利尿剂相关的肾损害

利尿剂是临床常用药物，广泛应用于利尿消肿、降压和脑水肿等治疗。利尿剂可直接或间接导致肾脏功能和组织学改变。利尿剂可通过细胞外容量的减少、人球和出球小动脉张力的改变和球一管反馈等机制导致肾血流量的减少和肾小球滤过率(GFR)的下降。利尿剂还可引起急性间质性肾炎、肾小管堵塞等肾脏损害；长期使用利尿剂可导致肾结石、尿沉渣异常和低钾性肾病等慢性改变，所以临床医生必须重视和避免利尿剂的肾毒性作用。     

凝血酶活性亢进加重狼疮肾炎患者Th1/Th2平衡紊乱

Th1/Th2平衡失调在狼疮肾炎 (lupusnephritis ,LN)的发病上具有重要作用 ,但Th1/Th2平衡的偏离方向尚无定论 ,各家报道不一[1 3 ] 。LN患者存在内皮细胞损伤、凝血活性亢进已众所周知[4] ,但凝血活性与Th1/Th2平衡之间存在何种关系 ?虽然Th1/Th2平衡失调引起的免疫炎症可损伤内皮细胞 ,引起凝血活性增强[4,5] 。但是 ,LN患者增强的凝血活性对Th1/Th2平衡状态又将产生何种影响 ?本文通过观察LN患者凝血状态、Th1/Th2平衡状态以及体外凝血酶刺激后外周血单个核细胞 (PBMC)表达白细胞介素(IL) 10和干扰素 (IFN) γ的变化 ,验证L…     

Pro-inflammatory effect of transforming growth factor β1 in rat peritoneal mesothelial cells

Objective To investigate the pro-inflammatory effect of transforming growth factor β1 (TGF-β1) in rat peritoneal mesothelial cells (RPMCs) and its machanism. Methods TGF-β1-induced RPMCs model in vitro was established, and the expression of MCP-1 in the TGF-β1-induced RPMCs was observed. The intervention of Smad7 on the expression of MCP-1 and p38 signal proteins induced by TGF-β1 in RPMCs was explored as well as the intervention of p38 inhibitor SB203580 on the expression of MCP-1 induced by TGF-β1 in RPMCs. Results TGF-β1 could stimulate MCP-1 expression in RPMCs. Compared with control group, MCP-1 mRNA levels were significantly increased after 3 h treatment with TGF-β1 (P<0.05), peak MCP-1 induction occurred at 6 h (P<0.01), and the stimulatory effect of TGF-β1 persisted through 24 h (P<0.05). MCP-1 protein levels were significantly increased after 6 h treatment with TGF-β1(P<0.05), peak MCP-1 induction occurred at 48 h(P<0.01). Over-expressed Smad7 and p38 inhibitor could reduce the expression of MCP-1 induced by TGF-β1 (P<0.05). TGF-β1 could activate p38 signaling pathway, but over-expressed Smad7 could inhibit this role of TGF-β1. Compared with control group, the expression level of p-p38 was increased in TGF-β1-stimulated group. Compared with TGF-β1-stimulated group, the expression level of p-p38 was reduced in Smad7 gene transfer group. Conclusions TGF-β1-induced MCP-1 expression in rat peritoneal mesothelial cells is p38MAPK dependent.     

腹透液增强腹膜间皮细胞CD40表达及其意义

目的:研究腹膜透析液对大鼠腹膜间皮细胞CD40表达的影响及CD40活化后与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)分泌的相关性, 以揭示腹膜透析时腹腔局部炎症的发生机制。方法: 分离、培养大鼠腹膜间皮细胞, 分别用IFN-γ、4.25%腹透液、4.25%腹透液+IFN-γ作为刺激因子, 通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FACS)检测间皮细胞CD40表达;并通过CD40单克隆抗体(CD40mAb)活化高表达的间皮细胞CD40, 用FACS检测间皮细胞ICAM-1的表达。结果:腹膜间皮细胞结构性表达低水平CD40mRNA及蛋白。用4.25%腹透液刺激后, 间皮细胞CD40mRNA及蛋白的表达显著高于对照组。用4.25%腹透液+IFN-γ刺激后, 间皮细胞表面CD40mRNA及蛋白的表达进一步增加, 且明显高于单纯腹透液刺激组。活化CD40受体可显著增强间皮细胞ICAM-1的表达。结论:腹膜间皮细胞可表达CD40, 4.25%透析液及IFN-γ均能显著增加腹膜间皮细胞CD40的表达。间皮细胞CD40的上调, 可能是腹透过程中腹腔局部炎症启动、放大的重要机制之一。     

Fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中的表达

目的： 研究Ⅳ型弥漫增殖型狼疮肾炎、轻微性肾小球病变及正常肾组织中趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1的表达，以及与CD68阳性巨噬细胞表达之间的相互关系，探讨fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎发病中的作用。方法： Ⅳ型狼疮肾炎患者的肾活检组织21例，轻微性肾小球病变患者的肾活检组织18例，光镜下正常的肾组织标本8例。采用免疫组织化学技术检测肾组织中fractalkine、CX3CR1及CD68的表达。结果： （1）正常肾组织和轻微性肾小球病变肾组织中fractalkine基本未见阳性表达；其受体CX3CR1阳性细胞和CD68阳性巨噬细胞仅偶见于肾小球及肾皮质间质中。（2）Ⅳ型狼疮肾炎肾小球和肾皮质间质中CX3CR1阳性细胞和巨噬细胞显著增多，且两者的表达显示高度的相关性（分别为r=0.956，P＜0.01和r=0.965，P＜0.01）。（3）Ⅳ型狼疮肾炎肾组织中fractalkine高表达于皮质肾小管上，fractalkine 阳性皮质肾小管的百分比分别与肾皮质间质CX3CR1阳性细胞数和巨噬细胞数之间高度相关（分别为r=0.720，P＜0.01和r=0.770，P＜0.01）。结论： 提示fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎的发病机制中可能占有重要地位。     

TNF-α、IL-1β、LPS对心肌细胞影响的研究

目的 :体外用TNF -α、IL - 1β、LPS刺激心肌细胞后 ,观察心肌细胞的变化。 方法 :体外培养心肌细胞 ,用不同浓度的TNF -α、IL - 1β、LPS等刺激心肌细胞后 ,分别于 8h、2 4h、4 8h观察心肌细胞有无发生肥大反应 ,于2 4h、4 8h、72h观察心肌细胞有无凋亡。结果 :在予TNF -α、IL - 1β、LPS刺激心肌细胞后 ,与对照组相比 ,10 μg/L、15μg/L的TNF -α、2 0 μg/L、10 0 μg/L的IL - 1β和 10mg/L、15mg/L、2 0mg/L的LPS均能明显促进心肌细胞肥大 ,以刺激后 2 4h明显。同时 2 0 μg/L的TNF -α、10 0 μg/L的IL - 1β和 3× 10 4g/L的LPS可引起心肌细胞凋亡 ,以 72h为明显。结论 :TNF -α、IL - 1β、LPS可以引起心肌细胞的肥大和凋亡 ,炎症反应增高可能是心血管疾病的主要原因。     

CD40在系统性红斑狼疮外周血淋巴细胞的表达

使用密度离心法分离SLE患者和正常人外周血单个核细胞 (PBMC ) ,采用流式细胞术检测B淋巴细胞白细胞分化抗原 4 0 (CD4 0 )的表达水平 ,进行SLE患者 (活动期和缓解期 )和正常人之间的比较 ;并进行B淋巴细胞CD4 0表达水平和血清抗dsDNA抗体水平及狼疮活动指数 (SLEDAI)的相关分析。结果表明 ,活动期SLE患者外周血B淋巴细胞比例 (% )和其表达CD4 0的比例 (% )均明显高于缓解期SLE患者和对照组 ,其表达CD4 0的平均荧光强度 (MFI)在活动期SLE患者最高 ,缓解期SLE患者稍低 ,对照组最低 ;相关分析结果表明 ,活动期SLE患者B淋巴细胞CD4 0的表达比例 (% )和强度 (MFI)均与血清抗dsDNA抗体及SLEDAI呈正相关 ,后两者呈高度相关 ;缓解期SLE患者B淋巴细胞表达CD4 0的强度 (MFI)和SLEDAI呈正相关。CD4 0在活动期SLE患者B淋巴细胞的表达增加 ,其水平与疾病活动度有关。     

15d-PGJ2对肾小管上皮细胞CD40及RANTES表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂15d-PGJ2对干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的人近端肾小管上皮细胞（HK-2）CD40和RANTES表达的影响。方法：体外培养人近端肾小管上皮细胞株，分组如下：（1）正常对照组；（2）IFN-γ（50μg／ml）组；（3）TNF-α（10ng／ml）组；（4）IFN-γ（50μg/ml）＋TNF—α（10ng／ml）组；（5）IFN-γ（50μg／ml）＋TNF-α（10ng／ml）分别加1、3、5μmol／L15d-PGJ2组；（6）IFN-γ＋TNF-α．刺激＋15d-PGJ2（5μmol／L）＋GW9662（PPARγ特异拮抗剂）1μmol／L组。GW9662和15d-PGJ2分别在IFN-γ和TNF-α刺激前3和2小时加入。分别采用RT-PCR、流式细胞仪（FACS）和酶联免疫法（ELISA）检测CD40和RANTES基因和蛋白的表达水平。结果：正常HK-2细胞中，CD40、RANTES有基础水平表达。IFN-γ能显著上调HK-2细胞CD40蛋白的表达；TNF-α单独刺激对CD40表达无显著影响，但能增强IFN-γ的刺激效应。IFN-γ＋TNF-α显著增加HK-2细胞RANTES的表达和分泌。15d—PGJ2呈剂量依赖式在基因和蛋白水平显著抑制IFN-γ＋TNF-α．诱导的CIMO和RANTES的表达。加入PPARγ特异拈抗剂GW9662后，能够部分逆转15d-PGJ，对CIMO和RANTES表达的抑制效应，但并不能完全阻断其作用。结论：15d-PGJ2部分通过PPARγ介导的信号途径参与抑制IFN-γ＋TNF-α．诱导的人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES的表达，从而在肾脏局部发挥免疫调节和抗炎作用。     

ERK1/2信号蛋白在糖尿病小鼠肾组织中的表达

目的： 研究细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠肾组织中的表达及活化情况，从分子信号角度探讨糖尿病肾病肾纤维化的发病机制。方法：采用STZ腹腔注射诱导小鼠糖尿病模型，并检测血糖、血肌酐、24 h尿白蛋白排泄率、肾重/体重、肾小球体积；用免疫组织化学方法检测糖尿病小鼠肾组织TGF-β₁、磷酸化ERK1/2和collagen Ⅲ的表达。结果： 腹腔注射STZ后，模型组小鼠均出现明显的多食、多饮、多尿和体重下降等糖尿病症状，血糖明显升高，血肌酐水平出现一过性增高，24 h尿白蛋白排泄率明显增加，肾重/体重比值增加，肾小球体积增大，肾小球细胞外基质明显增宽。正常肾组织有TGF-β₁和磷酸化ERK1/2的基础表达［分别为：5.26%±2.35%；（12.31±3.97）个/mm²］，糖尿病形成后，TGF-β₁、磷酸化ERK1/2水平在肾组织中的表达明显高于对照组，并持续增加到12周［分别为：15.63%±5.38% vs 对照组,P<0.01；（136.84±25.94）个/mm² vs 对照组,P<0.01］。正常肾组织有collagen Ⅲ的基础表达（1.58%±0.52%），糖尿病形成后collagen Ⅲ在肾组织中的表达均明显高于对照组，并持续增加到16周（15.28%±3.78% vs 对照组,P<0.01）。肾组织TGF-β₁、磷酸化ERK1/2的表达时相相似，并呈明显的正相关（r=0.87,P<0.01），并与肾组织collagen Ⅲ的表达相关（r=0.83,P<0.01）。结论： 细胞外信号调节激酶1/2的表达和活化可能参与小鼠糖尿病肾病肾纤维化的发病过程。