双氢青蒿素对甲型流感病毒H1N1诱导人支气管上皮细胞TNF-α和IL-6表达的影响及机制研究

  目的  探讨双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对甲型流感病毒（influenza A virus,IAV）A/PR/8/34（H1N1）诱导人支气管上皮细胞（BEAS-2B）促炎症因子和细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal regulated kinase,ERK）信号通路蛋白表达的影响。  方法  采用不同浓度的DHA（即0、12.5、25、50和100 μmol/L）作用BEAS-2B细胞24 h ,CCK8法检测DHA对BEAS-2B细胞活性的影响。IAV吸附BEAS-2B细胞1 h ,分别采用不同浓度的DHA（低、中、高浓度DHA ,即12.5、25和50 μmol/L）作用24 h,同时设置正常对照组和IAV组。采用实时荧光定量PCR法（real time quantitative PCR, RT-qPCR）和酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）分别检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）的mRNA和蛋白表达水平,蛋白质印迹法（Western blot）检测磷酸化ERK（phospho-ERK, p-ERK）蛋白表达水平。采用特异性ERK激动剂（ERK agonist,20 ng/mL）作用BEAS-2B细胞（分组为正常对照、IAV、DHA、DHA+IAV、ERK agonist、DHA+IAV+ERK agonist组）24 h,观察对DHA抑制IAV诱导BEAS-2B细胞TNF-α、IL-6和p-ERK表达的影响。  结果  DHA浓度在12.5、25、50 μmol/L时,BEAS-2B细胞存活率与正常对照组比较差异无统计学意义;与正常对照组比较,IAV组细胞TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白及p-ERK蛋白表达水平增高 (P<0.05),与IAV组比较,IAV+ DHA低、中、高浓度组细胞TNF-α、IL-6 mRNA和TNF-α、IL-6、p-ERK蛋白表达水平呈剂量依赖性的下降(P<0.05);而ERK激动剂减弱了DHA抑制IAV诱导BEAS-2B细胞ERK信号通路蛋白p-ERK表达和促炎症因子TNF-α、IL-6的分泌。  结论  DHA可通过ERK信号通路抑制IAV诱导BEAS-2B细胞TNF-α和IL-6的表达。     

基于数据挖掘的中医妇科流派治疗崩漏的处方用药规律分析

目的〓利用数据挖掘分析各中医妇科流派对崩漏的用药规律。方法 收集各妇科流派治疗崩漏的处方,采用频数分析挖掘核心药物,统计药物归经情况,采用关联规则和聚类分析对核心药物使用规律进行挖掘。结果 收集处方27个,涉及中药110味。核心药物23味,前5位为白芍、地黄、当归、熟地黄、阿胶,药物主归肝肾脾心经。通过关联规则分析得到28个药物组合,常用的是牡丹皮和地黄。聚类分析得到7个药物聚类组合。结论 各中医妇科流派灵活运用多种止血法,治疗崩漏均不忘顾护阴血。     

微创经皮手术与开放手术椎弓根钉内固定治疗胸腰椎骨折的临床疗效对比

为了对比微创经皮手术与开放手术椎弓根钉内固定治疗胸腰椎骨折的临床疗效,收集了104例胸腰椎骨折患者的临床资料进行回顾性分析。患者均采取椎弓根钉内固定术治疗,按采取的手术方法分为微创经皮手术组和开放手术组。所有患者术后均获得12~18个月的随访。结果显示,微创经皮手术组的切口长度、手术时间、出血量、术后3天VAS评分和不良切口愈合率均显著低于开放手术组,但术中X线透视次数显著多于开放手术组;两组术后1年骨折椎体前缘高度比值、Cobb''s角、Oswestry功能障碍指数和内固定失败率无显著差异(P＞0.05)。因此微创经皮手术与开放手术椎弓根钉内固定治疗胸腰椎骨折,都可以获得满意的临床疗效。前者虽然存在较多的X线暴露的缺点,但创伤更小,适合在临床上推广应用。     

中西医结合治疗骨髓增生异常综合征

骨髓增生异常综合征(myelodyslastic syndromes,MDS)属于中医的"髓毒劳",其基本病机为正虚毒结,是由毒邪内犯髓府导致精血不得化生所致,治疗当以解毒祛邪、扶正固本为主。首先,主靶方选用升麻鳖甲汤主攻毒邪内蕴。其次,根据不同的体质选用次靶方:若气血为痰湿之邪壅滞不通,当祛痰化湿,方选涤痰汤;若邪盛迫自妄行之自行不畅,当清热凉血,方选犀角地黄汤;若邪盛迫血妄行之血行不畅,当活血化瘀,方选血府逐瘀汤;若病邪迁延不愈,邪毒暗耗肾阴或损伤肾阳,致阴阳互损,当补益肾阴肾阳,方选六味地黄丸或金匮肾气丸。最后,可将西医节拍式化疗运用到MDS治疗中,具体方案是口服依托泊苷,一次50 mg,一周2次,再联合升麻鳖甲汤等中药汤剂随证加减,持续性抑制作用与间歇性打击可以从更大程度上减缓疾病的进展,抑制肿瘤细胞过度增殖,降低毒性反应。     

经胸骨后隧道间置结肠代食管治疗腐蚀性食管烧伤后瘢痕狭窄

目的 探讨经胸骨后隧道间置结肠替代食管术式治疗腐蚀性食管烧伤后瘢痕狭窄的临床经验及并发症的治疗。方法 对65例食管腐蚀性烧伤后瘢痕狭窄患者，分别行顺蠕动结肠代食管经胸骨后至颈部与食管端端吻合（56例）、顺蠕动结肠代食管经胸骨后至咽底吻合（7例）、逆蠕动结肠代食管经胸骨后至颈部与食管端端吻合（2例）治疗，总结上述病例术前、术中、术后治疗经验。结果 术后51例患者恢复顺利痊愈出院。12例术后出现颈部吻合口瘘，其中2例经再次颈部手术治愈，10例保守治疗痊愈。2例术后发生结肠坏死，再次手术死亡1例，痊愈1例。结论 治疗腐蚀性食管烧伤可以旷置瘢痕食管，在良好术前准备、准确的外科操作、正确的术后处理前提下，经胸骨后隧谱闻詈结肠巷代食管术式杆集满帝．     

实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞肝癌中B-myb的表达及其临床意义

目的 建立B-myb mRNA表达量检测的实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)系统,检测肝细胞肝癌(HCC)中B-myb的表达并分析其临床意义.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例正常肝组织中B-myb mRNA的表达情况.结果 B-myb mRNA在肝癌组织(0.0375±0.0168)及癌旁肝组织(0.0353±0.0128)中的表达水平明显高于在正常肝组织(0.0265±0.0099)中的表达水平(P＜0.05),而在肝癌组织及癌旁肝组织中的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).B-myb在人肝癌组织中的表达与临床分期、肝外转移及术后复发明显有关,而与门静脉癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系.结论 该方法克服了传统PCR只能定性检测而不能定量检测的缺点,为研究B-myb在HCC中的表达提供了定量方法.B-myb可能与肝癌的发生、发展有关.     

广西桂南地区抗病毒治疗艾滋病患者耐药特征及影响因素分析

目的 了解广西桂南地区艾滋病毒感染或艾滋病（HIV/AIDS）患者免费抗反转录病毒治疗（ART）病毒抑制失败的耐药特征及影响因素,为HIV/AIDS患者临床治疗提供参考依据。方法 横断面分析行免费抗病毒治疗的HIV/AIDS患者,根据纳入标准筛选研究对象,采用描述分析、χ²检验分析研究对象病毒学抑制失败和耐药特征,用二项logistic回归分析耐药影响因素。结果 1 470例接受免费ART治疗HIV/AIDS患者中,137例（9.32%）病毒学抑制失败。病毒学抑制失败患者经耐药检测,有75例（54.74%）显示耐药,以NRTI（40.15%,55/137）和NNRTI耐药（51.82%,71/137）为主,同时发生NRTI和NNRTI耐药率为35.77%（49/137）;1例显示对3种（NRTI、NNRTI和PI）药物耐药（0.73%,1/137）。NRTI耐药位点以M184V/I、K65R、T69S/N/A为主,分别占31.25%、21.88%和21.09%。NNRTI耐药位点以K103N/R/S、G190S/A/C/Q、V179D/E为主,分别占19.16%、...     

疟疾双重PCR检测方法的建立和初步应用研究

目的 建立一种适合于我国恶性疟、间日疟和两混合感染地区,一次性检测人体内或蚊体内的恶性疟原虫(P.f.)和间日疟原虫(P.v,)的双重聚合酶链反应(PCR)法。方法 根据疟原虫红内期SSUrRNA基因特定片段,设计合成3条寡核苷酸特异引物,在一个反应体系中,同时检测P.f．与P．v.的双重PCR技术,操作方法按PCR常规。结果 从P.f.和P．v．感染血样中,分别扩增出274bp和412bp的特异片段,检出水平达1-5个虫／μl血,而人基因组DNA、约氏疟原虫、伯氏疟原虫均未见扩增条带;但食蟹猴疟原虫(P．c,)与P.v．相似,在412bp可见扩增条带。经对采自不同疟区发热待查病人的滤纸干血滴和确诊疟疾病人的静脉血检测,344例血样中,检出阴性112例、P.f．109例、P.v.l114例、P．f. P.v.9例,阳性率67．4％;比常规镜检的阳性率66．3％稍高,尤以检出P．f． P．v．感染病例高。分别检测人工感染P.f．与P.v.各10只大劣按蚊的阳性唾腺,均被检出同种的阳性结果。结论一次性检测P．f.DNA与P.v.DNA的双重PCR法,敏感性高,特异性强,稳定性好,具有简化操作、提高工效、降低耗费的优点。对发热待查病人诊断和蚊媒感染疟原虫调查,以及疟疾病原学的检测质控方面,均有实用价值。