大鼠横断性损伤坐骨神经后近端神经干分泌液的蛋白质组学分析和生物活性检测

目的　探讨横断性周围神经近侧神经的分泌功能 ,分泌液的蛋白质成分及其对运动神经元生长的影响。方法　建立大鼠坐骨神经横断后神经近端室、神经远端室以及混合室 (近加远端神经 )收集室模型。用蛋白质双向电泳技术和质谱分析法分析 3种收集室内液体 (收集液 )的蛋白质成分 ,并以 3种收集液培养脊髓前角运动神经元。结果　大鼠坐骨神经断端的混合室、近端室和远端室均有淡黄色清亮液体 ,其蛋白质浓度分别为 ( 5 .45± 1.2 )mg/ml ,( 3 .87± 0 .7)mg/ml和 ( 5 .68± 1.5 )mg/ml。收集液蛋白质双向电泳结果显示 3组蛋白质图谱的图案模式相似。混合室、近端室和远端室组分别检测到 10 98± 3 4,985± 47和 10 2 1± 3 6个点。蛋白质点主要分布在pH4～ 8,分子量在2 5～ 90kD的范围内。应用 3组神经断端收集液培养运动神经元发现 ,3种收集液所培养的运动神经元的细胞存活数、神经元的胞体面积、突起长度总体上大于对照组 ;实验组之间无明显差异。结论　( 1)大鼠坐骨神经横断后 ,其近端神经干具有与远端神经干相似的分泌功能 ;( 2 )蛋白质双向电泳图谱的图案显示 3种收集室的蛋白质具有同源性 ;( 3 ) 3种收集液都能促进运动神经元的存活和生长 ,且近端室和远端室收集液的作用没有差别。     

PPARγ在神经干细胞的表达

[目的]探讨神经干细胞(NSCs)增殖和分化过程中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况及意义.[方法]体外分离培养神经干细胞,诱导其分化,先用免疫荧光法查看PPARγ在NSCs中的定位,然后分别取未分化的及诱导分化后d1、d5、d9的NSCs,应用RT-PCR和Western Blot法检测各相应时间点NSCs内PPARγ的mRNA及蛋白表达.[结果]成功培养大量未分化呈巢状悬浮生长的神经干细胞团,并诱导其分化为神经元和神经胶质细胞.PPARγ蛋白存在于NSCs细胞核内,并在NSCs未分化阶段高水平表达,NSCs诱导分化后则表达量随时间延长而逐渐下降.[结论]在NSCs的增殖阶段,PPARγ的表达较高,而在分化过程中,表达量逐渐减少,提示PPARγ可能对NSCs的增殖和分化起重要作用.     

吸气肌训练对食管癌根治术后患者心肺功能及生活质量的影响

目的观察术前和术后吸气肌训练对食管癌根治术后患者心肺功能及生活质量的影响。 方法共选取60例择期拟行食管癌根治术患者,采用随机数字表法将其分为对照组及观察组,每组30例。2组患者均给予常规治疗（包括腹式呼吸、缩唇呼吸和有效咳嗽、咳痰技巧训练）,观察组患者在此基础上应用呼吸训练器进行深吸气训练,每天训练4次,每次训练20min,共训练10d(包括术前5d、术后5d)。分别于入院时、术前1d、术后第1天、术后第3天及术后第5天进行呼吸肌力量检测、血气分析、6min步行试验(6MWT)、Borg呼吸困难评分;并于入院时、术后第5天时检测2组患者肺功能,同时运用医院焦虑抑郁量表(HADS)和诺丁汉健康量表(NHP)对2组患者进行心理功能、生活质量评估;记录2组患者术后肺部并发症发生情况。 结果入院时2组患者上述各项疗效指标组间差异均无统计学意义(P&rt;0.05);术后第1天2组患者呼吸功能及运动能力均急剧下降,Borg评分明显增加,随后逐渐好转,但与入院时差异仍具有统计学意义(P<0.05);术后第5天时观察组患者呼吸功能［最大吸气压为(67.41±14.53)mm H2O、最大通气量为(79.83±5.37)L］、6MWT［(427.19±46.52)m］、Borg评分［(1.45±0.48)分］、术后焦虑评分［(8.14±2.80)分］、NHP总分［(128.91±25.12)分］、NHP疼痛评分［(24.66±10.12)分］、NHP睡眠评分［(25.18±9.75)分］及NHP身体活动评分［(22.81±10.72)分］均较对照组明显改善,组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。 结论术前及术后吸气肌训练可显著改善食管癌患者术后心肺功能,减轻术后焦虑症状,提高围手术期患者生活质量,该疗法值得临床推广、应用。     

盐酸右美托咪定应用于妇科腹腔镜手术不同时间点对患者术后临床疗效的影响

目的探讨和研究盐酸右美托咪定在不同时间点应用于妇科腹腔镜手术对患者术后临床疗效的影响。方法选取2017年8月至2019年5月在河南科技大学第一附属医院全身麻醉下行妇科腹腔镜手术108例患者为研究对象,根据随机数字表法随机分为术前给药组、术中给药组和术后给药组,每组各36例。三组均进行全身麻醉,术前给药组在术前10min给予盐酸右美托咪定0.5μg/kg泵注,术中给药组在手术结束前40min时泵注盐酸右美托咪定0.5μg/kg,术后给药组将盐酸右美托咪定0.5μg/kg加入镇痛泵中。观察和比较三组术后的临床效果。结果①术前给药组和术中给药组术后0.5h、2h视觉模拟评分明显低于术后给药组(P<0.05);术前给药组和术中给药组术后0.5h、2h视觉模拟评分比较,差异无显著性(P>0.05);三组术后12h、24h的视觉模拟评分比较,差异无显著性(P>0.05)。②术前给药组和术中给药组术后0.5h、2h、12h和24h Ramsay镇静评分明显低于术后给药组(P<0.05);术前给药组术后0.5h、2h、12h的Ramsay镇静评分均明显低于术中给药组(P<0.05)。③术前给药组术后0~2h、>2~12h和>12~24h恶心呕吐发生率均明显低于术中给药组和术后给药组(P<0.05);术中给药组术后0~2h恶心呕吐发生率明显低于术后给药组(P<0.05)。④术后三组患者发生心动过缓、心动过速、寒战、低血压等不良反应发生率比较,差异无显著性(P>0.05)。结论在妇科腹腔镜手术前和手术中使用盐酸右美托咪定具有良好的镇痛和镇静作用,但术前10min使用盐酸右美托咪定0.5μg/kg对患者术后的镇痛和镇静的临床效果更好,且能明显降低术后恶心呕吐的发生率。     

神经干细胞移植对大鼠视神经损伤后节细胞的保护作用

目的探讨神经干细胞（NSCs）移植对视神经受损SD大鼠视网膜节细胞（RGCs）的保护作用。方法将48只健康成年SD大鼠随机分为N组（NSCs移植组）和C组（对照组），均使用精确校准方法在右眼造成部分视神经损伤，左眼作为正常对照。从胚胎SD大鼠海马分离NSCs。利用细胞培养和体内移植技术。将培养后的NSCs注入N组大鼠右眼玻璃体内，C组大鼠右眼玻璃体内注入同等体积的PBS。处死前3d在双上丘注射3％快蓝逆行标记双眼RGCs。将大鼠分别于注射NSCs或PBS后7d、14d、21d、28d处死，各分为4组。每组6只。分离视网膜置于荧光显微镜下，摄影输入计算机图像分析仪计数RGC。计算RGC标识率。另取6只健康成年SD大鼠作NSCs移植，分别于移植后7d、28d处死，每时间段3只。通过视网膜免疫荧光切片观察NSCs在视网膜的存活、整合情况。结果N组大鼠各时间段RGCs标识率与C组同时间段比较均增高，有显著性差异（P〈0．01）；N组与C组RGCs标识率均随时间延长而降低。且前后段时间比较有显著性差异，但N组降低速度明显慢于C组。NSCs移植7d后部分移植细胞迁移进入视网膜的内网层和节细胞层。28d后可见移植细胞广泛整合至宿主视网膜内。结论NSCs移植入视神经损伤大鼠视网膜后可提高视网膜神经节细胞的存活率．对受损的节细胞具有一定的保护作用。     

血管紧张素Ⅱ诱导Toll样受体4在腹膜间皮细胞的表达及其对脂多糖诱导CD40表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对原代培养大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在脂多糖（LPS）诱导的核转录因子κB （NF-κB）活化及CD40表达中的作用。 方法 分离及培养RPMC。用不同浓度AngⅡ（10－9、10－8、10－7、10－6 mol/L）刺激细胞及用10-7 mol/L AngⅡ刺激细胞不同时间（mRNA为1、2、4、8、12、24、48 h和蛋白为6、12、24、36、48 h），观察血管紧张素1型受体（AT1R）阻滞剂洛沙坦（10－5 mol/L）和血管紧张素2型受体（AT2R）阻滞剂PD123177（10-5 mol/L）对AngⅡ诱导TLR4表达的影响。将细胞随机分为下列4组：对照组、AngⅡ (10－7 mol/L)组、LPS(1 mg/L)组、AngⅡ (10－7 mol/L)+LPS(1 mg/L)组，观察AngⅡ对LPS诱导的NF-κB激活和CD40表达的影响。RT-PCR检测TLR4、CD40 mRNA表达；Western印迹检测TLR4、IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、NF-κB p65、磷酸化NF-κB（p-p65）蛋白表达；免疫荧光检测细胞NF-κB p65亚单位的表达及分布。 结果 (1)10－9、10－8、10－7、10－6 mol/L AngⅡ作用RPMC 12 h，TLR4 mRNA表达分别增加70.5%、89.5%、102.9%和121.9%；作用24 h TLR4蛋白表达分别增加12.1%、27.7%、51.2%和41.6%。AngⅡ（10－7 mol/L）作用RPMC不同时间，TLR4 mRNA表达高峰为8 h和12 h（P < 0.01），蛋白表达高峰为12 h和24 h（P < 0.01）。(2)洛沙坦阻断后，AngⅡ诱导的TLR4表达与未阻断组比较，下调33.5%（P < 0.05）。PD123177对AngⅡ诱导的TLR4表达无显著影响（P > 0.05）。(3) 与正常对照组比较，LPS作用60 min p-IκBα/IκBα、p-p65/p65表达分别上调362.6%（P < 0.01）和67.4%（P < 0.05）；作用4 h CD40 mRNA表达上调299.9%（P < 0.01）；与LPS组比较，AngⅡ预刺激24 h加LPS作用60 min，p-IκBα/IκBα、p-p65/p65表达分别上调49.1%（P < 0.01）和29.3%（P < 0.05）；作用4 h CD40 mRNA表达上调56.8%（P < 0.01）。(4)免疫荧光结果显示正常对照组与AngⅡ组细胞中，p65信号定位于细胞胞质；LPS作用60 min，p65信号从胞质进入胞核；AngⅡ+LPS组NF-κB p65胞核信号显著增强。 结论 AngⅡ呈浓度、时间依赖性诱导RPMC TLR4表达，并显著增强LPS诱导NF-κB激活及CD40的表达。提示腹膜组织局部产生的AngⅡ可能对LPS诱导的腹膜组织炎性反应具有放大作用。     

WR-2721及胎肝对放烧复合伤小鼠的防治作用

重度放射损伤复合重度烧伤小鼠伤前给WR-2721[S-2(3-氨丙基氨基)乙基硫代磷酸]预防,伤后输注1×10~6同种异基因胎肝细胞悬液治疗,能明显降低动物死亡率,延长死亡动物平均活存日。与对照动物相比,外周血白细胞计数、骨髓有核细胞总数、骨髓CFU-C(粒系造血干细胞)损伤轻、恢复快。外周血酯酶染色的T淋巴细胞计数改变不如骨髓CFU-C变化明显。输注胎肝治疗合并应用辐射防护剂WR-2721对重度放射损伤复合重度烧伤的效果,超过单用胎肝细胞输注或WR-2721的效果。     

微量元素制剂对放烧复合伤小鼠造血功能的影响

<正> 放射损伤复合烧伤对造血功能可产生明显的抑制作用。并且,造血障碍是放烧复合伤最基木的病理改变之一.它决定着病程的转归.因此,保护造血、促进造血恢复就成为放烧复合伤治疗的主要环节。微量元素在体内含量虽极少,但对机体细胞的增殖、分化、组织器官的功能均有重要作用.本文研究了微量元素制剂对放烧复合伤小鼠造血功能的影响,以期能