PINK1 mutations in sporadic early-onset Parkinson's disease.

Pathogenic PINK1 mutations have been described in PARK6-linked Parkinson's disease (PD) patients of Asian origin. However, data on the frequency of PINK1 mutations in sporadic early-onset Parkinson's disease (EOPD) Asian patients are lacking. The objectives of this study were to report the frequency of PINK1 mutations of sporadic EOPD in an Asian cohort comprising of ethnic Chinese, Malays, and Indians, and to highlight a PINK1-positive patient who presented with restless legs symptoms. Eighty consecutive sporadic EOPD patients from the movement disorder clinics of two major tertiary institutions in the country were included. We performed sequence analysis of all the coding and exon-intron junctions of the PINK1 using specific primer sets. In addition, we genotyped polymorphisms detected from the analysis in a group of sporadic PD patients and controls. Three different mutations (two homozygous nonsense and one heterozygous missense) in the putative kinase domain were found in three patients, giving a 3.7% frequency of PINK1 mutations in our EOPD cohort. All the mutations were absent in 200 healthy controls. One patient with a novel homozygous nonsense PINK1 mutation presented unusually with restless legs symptoms. Separately, analysis of the frequency of four PINK1 polymorphisms in a group of sporadic PD and controls did not reveal any significant differences. We highlight a 3.7% frequency of PINK1 mutations in an Asian cohort (ethnic Chinese, Malay, and Indian) of EOPD. The phenotypic spectrum associated with PINK1-positive patients may be wider than previously reported. Polymorphisms of PINK1 do not appear to modulate risk of PD in our population.     

氯喹对戊四氮致痫大鼠GFAP、PCNA及Cyclin D1变化的影响

目的 观察氯喹对戊四氮致痫大鼠皮质和海马星形胶质细胞GFAP、PCNA及Cyclin D1表达的影响．探讨氯喹在癫痫发生发展过程中的作用。方法 用免疫组化检测大鼠皮质和海马GFAP和PCNA的变化，用Westernblot检测CyclinD1含量的变化。结果 对照组无痫样发作，戊四氮致痫组有重型的痫样发作（Ⅲ～V级），氯喹干预组有轻型的痫样发作（Ⅰ～Ⅲ级）（P〈0．05）；戊四氮致痫组脑电记录呈频发高幅的痫样波，氯喹干预组痫样波幅低且缓。GFAP和PCNA在戊四氮致痫组表达强，以海马为著，与对照组比较差异有显著性意义（P〈0．05），氯喹干预组与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；Cyclin D1在戊四氮致痫组的皮质和海马的含量与对照组比较差异有显著性意义（P〈0．05），氯喹干预组与对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。结论 氯喹通过抑制胶质细胞的增生和GFAP的表达，影响致痫大鼠痫样发作的发生和发展。     

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立

.学者论坛·在动物实验中解决临床难题···························，·······································································……顾玉东(3)基因〕:程     

骨髓干细胞参与小鼠急性肾小管坏死修复的实验研究

【摘要】 目的 观察在生理和病理情况下,骨髓来源的干细胞(BMSC)能否分化成肾小管上皮细胞。 方法 绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓细胞。同种无荧光标记的C57BL/6小鼠100只分为正常对照组、全身照射组、缺血再灌注组、骨髓移植组、骨髓移植+缺血再灌注组。受体鼠的骨髓重建经血液常规检查和流式细胞仪检测确认,并采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察绿色荧光标记的BMSC在受体鼠肾脏的分布及数量。 结果 全身致死剂量γ射线照射未造成小鼠肾脏组织结构和生理功能的明显改变。骨髓移植后第56、84天的受体鼠肾小管中有少量GFP阳性细胞的存在[(78.75±5.99)%、(79.58±4.60)%],激光共聚焦显微镜进一步证实这些细胞位于肾小管,并表达肾小管上皮细胞特异性的功能蛋白megalin。 结论 在生理和病理情况下,骨髓干细胞均可以向肾小管上皮细胞转分化,参与肾小管上皮细胞的更新,并且在急性肾小管坏死的病理条件下,骨髓干细胞的肾向转化率与肾脏受损程度有关。     

人参根总皂甙对热应激小鼠免疫功能保护作用的机制初探

小鼠在45℃高温环境15 min.末梢血T淋巴细胞百分数和淋巴细胞占白细胞百分数均下降.血清皮质酮升高。应激前15 min lP人参根总皂甙(GRS)50、100 mg·kg~(-1)可防止末梢血T淋巴细胞百分数的降低,但不能抑制血清皮质酮的升高。GRS50mg·kg~(-1)ip可防止末梢血中淋巴细胞占白细胞百分数的降低。GRS50 mg·kg~(-1)、利血平0.5 mg·kg~(-1)或水杨酸毒扁豆碱0.3 mg·kg~(-1)ip均可消除热应激对小鼠迟发超敏反应的抑制作用。     

豚鼠耳蜗微血管内皮细胞体外通透性的研究

目的　研究豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的体外通透性特征。方法　在成功建立豚鼠耳蜗微血管内皮细胞体外通透性模型的基础上 ,研究该体外模型跨细胞电阻及对12 5I 牛血清白蛋白的通透性。结果　①耳蜗微血管内皮细胞在培养增殖过程中其跨细胞电阻呈动态变化过程 ,以 5× 10 4/cm2 的细胞密度接种时 ,7d左右电阻到达峰值 ,其跨细胞电阻峰值大小为 (118 9± 18 5 )Ω/cm2 ;②体外模型中加入12 5I 牛血清白蛋白后 ,其通透性呈上升期抛物线型曲线 ,90min内几乎呈直线。结论　跨细胞电阻及对12 5I 牛血清白蛋白变化曲线能反映体外耳蜗微血管内皮细胞的通透性特征     

两种鼠蚤成熟过程中组织化学研究Ⅰ糖原和PAS物质

目的：探讨不等单蚤Monopsyllns anisus(Rothchild）和级慢细蚤Leptopsylla segnis(Schoenherr）吸血消化成熟过程中糖原和PAS物质的变化。方法：用高碘酸－希夫反应（Periodic acid-Schiff reaction PAS)法显示未吸血蚤、吸血后不同消化时间蚤体内糖原和PAS物质。结果：2种蚤糖原和PAS物质以脂肪体含量最高。吸血后成蚤消化道各部分PAS反应均有增高，不同消化时间（24、48、72h）不存在显著差异。2种蚤中雌蚤吸血后卵黄细胞发育过程中PAS反应的变化相似，但不等单蚤发育较缓慢细蚤迟缓。结论：吸血将导致2种蚤消化道糖原不同程度的增加。亦能促进雌蚤卵黄细胞的发育。     

植物营养活力素对小鼠生长及耐受能力的影响

以不同剂量的植物营养活力素（ＰＶＮ）喂饲小鼠，对小鼠的体重增长、耐寒、耐热、耐力等进行了观测。结果：用药后实验小鼠的体重和胸脾系数明显增加；耐寒、耐热及持续游泳时间明显延长。表明ＰＶＮ可明显提高小鼠的体重增长和对应激的耐受能力，提示其营养作用不仅适用于植物，而且适用于动物。     

降糖饮降糖作用的实验研究

降糖饮以８．１，１５．０，３０。０ｇ．ｋｇ＾－１灌胃予鼠，连续１０天。结果表明降饮对正常小鼠大鼠血糖血脂无明显影响，但对四氧嘧啶或链脲霉素引起的大鼠高血糖及蛋黄引起的小鼠高脂血症，高胆固醇饲料引起的大鼠高脂血症均有显著降低作用。本研究为降糖饮的应用提供了可靠的药理学依据。