Repair of flexor tendon defects of rabbit with tissue engineering method

OBJECTIVE: To repair rabbit tendon defects with tissue engineering method. METHODS: The third passage of fetal skin fibroblast cells was labeled with 5-bromo-2' deoxyuridine (Brdu) and then seeded on human amnion extracellular matrix (HA-ECM). Using 1 cm-long-Achilles tendon defects as repairing models in the experimental group, tendon defects were core bridged with polydioxanone (PDS) and then capsulated with the complex of fibroblasts-HA-ECM. In the control group I, defective tendons were sutured with PDS following the former procedure and capsulated with HA-ECM (without fibroblasts). In the control group II, only PDS was applied to connect the defective tendons. Gross examination, light microscopy, scanning electronmicroscopy and biomechanical measurement of the repaired tendons were respectively performed at postoperative 1, 2, 3 month as well as immunohistochemical examination. RESULTS: The optimal cell concentration for seeding fibroblasts was 3.5 x 10(6) cells/ml. Cells grew well and radiated or paralleled on HA-ECM. Immunohistochemistry showed that the labeled seed fibroblasts played an important role in tendonization. The results of light microscopy, electron microscopy, and biomechanical assessment suggested that the rate and quality of tendonization in the experimental group was superior to those of the control group I and II. The tensile strength in the experimental group was the greatest, the next was in the control group I, and the worst in the control group II (P<0.05). CONCLUSIONS: HA-ECM is the excellent carrier for fibroblasts. Fibroblasts-HA-ECM complex has the capability to repair tendon defect and to tendonize with rapid rate and good performance three months after operation. Its tensile strength is 81.8% of that of normal tendon.     

PBL法在临床骨科护理见习教学中的应用

在骨科临床护理见习教学中,选取160名本科见习学生,随机分为两组.PBL组进行以问题为基础的学习(PBL),LBL组采用传统的以授课为基础(LBL)的教学法.结果PBL组理论学习成绩显著优于LBL组(P＜0.05),PBL组的问卷调查满意率也高于LBL组,表明在骨科临床护理见习教学中PBL法优于LBL法.     

转化软骨细胞与正常软骨细胞的生物特性比较

目的比较转化人关节软骨细胞与正常软骨细胞之间的生物特性。方法观察两者的细胞形态、细胞的生长曲线、血清依赖性、染色体检查、软琼脂克隆形成试验、裸鼠致瘤性。结果转化软骨细胞更趋向于长梭形。两者的生长曲线比较相似,但转化软骨细胞的饱和密度要明显高于正常软骨细胞。两者都对血清有依赖性,都为二倍体核型,均不能在软琼脂上形成克隆。经6个月观察两者都不能使裸鼠致瘤。结论转化软骨细胞的生长速度要高于正常软骨细胞。转化软骨细胞为良性转化。     

脊柱内固定术后患者支具外固定的应用与指导

目的探讨胸腰段外固定支具在脊柱融合内固定术后康复过程中的临床应用。方法对85例行脊柱融合内固定术后胸腰段应用外固定支具固定的患者均进行支具佩戴前宣教和下肢活动训练,同时讲解佩戴和卸取的具体方法、佩戴支具的注意事项、佩戴后正确的上(下)床方法及支具的保养等。结果患者均达到固定和矫正的目的,应用支具辅助后患者均能早期下床活动,疗效满意,未发生护理并发症。结论脊柱外固定支具具有良好的固定功效,增加脊柱的稳定性,缩短卧床时间。     

RNA干扰bcl-2基因对人骨肉瘤细胞株MG63增殖影响的实验研究

目的 探讨RNA干扰bcl-2基因对人骨肉瘤细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法 选用人骨肉瘤细胞进行体外培养,以siRNA分别处理MG63细胞24～72h后,MTT法检测细胞增殖,SABC免疫组织化学法检测细胞内bcl-2、bcl-xl、bax、caspase-3和C-myc蛋白表达水平.结果 RNA干扰bcl-2基因对MG63细胞增殖有抑制作用.下调bcl-2的表达的同时,上调了caspase-3蛋白表达水平,并使C-myc蛋白表达水平下调.对bcl-xl、bax的蛋白表达无明显影响.结论 RNA干扰显著降低bcl-2蛋白的表达,对人骨肉瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.     

组织工程法修复兔肌腱缺损

目的　应用组织工程的原则 ,种植成纤维细胞于人羊膜细胞外基质 (HA ECM)以修复兔的肌腱缺损。方法　从胎兔分离的成纤维细胞用 5 溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)标记后种植于人羊膜细胞外基质上。以 1cm长的兔跟腱缺损为修复对象 ,用聚酯聚二氧杂环己烷缝线 (PDS)轴心桥接肌腱缺损 ,外包种植有成纤维细胞的HA·ECM膜。术后进行功能锻炼。结果　成纤维细胞在HA·ECM上生长良好 ,放射状或平行排列。成纤维细胞 HA ECM组能够修复肌腱缺损并且腱化的速度和质量明显优于仅用PDS和HA ECM(无成纤维细胞 )修复组 ,与正常肌腱相似 ,抗张强度达正常腱的 81 8%。BrdU免疫组化显示成纤维细胞在腱化过程中起了重要的作用。术后的功能锻炼促进了修复腱的腱化及抗张强度的提高。结论　成纤维细胞 HA·ECM膜能够有效修复肌腱缺损 ,可作为肌腱修复的另一种选择方法。     

转化人关节软骨细胞的Ⅱ型胶原表型诱导

目的 用离心管聚集体培养（Aggregate culture)诱导转化人关节细胞的Ⅱ型胶原。方法 将体外长期培养的第30，40，50代转化软骨细胞消化后进行离心管培养，比较细胞在单层培养，离心管聚集体培养，以及在普通培养基，RAI诱导培养基下[2型骨形态发生蛋白（BMP－2）＋抗坏血酸盐（Ascorbate) 胰岛素（insulin)]，Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型胶原的表达和胞外基质发生情况。结果 在单层培养条件下，转化软骨细胞只表达Ⅰ型胶原，而在BAI诱导培养基及离心管聚集体培养下转化软有细胞表达的Ⅱ型胶原和大量胞外基质。结论 离心管聚集体培养是诱导转化软骨细胞Ⅱ型胶原的有效方式。     

脊柱骨折伴脊髓损伤患者的康复护理

目的:防止并发症的发生,促进肢体残存功能的恢复和重建。方法:通过对36例脊髓损伤病人进行心理、预防并发症、功能训练等护理。结果:36例患者无一出现并发症,都有不同程度好转。结论:只有通过各种正确的康复护理,才能使患者缩短疾病恢复的疗程,减轻痛苦,加速疾病的康复,最终获得尽可能多的生活自理力。     

微载体在培养人骨髓间充质干细胞成骨诱导中的作用

目的探讨微载体在培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨诱导中的作用,建立一种大量、快速获得骨组织工程种子细胞的方法.方法将普通培养瓶培养的第3代hMSCs分别应用搅拌式生物反应器和微载体成骨诱导培养,分别于培养的第2、4、6、8、10、12、14天检测诱导细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性,并与普通成骨诱导方法进行对比.观察细胞增殖情况,比较两种方法细胞增殖速度(细胞数/d).结果接种24 h后,88%的hMSCs细胞粘附于微载体并铺展,3 d后生长加速,约8～9 d后生长达最大值,最终细胞收获密度为接种时的16～22倍.细胞增殖速度约为普通培养法的3.2倍(P＜0.05).诱导细胞的ALP的活性在第12天达最大值,且微载体成骨诱导培养的细胞ALP活性与普通培养法无显著差异(P＞0.05).结论应用微载体技术可成功地进行hMSCs的成骨诱导培养和快速扩增,能满足骨组织工程的需要.