血清sICAM-1和sVCAM-1在支气管哮喘发病中的意义

细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)和血管内皮细胞粘附分子 1(ＶＣＡＭ 1)均属于免疫球蛋白超家族中的成员。许多研究已证实ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1与嗜酸性粒细胞在变态反应炎症部位的移行和募集有关。有人在哮喘实验的动物模型中采用免疫组化法 ,发现在气道粘膜下ＩＣＡＭ 1〔1〕和ＶＣＡＭ 1表达增加〔2〕。参与免疫反应的粘附分子可从表达的内皮细胞或激活的淋巴细胞上脱落下来 ,进入血液成为可溶性粘附分子 ,从而发生一系列免疫反应。本研究试图通过血清中可溶性粘附分子 (ｓＩＣＡＭ 1和ｓＶＣＡＭ 1)含量的变化 ,分析其是否与支气管哮喘…     

花粉症患者血清可溶性ICAM-1与IgE的相关性

目的　探讨血清可溶性细胞间黏附分子 - 1(s ICAM- 1)在花粉症发病中的意义及其与血清总Ig E(t Ig E)水平的关系。方法　对 2 0例花粉症患者及 2 0名健康人采用酶联免疫吸附实验 (EL ISA)测定血清s ICAM- 1,用荧光免疫法测定血清 t Ig E和蒿草花粉特异性 Ig E(W6 )。结果　在 2 0例花粉症患者的血清中均定量测出蒿草花粉的特异性 Ig E;患者组的血清 s ICAM- 1和血清 t Ig E显著高于健康对照组 (P<0 .0 0 0 1) ;并且 ,花粉症患者组的 s ICAM- 1与 t Ig E存在直线正相关 (r=0 .5 86 5 ,P=0 .0 0 7)。结论　花粉症患者血清中的 s ICAM- 1明显高于正常人 ,血清 t Ig E水平与 s ICAM- 1的含量存在直线正相关。     

大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因点突变的改造

目的获取具有正确核苷酸序列的大鼠寡霉素敏感相关蛋白（OSCP）基因。方法通过限制性核酸内切酶将发生有义突变的两个OSCP基因的DI蛆克隆进行改造，并进行基因重组。结果酶切及测序显示对OSCP基因有义突变部分的纠正获得成功。结论通过基因工程技术获得具有正确核苷酸序列的大鼠寡霉素敏感相关蛋白（OSCP）基因，为OSCP的表达及结构功能研究奠定了基础。     

抗药性家蝇体内多肽的初步分析

本实验用ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对家蝇的溴氰菊酯处理株和对照株及敏感株进行了分析。经过１２代的筛选，处理株的ＬＤ５０是对照株的１７．５倍，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示：三株的成虫未见明显差异，而敏感株的蛹期则缺乏在处理株和对照株中均出现的两条蛋白条带。进一步对成虫的双向电泳结果显示，处理株中至少有三个多肽点在对照中未出现，这些点很可能就是由抗药性基因被诱导产生的抗性蛋白质。而在对照株中出现的一些点却在处理株中缺如     

弓形体感染与不良妊娠结局关系的研究

以４１ 例有不良妊娠结局的母婴为研究组,３１ 例正常足月分娩母婴为对照组,分别收集其母婴配对标本（ 母血,脐血） ,采用ＥＬＩＳＡ 方法及ＰＣＲ 技术进行检测,检测指标为ＴｏｘｏＩｇＭ 及ＴｏｘｏＤＮＡ。发现：研究组７ 例（１７．０７ ％ ） 孕妇ＴｏｘｏＩｇＭ 阳性：１６ 例（３９．０２ ％ ） 孕妇ＴｏｘｏＤＮＡ 阳性,对照组则分别为３ 例（９．６７ ％ ） 及５ 例（１６．１３ ％ ） ;研究组３ 例（７．３２ ％ ） 胎儿ＴｏｘｏＩｇＭ 阳性及１１ 例（２６．８３ ％ ）胎儿ＴｏｘｏＤＮＡ阳性;对照组则分别为２ 例（６．４５ ％ ） 及３ 例（９．６７ ％ ） 。在孕期母婴弓形体感染监测中ＰＣＲ 技术阳性检出率明显高于ＥＬＩＳＡ方法（Ｐ＜ ０．０５） 。以检测母婴血ＴｏｘｏＤＮＡ 结果为依据,分析母婴弓形体感染的关系,表明胎儿弓形体感染与母体弓形体感染有关（Ｐ＜ ０．００５） ,提示孕期弓形体感染可能为不良妊娠结局的重要原因之一,胎儿弓形体感染是母体弓形体感染的结果     

肿瘤坏死因子—α、透明质酸、Ⅳ型胶原含量对肝纤维化的诊断价值

目的探讨肝硬化患者血清肿瘤坏死因子-a、(TNF-a)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ     

用流式细胞术分析双氯青蒿素对杜氏利什曼原虫DNA的作用

应用流式细胞术检测了分析了双氢青蒿素对杜氏利什曼虫前鞭毛体ＤＮＡ的作用。４个不同浓度的药物对虫体ＤＮＡ均有抑制作用，用药组虫体ＤＮＡ含量的荧光分布随着药物浓度的升高而减弱，抑制率分别为３２．３％，３２．６％，８６．４％，８９．２％，与对照组相比有显著性差异，后两个用药组与前两个用药组抑制率有显著性差异。本研究结果与光镜观察，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试结果一致。     

问号赖型钩体017株与七日热型钩体56610株内鞭毛蛋白基因的克隆及序列分析

目的通过不同型钩体DNA序列分析筛选钩体基因疫苗的候选株,并从基因水平解释钩体血清型的特异性.方法(1)酚、氯仿抽提法提取017株与56610株钩体基因组DNA.(2)分别以017株与56610株钩体基因组DNA为模板,PCR法扩增内鞭毛蛋白(flaB)基因.(3)T/A快速克隆法将两个flaB基因的PCR产物连接与Teasy-vector载体.(4)α-互补、PCR法初步筛选重组质粒.(5)碱裂解法小量提取质粒、酚切分析进一步鉴定重组质粒,确定外源基因插入方向.(6)双脱氧终止法对重组质粒的克隆化flaB基因进行测序.(7)应用软件对所测序列进行酶切位分析及编码蛋白的预测.(8)与已发表的钩体内鞭毛基因进行比较.结果经鉴定获得了两个重组质粒pDHTF017与pDHTF610.pDHTF017中flaB基因为反向插入,pDHTF610中的flaB基因为正向插入.两个重组外源flaB基因长度均为852bp,编码蛋白含283个氨基酸,预测分子量为31.5kD左右.两个基因的限制性内切酶位点相似,含多个常见酶切位点.几个血清型钩体的flaB基因比较发现型间同源性很高(90%-99%),变异通常发生在固定位点,各型选择不同的固定位点.结论(1)重组质粒pDHTF017与pDHTF610中的外源基因均为钩体的一种flaB基因;(2)flaB基因保守性强,可作为基因疫苗的靶基因;(3)七日热型钩体56610株的flaB基因有望成为核心抗原基因,可进行钩体疫苗的研究开发.     

大鼠寡霉素敏感相关蛋白（0SCP）基因的改造及在大啮忏菌中的表达

目的 通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白（OSCP）基因进行改造，获得具有正确序列的OSCP基因，在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定。方法 通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造，获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因；然后将该片段连接进原核表达载体pET-28e（＋），构建成重组质粒PET-28c（＋）-OSCP；用该重组质粒转化E-coli，转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白，通过Western-blot鉴定。结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功。酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c（＋）-OSCP。IPTG诱导表达4h后，SDS—PAGE及Westemblot显示诱导表达出分子量约23000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白，且该蛋白具有免疫活性。结论 在国内初次表达出大鼠OSCP，表达产物具有免疫反应性，为OSCP的结构及功能研究奠定了基础。     

大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因的改造及在大肠杆菌中的表达

目的通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因进行改造,获得具有正确序列的OSCP基因,在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定。方法通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造,获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因;然后将该片段连接进原核表达载体pET-28c( ),构建成重组质粒PET-28c( )-OSCP;用该重组质粒转化E.coli,转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白,通过Western-blot鉴定。结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功。酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c( )-OSCP。IPTG诱导表达4h后,SDS-PAGE及Western-blot显示诱导表达出分子量约23000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白,且该蛋白具有免疫活性。结论在国内初次表达出大鼠OSCP,表达产物具有免疫反应性,为OSCP的结构及功能研究奠定了基础。