真菌提取物JN219抗病毒谱的初步研究

目的：探讨真菌提取物JN219的体外抗病毒谱。方法：采用体外细胞病变法，研究JN219对疱疹病毒科病毒（HCMV、HSV-1、HSV-2）、腺病毒科病毒（Ad3）、副粘病毒科病毒（RSV）、呼肠病毒科病毒（RV SA11）、正粘病毒科病毒（流感甲地方株、流感乙地方株）、小RNA病毒科病毒（COX B1-6）、弹状病毒科病毒（VSV）共15株病毒的抗病毒活性。将JN219与以上病毒作用1h后接种于相应宿主细胞（同时设有病毒对照和细胞对照），当病毒对照病变达到90％以上时终止培养，宿主细胞用1％中性红染色，在450nm处读取吸光度A值，计算细胞存活率、半数中毒浓度（TD₅₀）、半数有效浓度（IC₅₀）和抑毒指数（TI）。并根据TI判断JN219的抗病毒活性，确定其抗病毒谱。结果：JN219对HCMV、RV（SA11）、VSV有抑制作用，其IC50分别为1.42、0.96和1.22μg/ml，TI分别为35.26、52.30、40.82；对HSV-1、HSV-2、RSV、流感病毒甲、流感病毒乙有部分抑制作用；对COX B1-6、腺病毒（Ad3）无作用。结论：JN219抗病毒谱比较广泛。     

柯萨奇病毒B5引起济南儿童病毒性脑炎流行的血清流行病学调查

2003年夏秋季山东济南地区发生不明原因的病毒性脑炎(VE)流行,仅济南市儿童医院就收入院病人150例.从本次脑炎流行患儿脑脊液标本中分离得到5株病毒,以分子生物学方法鉴定其为肠道病毒--柯萨奇病毒B5(CVB5).为进一步验证CVB5与本次脑炎流行的因果关系,我们用分离所得病毒株制备抗原,通过间接ELISA对本次脑炎流行进行血清流行病学调查.     

长期能量限制增加去乙酰化酶SIRT1表达和降低小鼠血管的衰老

目的 初步研究能量限制对血管细胞衰老的影响及作用机制。方法 取2月龄和18月龄的C57BL/6小鼠,用western blot检测血管细胞衰老分子相关分子的变化;建立能量限制12月的小鼠模型,用western blot检测相关分子的蛋白水平。结果 与2月龄小鼠相比,18月龄的小鼠动脉中SIRT1表达水平显著降低。能量限制显著增加小鼠动脉中SIRT1表达水平,降低细胞衰老标志分子P53和P21表达水平,增加抗氧化酶MnSOD的表达水平。结论 能量限制可以抑制血管细胞衰老,其机制可能与增加SIRT1表达,降低氧化应激有关。     

PrP八肽重复突变体对细胞生长影响的探讨

目的探讨PrP八肽重复突变体对细胞生长的影响。方法将具有遗传性朊病毒病相关不同八肽重复区插入突变的PRNP基因表达载体瞬时转染HeLa细胞,经噻唑蓝比色法(MTT)、Annexin-V/PI双染流式细胞检测。结果多八肽突变PrP蛋白对细胞的毒性作用较野生型明显增强。多八肽突变PrP较野生型更容易诱导凋亡发生,多八肽突变组早、晚期凋亡率均高于野生组。结论遗传性朊病毒病相关多八肽突变PrP蛋白可能较野生型更易诱导细胞凋亡发生。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白gG在毕赤酵母表达系统中的表达及抗原性分析

目的 构建单纯疱疹病毒gGl-毕赤酵母表达系统并初步分析表达产物的抗原活性.方法 以HSVI病毒增殖物为模版,用PCR扩增HSV-1gGl基因全序列,将目的序列插入载体pPIC9K,测序后电转化GS115菌株进行G418筛选、甲醇诱导表达,用SDS-PAGE方法跟踪分析表达条件,用ELISA方法检测目的蛋白的抗原活性.结果 DNA测序、凝胶电泳、ELISA试验结果表明pPIC9K-HSVgGI载体构建成功,G418压力筛选得到的重组酵母菌株可分泌表达目的蛋白gGl,蛋白可与特异性抗体发生结合反应.结论 构建了HSV一1 gGl酵母表达系统,表达的目的蛋白gGl具有抗原活性.