调查血液透析患者生活质量进行生活质量评分；测定患者透析前血清甲状旁腺素、β2-微球蛋白、血磷并计算尿毒素清除指数。结果：血清甲状旁腺素与肾病透析相关生活质量、症状、肾病时日常生活的影响、工作状况、认知功能、社交质量等指标呈负相关，与一般健康相关生活质量(包括体能、体力工作和生活受限、疼痛、总体健康状况、社会功能)呈负相关。β2-微球蛋白、血磷与肾病透析相关生活质量(包括症状、肾病对日常生活的影响、肾病给生活带来的负担、工作状况、认知功能、社交质量)呈负相关，并与一般健康相关生活质量呈负相关。尿毒素清除指数与肾病透析相关生活质量、一般健康相关生活质量呈正相关。结论：甲状旁腺素、尿毒素清除指数与肾病透析生活质量和一般健康状况相关生活质量的关系密切，时生活质量影响广泛；而β2-微球蛋白主要影响一般健康状况；血磷主要影响肾病透析相关生活质量。