慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血特异性CD8~+T淋巴细胞检测的临床意义

目的研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血特异性CD8+T淋巴细胞(CTL)频率的变化及临床价值。方法采用乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)18-27表位肽-人类白细胞抗原(HLA)-A*0201五聚体及CD8单克隆抗体,设计流式细胞技术检测HLA-A2+6例、HLA-A2-12例非HBV感染者、HLA-A2+49例和HLAA2-42例HBV感染者外周血中针对该肽段的特异性CTL数量,占总计数CD8+细胞数百分比表示。结果 HLA-A2-HBV感染未抗病毒治疗者特异性CTL(0.30%～14.40%,中位数1.13%,n=20)与HLA-A2-非HBV感染者(0.33%～3.90%,中位数1.04%,n=12),差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于HLA-A2-抗病毒治疗者(0.25%～20.30%,中位数2.11%,n=22,P<0.05);HLA-A2-抗病毒治疗者特异性CTL和HLA-A2+未抗病毒治疗者特异性CTL(0.20%～29.90%,中位数2.22%,n=20)均显著高于HLA-A2-非HBV感染者(P<0.01);HLA-A2+抗病毒治疗者特异性CTL(0.14%～39.22%,中位数1.33%,n=29)显著高于HLA-A2-非HBV感染者(P<0.05)。HLA-A2+未抗病毒组中血清HBV DNA<103 copy/mL、丙氨酸氨基转移酶小于40U/L者特异性CTL频率增高(P<0.05、0.01)。结论 HBV抗原肽-HLA-A*0201五聚体流式细胞技术能在体外直接检测外周血HBV特异性CTL频率的变化,其水平一定程度反映不同临床感染状态慢性HBV感染患者T淋巴细胞对特异性抗原表位免疫应答的差异。     

精子DNA碎片指数(DFI)与体外受精结局的多因素Logistic回归分析

目的 探讨精子DNA完整性与体外受精结局的关系。方法 回顾分析2011～2018年35岁以下卵巢储备功能良好并使用标准长方案的共3 576个体外受精(IVF)/补救性单精子卵浆内注射(R-ICSI)周期的资料,根据男方精子DNA碎片指数(DFI)检测值分为<20%,20%～30%,30%～40%和≥40%共四组,分析比较各组的女方平均年龄、体重指数、基础激素水平及IVF总受精率、R-ICSI周期的比例和R-ICSI受精率等指标,并且采用Logistic多因素回归模型分析体外受精结局与DFI之间的关系及找出相关的伴随因素。结果 四组的IVF/R-ICSI周期数分别为2 516,601,295和164个,女方平均年龄分别为31.88,31.72,31.56和31.18岁; 平均体重指数分别为21.72,21.74, 21.64和21.43 kg/m²; 血清平均基础卵泡刺激素(FSH)水平分别为6.10,6.24,6.15和5.86 U/L; R-ICSI周期的比例分别为11.8%,11.5%,16.9%和22.0%; IVF总受精率分别为74.4%,74.6%,70.0%和64.7%。其中女方年龄、体重指数和基础FSH水平组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。而IVF总受精率随着DFI的升高呈现逐渐下降趋势(P<0.05),使用R-ICSI的周期数和卵子数占比则呈现逐渐上升的趋势(P<0.05)。用Logistic多因素回归模型分析发生低受精率相关风险因素中,精子DFI 的OR值为1.013(95%可信区间:1.004～1.023,P<0.05),提示精子DFI越高,发生受精率降低的风险逐渐升高。结论 精子DFI是常规体外受精过程中的一个重要的负面影响因素。     

早期要素肠内营养与肠外、肠内阶段性营养治疗急性重症胰腺炎的对比研究

目的:探讨早期肠内要素营养(early enteral elemental nutrition,EEN)与肠外营养(parenteral nutrition,PN)、肠内营养(enteral nutrition,EN)阶段性营养支持对急性重症胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)的疗效及临床价值.方法:将45例临床SAP患者随机分为两组,分别接受早期肠内营养(EEN)和阶段性营养支持治疗.观察其血清白蛋白、淀粉酶水平、胃肠功能,比较其并发症、感染率、住院时间和住院费用.结果:两组血清白蛋白水平变化和淀粉酶水平比较无统计学意义(P＞0.05),EEN组肠道蠕动恢复较早,且并发症、感染率、住院时间和费用低于阶段性营养支持组(P＜0.05).结论:在SAP的治疗中,72 h之内行EEN能减少并发症,改善患者预后.     

Unifuse导管直接溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成

目的探讨Unifuse导管直接溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）的临床效果。方法将我院2010年4月—2012年4月经多普勒超声确诊的82例下肢DVT采用分层随机方法分成两组：下腔静脉滤器（IVCF）置入＋外周静脉溶栓组41例;IVCF置入＋导管直接溶栓（CDT）组41例。以临床疗效、患肢消肿率及溶栓率作为疗效评价指标,比较两组患者治疗效果。结果 IVCF置入＋CDT组与IVCF＋外周静脉溶栓组比较,临床总有效率（100%vs87.8%）、肢体消肿率[大腿：（86.12±5.85）%vs（78.10±9.70）%;小腿：（89.40±10.02）%vs（75.40±11.32）%]、溶栓率[（70.67±12.19）%vs（59.72±15.21）%]均提高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 IVCF＋CDT治疗下肢DVT,较IVCF＋外周静脉溶栓疗效明显提高,且安全可靠,有较高的临床应用及推广价值。     

起搏位点对左心室收缩模式及功能的影响

目的 分析右室不同位点起搏状态下左室收缩模式及功能的改变,探讨生理性起搏模式的超声评价方法.方法 选择因阵发性室上性心动过速行射频消融的无器质性心脏病患者26例,于消融成功后,置入起搏导管,按照随机顺序分别起搏右房(AAI)、右室心尖部(VVI-RVA)、右室流出道(VVI-RVOT)、右室间隔部(VVI-IVS).测量各起搏状态下:①左室收缩功能参数,包括左室扭转角度(Twist)、主动脉瓣口血流速度—时间积分(VTIAo)、左室整体纵向应变(Gε);②左室收缩模式参数,包括左室各节段收缩期纵向应变峰值(Sε)、标化纵向应变达峰时间(TPε),分别计算不同层面、不同室壁Sε、TPε值,并用曲线图分别显示Sε、TPε在不同层面及不同室壁同的分布规律,分析不同室壁Sε、TPε的相关性.结果 与AAI组比较,右心室3个位点起搏组的左室收缩期Twist、VTIAo、Gε绝对值均显著降低(P均＜0.01),其中右室3个位点起搏组的Gε绝对值差异有统计学意义,表现为VVI-RVOT＞VVI-IVS＞VVI-RVA(P＜0.05).与AAI组比较,右室3个位点起搏组的左心室各节段收缩期Sε、TPε的分布模式改变明显,以RVA组最为显著,而RVOT组及RVS组分布模式较接近.室壁Sε与TPε呈负相关(r=-0.51,P＜O.001).结论 与AAI起搏模式相比,右室起搏可导致左室收缩模式的改变及收缩功能的降低,其中以RVA起搏状态改变最为明显.左室纵向应变参数可用于评价不同位点起搏状态下左室收缩模式及功能改变.     

应用磁珠联合MALDI-TOF MS技术建立前列腺癌血清差异蛋白诊断模型

  目的  应用蛋白组学技术对前列腺癌血清差异蛋白进行筛选, 并建立前列腺癌诊断模型。  方法  2010年3月至5月间于北京协和医院泌尿外科病房采集12例前列腺癌患者及11例非前列腺癌对照者血清样本, 应用弱阳离子磁珠联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术对前列腺癌患者和对照者血清进行差异蛋白研究, 筛选出多个前列腺癌血清差异蛋白, 并应用ClinProTools 2.2软件通过遗传算法建立诊断模型。  结果  共筛选出前列腺癌与对照组之间差异蛋白峰126个, 具有较明显差异的蛋白峰24个(P=0.178)。通过遗传算法优化选择, 筛选出符合条件的15个差异蛋白峰建立诊断模型, 交叉验证准确性为81.82%, 识别能力为100%。  结论  应用磁珠联合MALDI-TOF MS技术及遗传算法成功建立前列腺癌血清差异蛋白的诊断模型, 该模型识别能力高, 有助于减少前列腺癌的漏诊率。     

四川骨髓库汉族人群KIR及其HLA配体的相互关系研究

目的了解杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)及其HLA配体在四川骨髓库汉族人群中的基因频率分布和配对情况,探讨KIR和HLA的相互关系。方法随机选择四川骨髓库汉族街头无关捐献者标本286(人)份,采用聚合酶链式反应-序列特异性引物扩增(PCR-SSP)做KIR基因检测;采用聚合酶链式反应-直接测序分型法(PCR-SBT)测定HLA-A、B、C等位基因。结果所检测个体均具有结构基因3DL2、3DL3、2DL4和3DP1;共发现29种KIR基因型,ID为1和2的基因型最多见,频率分别为47.55%(136/286)和14.69%(42/286)。HLA-C1和HLA-C2的频率分别为85.15%(487/572)和14.85%(85/572);携带Bw4表位的HLA-A、-B的频率分别是20.78%(119/572)、31.99%(183/572)。所有个体均含有抑制性KIR/HLA-C配受体对,含有1、2和3对配受体对的频率分别是77.27%(211/286)、15.04%(43/286)和7.69%(22/286)。在KIR/HLA-Bw4配受体对中,仅含有3DL1+HLA-Bw4的频率为44.76%(128/286),仅含有3DS1+HLA-Bw4的频率为2.80%(8/286),同时含有3DL1+HLA-Bw4和3DS1+HLA-Bw4的配受体对的频率为25.17%(72/286),另外有27.27%(78/286)的个体无KIR/HLA-Bw4配受体对。结论四川骨髓库汉族人群KIR基因及其KIR/HLA配受体对的分布具有自身特点,抑制性KIR/HLA配受体对占优势。     

a-N-乙酰半乳糖胺酶多克隆抗体的制备及特异性鉴定

目的制备a-N-乙酰半乳糖胺酶(NAGA)的高效价高特异性的兔多克隆抗体。方法利用pET22b-NA-GA/BL21(DE3)工程菌株表达NAGA,经Ni2+Sepharose 6 FF亲合层析,Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析两步纯化,得到纯度95%的NAGA作为抗原免疫新西兰白兔,获得NAGA的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高效价高特异性的抗体;用间接ELISA法检测抗体效价,用Western blotting评价抗体特异性。结果制备得到的NAGA兔多克隆抗体血清效价为1×106,经过rProtein A柱纯化后抗体蛋白纯度95%,效价为1×105;Western blotting显示:该NAGA兔多克隆抗体只与NAGA发生特异性反应。结论获得了NAGA的高效价高特异性的兔多克隆抗体。     

对氧磷酶2基因多态性（C311S）与2型糖尿病合并冠心病的关系

目的探讨对氧磷酶2（paraoxnase2,PON2）基因多态性（C311S）与2型糖尿病合并冠心病的关系。方法用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR．RFLP）分析法探查PON2基因多态性（C311S）在正常对照组、单纯糖尿病组以及2型糖尿病合并冠心病组中的基因频率,组间频率比较采用X^2检验,数据用SPSS软件进行分析。结果发现检测者存在PON2基因多态性（C311S）,且在2型糖尿病合并冠心病患者中PON2基因的C等位基因频率明显高于正常对照组和单纯糖尿病组（P〈O．01）。结论2型糖尿病患者PON2基因的C等位基因第311位密码子的多态性可能与并发冠心病有关。     

Modified Closed Reduction and Percutaneous Kirschner Wires Internal Fixation for Treatment of Supracondylar Humerus Fractures in Children

Objective:Supracondylar humerus fractures are the most frequent fractures of the paediatric elbow.The present study introduced a modified surgical procedure for...