应用ERCP治疗高龄胆总管结石的临床研究

目的：探讨应用ERCP治疗高龄胆总管结石的临床疗效。方法：2007年3月至2012年1月我院应用ERCP治疗75岁以上胆总管结石患者的临床资料70例,设为观察组,收集其病因、治疗效果及相关并发症发生情况,与同期行传统手术（对照组）治疗高龄患者的临床资料进行对比性分析。结果：观察者总体有效率为94．3％（66／70）,对照组为95．7％（67／70）;观察者较对照组手术时间明显缩短（P〈0．05）、并发症率明显降低（P〈0．05）,住院时间明显缩短（P〈0．05）。结论：应用ERCP治疗高龄胆总管结石效果确切,同时可降低并发症发生率、缩短住院时间,高龄不应作为ERCP治疗胆总管结石的禁忌。     

门脉高压症断流术后门静脉系统血栓形成的诊治体会

目的探讨门静脉高压症断流术后门静脉系统血栓形成（portal vein thrombosis,PVT）的临床诊断及治疗。方法回顾性分析16例经彩色Doppler发现的门静脉高压症断流术后PVT的临床资料。结果 PVT好发于术后11～18天,临床表现为不明原因发热6例,顽固性腹水4例,上消化道再出血3例,另有3例无任何临床症状。有12例患者术后2周内血小板明显增高,9例患者D-二聚体检测阳性。经治疗后复查见门静脉血栓完全消失9例,部分消失3例,4例血栓无明显改善。结论门静脉高压症断流术后PVT临床表现无特异性。手术操作规范化、术后动态监测血小板数量、D-二聚体、早期彩色Doppler检查及早期行抗凝、溶栓疗法是防治术后门静脉系统血栓形成的有效方法。     

小干扰RNA沉默胚胎生殖细胞Nanog基因的表达

目的:建立胚胎生殖细胞中沉默多能干细胞特异转录因子Nanog表达的方法。方法:通过检测碱性磷酸酶、SSEA-1和Oct4标志蛋白,鉴定体外培养的胚胎生殖细胞(EG细胞),通过脂质体介导作用,将Nanog特异性小干扰RNA(siRNA)转染EG细胞,应用半定量RT-PCR检测转染24h、36h、48h后EG细胞中Nanog mRNA的表达水平,并应用免疫荧光技术检测转染36h、48h后EG细胞中Nanog蛋白的表达水平。结果:培养细胞具有高度碱性磷酸酶活性,SSEA-1、Oct4阳性,为保持未分化状态的EG细胞。转染后Nanog mRNA和蛋白表达均受到抑制。结论:脂质体介导siRNA能有效沉默EG细胞中Nanog基因的表达,为进一步探讨Nanog对胚胎生殖细胞的调控机制奠定了基础。     

内镜下微波治疗胃肠道息肉15例体会

我院自1992年3月至1993年1月,通过微波辐射导线经各种内镜进行胃肠道息肉的治疗,计15例51枚,取得满意效果,现报道如下。 临床资料:15例中男12例,女3例,年龄20～72岁,平均54岁。8例有腹痛、腹泻,便秘与腹部压痛等症状与体征,7例无症状、体征。本组中单发息肉6例,多发息肉9例。息肉直径0.1～0.9cm 27枚,1～1.9cm 22枚,>2cm 2枚。广基息肉23枚,亚蒂息肉17枚,短蒂息肉7枚,长蒂息肉4枚。位于乙状结肠19枚,横结肠10枚,升结肠9枚,降结     

氟喹诺酮类在消化道感染中的应用氟喹诺酮治疗伤寒62例分析

目前国内对伤寒治疗的抗生素选择表现多样化倾向,喹诺酮类在治疗伤寒中的地位已日趋重要,本文就我院使用氟喹诺酮类治疗62例伤寒,其中诺氟沙星32例、依诺沙星20例、环丙沙星10例作了报告。结果显示,体温复常天数分别为6.53±0.527、4.56±0.273和4.23±0.321天,症状消失天数分别为6.88±0.398、5.16±0.327和5.16±0.327天。嗜伊红细胞回升天数分别为7.93±0.7、6.15±0.792和6.14±0.825天,治     

9 ku颗粒溶素真核表达质粒的构建与分泌表达

目的:构建能分泌表达人9 ku颗粒溶素(granulysin)的真核质粒,为下一步利用颗粒溶素基因治疗肿瘤奠定基础.方法:以含有颗粒溶素cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得含分泌肽编码基因的9 ku的颗粒溶素基因片段后,定向插入真核表达载体pBudCE4.1中,获得重组表达质粒pBudCE4.1-S9K,通过PCR,双酶切及插入片段序列测定对重组质粒进行鉴定;采用RT-PCR,免疫细胞化学与Dot-ELISA法检测pBudCE4.1-S9K在RAW264.7细胞的瞬时表达与分泌.结果:成功扩增出含分泌肽编码基因的9 ku的颗粒溶素基因片段;经酶切,PCR及测序鉴定证明得到读码框正确的重组质粒;转染细胞证实可分泌表达9 ku颗粒溶素.结论:成功构建能分泌表达9 ku颗粒溶素真核表达质粒pBudCE4.1-S9K.     

人工肝联合熊去氧胆酸治疗老年戊型肝炎疗效观察

目的观察人工肝支持系统（ALSS）联合熊去氧胆酸治疗老年重型戊型肝炎的临床效果。方法选择老年重型戊型肝炎患者78例．随机分为观察组37例和对照组4l例。对照组在内科综合治疗的基础上加用人工肝血浆置换．观察组在对照组基础上联合熊去氧胆酸治疗;观察两组患者治疗前后血清总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、清蛋白（Alb）、血氨（AM）及凝血酶原活动度（胛A）等水平变化和疗效。结果观察组患者乏力减轻,消化道症状得到改善．肝功能明显好转,血清Alb、町A水平较治疗前明显增高,血清TBIL、AlJrr、AM水平降低。与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）．．观察组显效11例,有效19例,无效7例,总有效率81．08％;对照组显效9例,有效15例,无效17例,总有效率58．54％。两组总有效率比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论人工肝支持系统联合熊去氧胆酸治疗可提高老年重型戊型肝炎的治愈率．值得推广。     

锌离子依赖的金属蛋白酶-1体内抑制分枝杆菌的抗原处理

目的：在小鼠体内观察卡介苗的锌离子依赖的金属蛋白酶-1（Zinc metalloprotease-1,Zmp1）对结核分枝杆菌抗原PPE68处理的影响。方法：6～8周龄BALB/c小鼠随机分为5组,分别为pBudCE4.1空质粒对照组（n=7）、表达PPE68抗原肽的pBud－CE4.1-PPE68p质粒组（n=9）、表达PPE68抗原的pBudCE4.1-PPE68质粒组（n=9）、PPE68抗原和Zmp1共表达的pBudCE4.1-PPE68-Zmp1质粒组（n=10）及PPE68抗原肽和Zmp1共表达的pBudCE4.1-PPE68p-Zmp1质粒组（n=8）。各组质粒电转化减毒沙门菌株SL7207构建相应的重组沙门菌。以灌胃方式将各组沙门菌免疫小鼠3周。收集小鼠血液和肺肠灌洗液,采用ELISA法测定血清中IFN-γ、IL-12含量及肺与肠道sIgA的含量;分离培养脾细胞,用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果：与PPE68抗原组相比,PPE68和Zmp1共表达组的IFN-γ（117.29±16.86,P=0.034）、IL-12（40.46±7.11,P=0.0037）、淋巴细胞刺激指数SI（3.30±0.49,P=0.004）均降低;与PPE68抗原肽组相比,PPE68抗原肽和Zmp1共表达组相应因子含量下降不明显,IFN-γ（132.75±28.40,P=0.070）、IL-12（55.43±11.78,P=0.198）、SI（4.70±1.57,P=0.124）。结论：卡介苗的Zmp1影响结核分枝杆菌抗原PPE68的处理过程,这可能是影响BCG免疫效果的重要原因。     

结核分枝杆菌RpfA蛋白的原核表达、鉴定和纯化

目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)复活促进因子A(Resuscitation-promoting factor,ARpfA)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出RpfA基因(1 224bp),然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pET32aα( )载体连接,转入大肠杆菌Top10;阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.测序正确后,将重组质粒转化到的大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,由盯启动子调控表达了RpfA蛋白;利用His-tag in-gel Stain对表达蛋白进行鉴定,最后对目的蛋白进行纯化.结果:双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与文献报道一致.经SDS-PAGE分析和His-tag in-gel Stain鉴定均发现66ku处有特异性蛋白条带.结论:成功克隆并构建了RpfA基因的重组表达质粒pET32 α( )-RpfA,并获得了高纯度的重组蛋白,为以后的深入研究奠定了基础.     

肠道病毒D68型感染前后转录组分析及差异表达基因的验证

目的 探讨肠道病毒D68型(enterovirus D68,EV-D68)感染前后宿主细胞转录组的表达变化,寻找与EV-D68感染的相关基因及信号通路,为初步探索EV-D68的感染机制奠定基础.方法 将病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)0.01 接种于人横纹肌瘤(rhabdom...