腺病毒介导的细胞因子基因转染对小鼠巨噬细胞功能的影响

探讨重组腺病毒介导的细胞因子基因转染对巨噬细胞体外抗肿瘤免疫功能的影响。方法通过重组腺病毒的介导，将白细胞介素４（ＩＬ－４）及巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）基因转染至小鼠腹腔内巨噬细胞，并检测其上清中ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ的水平；同时检测基因转染后巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，及其分泌的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、ＩＬ－１、一氧化氮（ＮＯ）水平与主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）Ⅱ类分子的表达情况。结果基因转染后４小时，巨噬细胞即可表达较高水平的ＩＬ－４和（或）Ｍ－ＣＳＦ，转染后１８小时，巨噬细胞上清中ＩＬ－４水平为９５Ｕ／ｍｌ，Ｍ－ＣＳＦ为３５Ｕ／ｍｌ；转染后巨噬细胞杀伤活性明显升高，两者联合应用并以内毒素脂多糖（ＬＰＳ）协同刺激时，这一升高更为明显；其上清中ＴＮＦ、ＩＬ－１及ＮＯ水平均有不同程度的升高；ＭＨＣⅡ类分子的表达在ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ联合转染组有所增强。结论巨噬细胞中ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ基因的表达可以增强其抗肿瘤免疫功能。     

联合基因联合转染胶质瘤细胞皮下接种对机体免疫功能的影响

我们用腺病毒作载体 ,将B7 1基因和IL 2基因联合转染脑胶质瘤细胞后小鼠皮下接种 ,观察了其对机体免疫功能的影响。一、材料和方法1.动物与细胞系 :昆明小鼠 ,雌性 ,6～ 8周龄 ,体重 18～ 2 0 g ,购自第二军医大学实验动物中心。G42 2小鼠胶质瘤细胞系由北京神经外科研究所建株。Yac 1、P815、CTLL 2和L92 9由第二军医大学免疫学教研室常规传代培养。小鼠B7 1基因和IL 2基因腺病毒载体由日本Hamada教授赠送。51Cr购自Amer sham公司 ;MTT购自Fluka公司 ;ConA购自Sigma公司 ;基因重组IL 2标准品购自Ceteus公司 ;重组小鼠TNF标准品…     

017 树突状细胞体内迁移机制研究进展

CD34+骨髓前体细胞在MIP-1、MCP-3及RANTES等趋化因子的作用下，经毛细血管迁至外周非淋巴组织。随着抗原刺激，树突状细胞细胞膜表面趋化因子受体CCR5减少，而CXCR4增多。树突状细胞对CXCR4相应配体SDF-α，MIP-3β反应性升高，继而在这些细胞因子的趋化下迁至淋巴结T区。树突状细胞体内迁移过程同时伴有细胞由未成熟向成熟转化。     

γ-干扰素基因修饰肝细胞治疗血吸虫病肝纤维化实验研究

目的探讨γ干扰素（ＩＦＮγ）基因修饰的肝细胞经脾移植抗血吸虫病肝纤维化作用。方法采用ＥＬＩＳＡ和免疫组化方法，动态分析日本血吸虫感染小鼠ＩＦＮγ和Ⅰ、Ⅲ型胶原水平及其相互关系，并将小鼠ＩＦＮγ重组腺病毒转染的肝细胞经脾移植到感染１６周小鼠，分析ＩＦＮγ基因治疗血吸虫病肝纤维化的作用。结果感染４周时，小鼠ＩＦＮγ水平明显升高，在感染１２周时达高峰；但在１６周以后ＩＦＮγ水平明显下降，而Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成持续增高；ＩＦＮγ基因修饰的肝细胞经脾移植后能稳定有效地表达，显著降低Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成、沉积，减轻肝纤维化程度。结论ＩＦＮγ可能与Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成、沉积有关；ＩＦＮγ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用。     

国际免疫学会议在上海举行

由第二军医大学、上海市免疫学会、中国免疫学会联合主办、第二军医大学免疫学教研室具体承办的上海国际免疫学会议于1999年10月23～26日在上海召开。参加本次会议的代表328名,来自中国、美国、英国、法国、德国、瑞曲、瑞士、意大利、奥地利、比利时、荷兰、澳大利亚、以色列、日本、新加坡、泰国、印度、南朝鲜、中国香港特别行政区、中国台湾等20个国家和地区。会议共收到稿件407篇,其中42篇被选作大会发言,68篇作分会报告,96篇作展示交流。本次会议是我国免疫学界承办的规模最大的国际免疫学会议。本次会议的共同主席为美国Ｍｉｃｈａｅ…     

吲哚2,3-双加氧酶作为信号分子参与免疫耐受的调节

吲哚2,3-双加氧酶1(Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是酪氨酸代谢过程中重要的限速酶,在包括树突状细胞(dendritic cell,DC)在内的多种细胞中能催化酪氨酸降解。最近发现IDO1是一个重要的免疫调节分子,参与多种生理和病理过程,包括感染、过敏、自身免疫性疾病、慢性炎症、移植排斥反应以及肿瘤免疫逃逸等。     

MHCⅠ类分子及ICAM-1在IL-2、IL-4、IL-6基因转染的瘤苗在诱导CTL中的作用

非特异性酯酶同工酶(x-NAE isoenzyme)活性的异常升高及异常同工酶谱的表达与恶性肿瘤的发生密切相关.抗胃癌生物活性肽是从处理后胃癌细胞诱导的相关动物脾脏中提取出来的一种新型生物学应答调节剂(BRM,Biological respo- nse modifier).实验表明,这一活性物质对胃癌细胞有很强的特异性抑制作用,并能在体内产生多种生物学效应.本文在此研究基础上,进一步探讨了其抗癌效应过程中对x-NAE同工酶代谢的影响,结果表明:体内注射抗胃癌生物活性肽,不仅使荷瘤鼠皮下肿瘤生长显著减慢(P<0.01),同时使x-NAE同工酶谱表型发生明显变化,部分同工酶带型消失.提示:这一抗胃癌生物活性肽对荷瘤小鼠体内x-NAE同工酶蛋白表达及其基因表达产生了明显的生物调节作用.     

γ-干扰素基因修饰肝细胞对感染日本血吸虫小鼠TGF-β_1及其受体的影响

目的： 探讨γ－干扰素 （ＩＦＮ－γ） 基因治疗对感染日本血吸虫小鼠转化生长因子－β１ （ＴＧＦ－β１） 及其受体的影响与抗肝纤维化作用的关系。方法： 将小鼠ＩＦＮ－γ基因重组腺病毒载体转染的肝细胞经脾移植到感染日本血吸虫尾蚴１６ ｗｋ 的小鼠, 采用ＥＬＩＳＡ、免疫组化和斑点杂交方法分析小鼠血清ＩＦＮ－γ与ＴＧＦ－β１ 表达的关系, 小鼠肝内ＩＦＮ－γ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲＩＩ与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的关系。结果： ＩＦＮ－γ基因修饰的肝细胞经脾移植后能有效地表达, 显著地降低ＴＧＦ－β１ 、ＴＧＦ－βＲＩＩ的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结论： ＩＦＮ－γ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用, 可能与降低ＴＧＦ－β１及其受体有关。     

雷公藤内酯醇对人宫颈癌细胞的凋亡诱导效应

目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰的DC(AFP-DC)瘤苗经不同途径免疫后机体抗肿瘤免疫应答反应.方法:采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径回输AFP-DC瘤苗,比较观察AFP-DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用,应用4h51cr释放杀伤实验、T细胞与NK体内剔除实验等方法,观察AFP-DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用及保护性免疫反应.结果:皮下注射AFP-DC瘤苗治疗效果在抑制肿瘤生长、延长小鼠存活期方面都明显优于瘤体内注射或尾静脉注射(P＜0.05),AFP-DC瘤苗体内能更有效地诱导特异CTL细胞毒活性,能使免疫动物产生一定的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的再攻击.在AFP-DC瘤苗诱导抗肿瘤免疫排斥反应过程中,必需有CD4 T和CD8 T细胞的参与;而在其效应阶段,则依赖于CD8 T细胞的参与,CD4 T细胞为非必需;在免疫诱导及效应阶段剔除NK细胞对抗肿瘤免疫应答无明显影响.结论:皮下注射AFP-DC瘤苗能有效诱导机体产生抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肝癌免疫治疗开辟了新的途径.