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91.
C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列. 相似文献
92.
目的:探讨细胞活素肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、SNAP(S-Nitroso-Nacetyl-penicillamine)对胰腺癌细胞产生血管内皮生长因子A、C(VEGF-A、C)的调节.方法:用Northern杂交和Western杂交法分析6种人胰腺癌细胞株中VEGF-A、C基因和蛋白的表达;以TNF-α或SNAP刺激其中两个细胞株后用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)分析其VEGF-A、C基因的表达.结果:Northern杂交法显示这6种胰腺癌细胞株均有4.1kb VEGF-A基因和2.4kb VEGF-C基因的表达;Western杂交法显示它们均有分子量为43kD的VEGF-A蛋白质和分子量为55kD的VEGF-C蛋白质的表达.RT-PCR分析法显示:TNF-α使细胞株COLO-357产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1~2.5倍、1~2倍,使细胞株CAPAN-1产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1倍、1.6~2.5倍;而SNAP刺激细胞株COLO-357产生VEGF-A mRNA增加约5倍,刺激细胞株CAPAN-1产生VEGF-A mRNA增加约4倍,但对这两种细胞株产生VEGF-C mRNA均无明显刺激作用.结论:细胞活素TNF-α和低氧通过调节血管内皮生长因子A、C的表达而影响胰腺癌细胞的生物学特性,抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡、死亡或进展、恶化. 相似文献
93.
古主“玉泉丸”改制成颗粒剂后,对处方中人参,黄芪,麦冬,乌梅,天花粉,葛根,甘草等七味中药的薄层色谱鉴别方法进行了探讨。 相似文献
94.
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)加速猪背部创伤修复的实验研究 总被引:30,自引:0,他引:30
实验采用猪背部创伤模型,观察重组的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对创伤修复的作用。在无菌条件下用特制打孔器在猪背部切割皮肤,形成2.5cm2的园型创面。将150个创面分成5组,分别以bFGF(60u/cm2创面),bFGF((60u/cm2创面)加SD-Ag、SD-Ag、生理盐水以及不治疗等方法处理,每间隔一天换药一次。实验结果表明,bFGF具有显著促进肉芽组织生长、加速创面再上皮化率以及增加创面愈合组织抗张力强度等作用。FGF显著促修复效应的确切机制尚不完全清楚,可能包括直接与间接效应两方面。 相似文献
95.
96.
The early maintenance of long-term potentiation (LTP) was studied in the CA1 region of hippocampal slices from 12- to 18-day-old rats in a low-magnesium solution (0.1 mM). The α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid (AMPA) and N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor-mediated components of the field excitatory postsynaptic potential were estimated in parallel using early and late measurements of the composite potential. At the normal test stimulus frequency of 0.1 Hz, LTP was seen initially as a predominant increase in the AMPA component, but converted, via a substantial decay of this component and a gradual growth of the NMDA component, into nearly equal changes of the two components. Interrupting the test stimulation for 10 min, changing the test stimulus frequency to 1/60 Hz after LTP induction, or using a test stimulus frequency of 1/60 Hz during the entire experiment significantly reduced the decay of the potentiation of the AMPA component while enhancing the potentiation of the NMDA one. The ratio between the magnitudes of the two excitatory postsynaptic potential (EPSP) components showed a decaying time course that was independent of the manipulations used. Application of the NMDA antagonist D(-)-2-amino-5-phosphonopentanoic acid (50μM) after LTP induction stabilized the LTP of the AMPA component until washout was started. On the other hand, the phosphatase inhibitor okadaic acid (1 μM) resulted in decay of the potentiation of both EPSP components back to around baseline and altered the time course of the ratio between the components. Our results show that the early maintenance of LTP is controlled in an activity-dependent and NMDA-dependent manner. This process accelerates the decay of LTP of both AMPA and NMDA components in parallel, suggesting that it is similar to homosynaptic long-term depression, although it operates at the normal test stimulus frequency. The data support a scenario in which LTP ensues as a selective AMPA receptor modification and subsequently converts to another modification, possibly a presynaptic one. 相似文献
97.
钙拮抗剂TMB-8抑制BHQ,NE和KCl引起的培养乳牛基底动脉单个平滑肌细胞内游离钙的升高 总被引:1,自引:0,他引:1
用AR CM MIC阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度([Ca2+]i),研究8-(N,N-二乙胺)-n-辛基 3,4,5-三甲氧基苯甲酸酯(TMB-8)对培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca2+]i的作用。在细胞外钙浓度为1.3mmol·L-1时,TMB-8(30μmol·L-1)可明显抑制BHQ,NE及KCl引起[Ca2+]i的升高。在细胞外钙为零+EGTA 0.1mmol·L-1时,TMB-8(10,30及100μmol·L-1)可浓度依赖性地降低静息[Ca2+]i,TMB-8(30μmol·L-1)可几乎完全阻断BHQ及NE引起[Ca2+]i的增加。研究表明TMB-8降低培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca2+]i的机制,主要是抑制肌浆网Ca2+的释放,或增加肌浆网对Ca2+的摄入,并由此间接地抑制细胞外钙的内流。 相似文献
98.
99.
在广泛PH范围内对丝裂霉素C的化学稳定性进行了研究,测定不同温度下不同pH时的速率常数,得到不同pH时的分解活化能及不同温度下的稳定pH值。活化能数据在pH5.5及7.8时出现极大值,而不同温度下的两上最稳定(pH)m恰恰位于两个pH范围内。 相似文献
100.
胸部高分辨率CT检查技术的临床应用 总被引:4,自引:0,他引:4
笔者对50例肺部疾病胸部常规CT和高分辨率CT(HRCT)图像进行了对照分析。其中特发性肺间质纤维化(IFP)8例,肺转移癌5例,支气管扩张15例,慢性阻塞性肺气肿15例,周围型肺癌7例,结果表明:HRCT在IFP、支气管扩张和肺气肿的显示明显优于常规CT(P<0.001),在对肺部原发或转移性肿瘤的显示能提供更多的诊断信息。笔者还讨论了HRCT的检查技术和图像后处理,分析了影响HRCT的若干因素,指出通过缩小视野(FOV),减少象素做图像的重建放大显示肺部局部结构更为清楚方便,应灵活运用。 相似文献