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目的 探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对大鼠肾小球内皮细胞(r GEn C)通透性的影响及线粒体功能障碍在其中的作用。方法 采用原代培养的r GEn C,予AGEs 80 mg/L作用24 h,采用跨内皮细胞电阻抗和异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白滤过率观察通透性的变化,Mito SOX试剂盒检测细胞内活性氧,JC-1荧光标记法检测线粒体膜电位(△Ψm),荧光素酶检测系统测定三磷酸腺苷(ATP)的生成,蛋白免疫印迹法检测NF-E2相关因子2(Nrf2)的表达。结果 AGEs可引起r GEn C通透性升高,活性氧产生增加,采用叔丁基对苯二酚(t BHQ)(20μmol/L)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10 mmol/L)和抗AGE受体抗体(100 mg/L)预处理后,上述AGEs作用被抑制。AGEs可引起r GEn C△Ψm下降,ATP和Nrf2减少,而anti-RAGE抗体可抑制△Ψm下降和ATP减少,t BHQ则能抑制△Ψm下降和Nrf2减少。结论 AGEs可导致r GEn C线粒体功能障碍,引起活性氧产生增加,从而导致r GEn C间通透性增加。 相似文献
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目的 观察Iga肾病(IgAN)患者与正常人的血清热聚合IgA1(algA1)对系膜细胞(MC)增殖的影响.方法 收集原发性IgAN患者及健康人的血清标本,利用Jacalin-agarose亲和层析联合Sephacryl S-200 HR分子筛层析法分离获得血清单体IgA1(mlgA1),将mlgA1热聚合为algA1.利用患者及正常人的algA1分别刺激小鼠MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测algA1对系膜细胞增殖的影响.结果 algA1刺激48h组的吸光度是24h组的1.59倍(P=0.000).不同浓度algA1刺激组问MTT吸光度的差异有统计学意义(P=0.000),相比于阴性对照组(SFM).0.25 mg/mL组、0.5 mg/mL组、1 mg/mL组的吸光度分别为SFM的1.67、1.74、1.77倍(P=0.000);2 mg/mL组的吸光度是SFM的1.15倍(P=0.086).在刺激24h时患者0.25 mg.mL组的algA1就可促进系膜细胞增殖了,其吸光度是SFM的1.34倍(P<0.05),而正常对照组则耍在浓度达到1mg/mL时才引起系膜细胞增殖,其吸光度为SFM的1.33倍(P<0.05).结论 研究结果提示患者及正常人的algA1均可促进系膜细胞增殖,这种增殖表现为时间依赖性及一定的剂量依赖性.在高浓度时algA1促系膜细胞增殖的作用消失了;患者的algA1可能更易与系膜细胞结合,刺激相同时间时患者低浓度algA1既可引起MC增殖. 相似文献
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目的 了解慢性肾脏病(CKD)患者钙磷代谢紊乱的基础状况.方法 对中山大学附属第三医院肾内科门诊就诊的慢性肾脏病患者血钙、血磷、血肌酐和尿常规水平进行为期9个月的横断面调查.结果 共有697例CKD病例入选.前4位慢性肾脏病的病因分别为原发性肾小球疾病(61.1%)、高血压肾病(7.6%)、糖尿病肾病(5.7%)和狼疮肾炎(5.7%).随着慢性肾脏病分期的进展,CKD4期以后,血清磷水平逐期上升(P=0.005和0.000),血清钙磷乘积水平逐期上升(P=0.013和0.000),血清钙磷乘积>55的发生率逐期上升(P=0.000和0.001).CKD5期患者血清钙水平降低(P=0.000).多元回归分析结果显示,血钙磷乘积水平和肾小球滤过率呈显著性负相关(P=0.007),血钙磷乘积水平和舒张压水平呈显著性正相关(P=0.030).结论 CKD4期以后钙磷代谢紊乱明显增加. 相似文献
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目的 观察晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对足细胞内肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的影响及作用机制.方法 不同浓度的AGEs干预小鼠足细胞24h,分别检测肾素(renin)、血管紧张素原(renin-angiotensin system,AGT)、血管紧张素Ⅱ1型、2型受体(AT1R、AT2R)的表达,血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)的活性和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的浓度,观察蛋白激酶B(Akt)的磷酸化,然后分别加入磷酸肌醇3激酶抑制剂LY294002、Iosartan、captopril和chymastatin,观察足细胞粘附性的变化.结果 与对照组相比,AGEs(80 μg/mL)明显上调AGT和AT1R的表达[(183.0±19.0)% vs 100%,(179.0±17.0)% vs100%,P<0.05],裂解液中ACE活性明显增加[(142.8 ±10.3)U/μgvs (85.0 ±9.2)U/μg,P<0.05],细胞上清中AngⅡ的浓度明显增加[(11.2±0.8) pg/mL vs(7.0±0.7)pg/mL,P<0.05];Akt的磷酸化上调100% (P <0.05),而LY294002可减轻AGEs介导的足细胞内RAS的激活;与AGEs组相比,LY294002可改善AGEs介导的足细胞粘附性的下降[(82±13)% vs (40±12)%;(78±14)%vs(42±13)%,P<0.05].结论 AGEs可能通过磷酸肌醇3激酶途径激活足细胞内的RAS,降低足细胞粘附性. 相似文献
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目的 探讨IgA肾病(IgAN)患者血清IgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞凋亡的影响。 方法 用Jacalin 亲和层析柱和Sephacryl S-200 分子筛纯化蛋白。单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1)。实验分为患者上清组、健康上清组和对照组,系膜细胞分别与IgAN患者的aIgA1、健康对照的aIgA1和5%胎牛血清共培养,收集上清,与同步化的足细胞作用。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。实时定量PCR 检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L表达情况。 结果 患者上清可诱导足细胞凋亡,其凋亡率显著高于健康上清组和对照组[(28.5±5.9)%比(22.5±5.8)%、(20.5±4.5)%, 均P < 0.05]。患者上清可诱导足细胞Fas mRNA 升高,为对照组的1.89倍(P < 0.05), 而Bcl-2 mRNA下调为对照组的72%(P < 0.05)。患者上清组的AngⅡ和TGF-β1水平均高于健康上清组[(13.2±3.4) ng/L比(8.2±2.3) ng/L,P < 0.05;(15.4±3.4) ng/L比(10.8±3.2) ng/L,P < 0.05]。 结论 IgAN患者血清IgA1与系膜细胞共培养上清可诱导足细胞凋亡,可能参与IgAN的进展。 相似文献
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中国肾小球滤过率评估方程在糖尿病肾病患者的适用性评价 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价现有在中国人群基础上开发的肾小球滤过率(GFR)评估方程在糖尿病肾病患者的适用性.方法 选择67例糖尿病肾病患者,用中国方程、瑞金方程、肾脏病膳食改良试验(MDRD)1方程和简化MDRD方程,分别计算GFR值,与99mTc-DTPA测的GFR(sGFR)进行比较.结果 Bland-Ahman分析显示,瑞金方程估计的GFR和sGFR的一致性较好,但所有各方程估计的GFR和sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值.线性回归结果显示,瑞金方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更接近0.在所有方程中,瑞金方程偏差较小,瑞金方程估测GFR 30%符合率和50%符合率均最高,但瑞金方程估测GFR 30%符合率依然低于70%.在慢性肾脏病不同分期中,瑞金方程较其他方程有较小的偏差和更优的准确性.结论 对于糖尿病肾病患者肾功能的评估,当血肌酐的测定方法为酶法时,现有在中国人群基础上开发的GFR评估方程可能会产生明显的偏差.有必要进行更大规模试验,进一步评估和验证中国方程和瑞金方程在中国糖尿病肾病患者的适用性. 相似文献
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目的观察IgA肾病(IgAN)患者与正常人的血清热聚合IgA1(aIgA1)对系膜细胞(MC)增殖的影响。方法收集原发性IgAN患者及健康人的血清标本,利用Jacalin-agarose亲和层析联合Sephacryl S-200HR分子筛层析法分离获得血清单体IgA1(mIgA1),将mIgA1热聚合为aIgA1。利用患者及正常人的aIgA1分别刺激小鼠MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测aIgA1对系膜细胞增殖的影响。结果aIgA1刺激48h组的吸光度是24h组的1.59倍(P=0.000)。不同浓度aIgA1刺激组间MTT吸光度的差异有统计学意义(P=0.000),相比于阴性对照组(SFM),0.25mg/mL组、0.5mg/mL组、1mg/mL组的吸光度分别为SFM的1.67、1.74、1.77倍(P=0.000);2mg/mL组的吸光度是SFM的1.15倍(P=0.086)。在刺激24h时患者0.25mg/mL组的aIgA1就可促进系膜细胞增殖了,其吸光度是SFM的1.34倍(P〈0.05),而正常对照组则要在浓度达到1mg/mL时才引起系膜细胞增殖,其吸光度为SFM的1.33倍(P〈0.05)。结论研究结果提示患者及正常人的aIgA1均可促进系膜细胞增殖,这种增殖表现为时间依赖性及一定的剂量依赖性,在高浓度时aIgA1促系膜细胞增殖的作用消失了;患者的aIgA1可能更易与系膜细胞结合,刺激相同时间时患者低浓度aIgA1既可引起MC增殖。 相似文献
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慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)被称为"沉默的杀手",在过去的10年间,已成为继心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病之后又一种严重威胁人类健康的疾病,是一个不容忽视的全球性公共卫生问题。在美国,高达13.1%(约2630万)的人患有CKD。我国香港地区2003年的调查结果显示,20岁以上的居民血尿、蛋白尿和尿检异常的比例分别为3.2%、13.8%和17.4%。根据最近公布的一项数据表明,我国目前CKD的患病率为10.8%(95%CI10.2%~11.3%), 相似文献
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目的 观察晚期糖基化终产物(AGEs)对血管内皮细胞血管生成样蛋白-4(Angptl-4)的影响,为心血管疾病的防治提供依据.方法 不同浓度(0、20、40、80、160 μg/ml)的AGEs与内皮细胞共培养24 h,分别以实时荧光定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测Angptl-4 mRNA和蛋白的表达,通过检测异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖漏出率来检测内皮细胞的通透性.结果 与空白对照组比较,AGEs(80 μg/ml)可明显上调Angptl-4 mRNA(分别为100%和260%± 18%)和蛋白的表达(分别为100%和250%±32%),增加内皮细胞通透性(分别为0.15±0.08和0.46±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AGEs可能通过上调Angptl-4的表达增加内皮细胞的通透性. 相似文献