精子发生的转录组学和蛋白组学

<正>1精原干细胞研究的新技术成人睾丸中的精原干细胞(spermatogonial stemcells,SSCs)来源于原始生殖细胞,SSCs是典型的多能干细胞,具有经过一系列有丝分裂分化成精原细胞的能力,并且可通过细胞的自我更新和凋亡来维持细胞数量的稳定[1,2]。随着分子生物学的发展,这些     

Carbachol阻断亚硒酸钠对离体皮质神经无元的致凋亡作用

在早期工作发现小剂量亚硒酸钠（Sodium selenite)对离体皮质神经元的致凋亡作用的基础上，观察了在亚硒酸钠致凋亡模型中加入M型胆碱能受体激动剂Carbachol(Carb)能否阻止凋亡过程和相伴随的有关基因表达的改变。结果显示：（1）用不同剂量（0.004,0.02,0.1,0.5,2.5和12.5mmol/L)的Carb和0.5umol/L亚硒酸钠共同处理培养的新生小鼠皮质神经元时，用琼脂糖凝胶电泳DNA梯形检测和流式细胞仪亚二倍体峰检测，都证明Carb表现出对亚硒酸钠致凋亡作用的剂量依赖性保护效应；（2）用RT-PCR技术证明，在与Carb共同孵育的实验中，不再出现或减弱了亚硒酸钠单独处理时出现的bcl-2基因表达的下调和bax，p53,c-fos以及AChE基因表达的上调。上述结果表明，亚硒酸钠对皮质神经元的致凋亡作用和与之相伴随的基因表达的改变，可被一定浓度的Carb所阻断，提示亚硒酸钠致凋亡作用可能同本室发现的β-淀粉样蛋白的C末端5肽片段的致凋亡作用具有类似的途径。以类似的基因表达改变为基础，并对Carb的抗凋良心机制进行了讨论。     

四地中华白蛉咽甲的电镜扫描研究(双翅目毛蛉科)

咽甲是白蛉分类的重要依据。用电镜扫描对采自山西吉县、陕西宜川和四川南坪两个海拔高度的4个中华白蛉种群的咽甲进行了研究。结果：来源不同的4组中华白蛉虽然形态有些差异，但无本质不同，仍属一个种。     

雄性激素抑制感染杜氏利什曼原虫的巨噬细胞的凋亡

目的：研究雄性激素对Ｃ５７ＢＬ／６ｊ雌性小鼠骨髓巨噬细胞凋亡的影响。方法：溴化丙锭染色及透射电镜观察凋亡特征性形态学变化。来自雄性激素和油处理过的小鼠骨髓巨噬细胞分别用杜氏利什曼原虫（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｄｏｎｏｖａｎｉ）攻击２４ｈ后,检测特征性的ＤＮＡ凋亡梯形。结果：在培养基中去掉Ｍ－ＣＳＦ后可以诱导骨髓巨噬细胞的凋亡。ＤＮＡ片段电泳提示：①在雄性激素和油处理组间凋亡细胞的量没有区别,然而②经杜氏利什曼原虫攻击后,雄性激素处理组的凋亡细胞数明显低于油处理组。结论：雄性激素可以抑制感染了杜氏利什曼原虫的巨噬细胞的凋亡,不感染利什曼原虫时,这种抑制作用并不出现。雄性激素对骨髓巨噬细胞凋亡的抑制作用可能在雄性激素诱导的免疫抑制作用中发挥着重要的作用     

四种蝇的随机序列扩增多态性分析

ＲＡＰＤ技术是在１９９０年后发展起来的一项分子生物学手段，它被越来越广泛地应用在昆虫分类方面。它有许多优越性，如简便、快捷、灵敏度强、经济、对材料要求不高等。更重要的是，它可以从分子的角度出发揭示ＤＮＡ的多态性，从而把物种区分开来。本文以家蝇，丝光绿蝇，尾黑麻绳和夏厕蝇为对象，用３４种１０ｈｐ引物对上述四种蝇的ＤＮＡ进行了地毯式的扩增，以筛选能够用于种类区别的引物。我们的结果显示，引物ＯＰＨ－８可以作为科间的鉴别依据，另有１４种引物可用于蝇科内各属间或种间的分类依据。     

我国七种白蛉咽甲的超微结构研究

目的研究不同地域的7种白蛉(白蛉属5种,司蛉属2种)咽甲内侧壁的超微结构.方法采用扫描电子显微镜进行咽甲超微结构的分析.结果白蛉咽甲的内侧壁由一些齿形结构和横嵴组成,齿形结构和横嵴的形状、数目以及排列方式在各蛉种间表现不同.结论不同种属的白蛉咽甲在超微结构上有明显的差异,可为蛉种鉴定提供形态学依据.     

健康人成熟精子中mRNA的种类特征

目的分析具有正常生育能力男性成熟精子mRNA的种类特征。方法健康并育有后代的成年男性11例,禁欲3～5d后取精液,上游法纯化精子,Trizol试剂提取精子总RNA。混合所有总RNA进行基因表达系列分析(SAGE),随后对所得SAGE文库进行功能聚类性分析。结果所建SAGE文库共获877个克隆,测序得到21052个标签,出现两次以上的独特性标签有2712种。SAGE文库用DAVID软件进行功能性聚类分析,高丰度的389个基因能聚合成25组功能性的基因。最突出的是一组核蛋白基因、参与DNA依赖的基因转录和转录调节;其次是与胞质,核糖体蛋白以及蛋白质合成相关的基因;其他基因类别还包括蛋白多肽水解相关蛋白;具有蛋白激酶活性,蛋白氨基酸磷酸化、蛋白修饰相关蛋白;免疫相关蛋白等。结论人成熟精子中存在数量庞大、种类繁多的mRNA,这些mRNA可能并不仅仅是在精子形成过程中残留下来的,它的功能可能包括重新翻译以替代降解的蛋白、染色质的重组装,受精过程中传递一些父系必须的RNAs到卵子中以进行表观遗传。     

基因表达系列分析及其在寄生虫学研究中的应用

基因表达系列分析（serial analysis of gene expression，SAGE）是一种高通量、快速定量分析真核细胞基因表达信息的技术。它通过抽取距离每个mRNA中3′端polyA尾最近的一个锚定酶识别位点下游的10~14 bp片段作为其代表性标签，连成长串，克隆到载体中，进行高效测序，统计出研究对象中的mRNA的种类和丰度。SAGE技术不仅能够全面地分析特定组织或细胞表达的基因并得到这些基因表达丰度的数量信息，还可比较不同组织、不同时空条件下基因表达的差异。本文将综述基因表达系列分析技术的原理、特点、方法、进展及其在寄生虫学研究中的应用。     

夏氏疟原虫感染的红细胞膜表面抗原Pc90的cDNA…

对表达Ｐｃ９０的ｃＤＮＡ克隆进行鉴定和分析并在大肠杆菌中予以表达。     

雄性激素对小鼠骨髓巨噬细胞杜氏利什曼原虫感染水平的影响

目的：研究雄性激素对杜氏利什曼原虫感染的C57BL／6J小鼠骨髓巨噬细胞（BMMs）水平的影响。方法：用雄性激素处理小鼠3wk后，收集BMMs，培养5d后，按BMMs前鞭毛体＝110的比例，接种杜氏利什曼原虫，用吉姬氏染色法观察不同时相的感染水平。结果：与植物油处理的对照组相比，雄性激素处理的小鼠BMMs对前鞭毛体较为易感，并随着感染时间的延长其感染水平增高（感染后3h，P＜0．05；24h，48h和72h，P＜0．01）。结论：雄性激素可增加杜氏利什曼原虫对BMMs 的感染水平, 这可能与雄性激素诱导的免疫抑制作用有关。