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目的:观察转染癌基因的骨髓基质干细胞在体外分化情况,为肝细胞癌的细胞源研究提供实验依据。方法:实验于2003-05/2004-06在南方医科大学药理教研室实验室完成。①两步法获取大鼠肝细胞,梯度离心法分离大鼠骨髓基质干细胞。②单基因转染是单独将c-myc或K-ras癌基因瞬时转染大鼠骨髓基质干细胞,6孔培养板中培养,24h后荧光显微镜下观察骨髓基质干细胞转染结果。双基因转染步骤相同,只是将c-myc和K-ras癌基因同时转染大鼠骨髓基质干细胞。③c-myc癌基因转染组、K-ras癌基因转染组、双癌基因转染组常规培养,加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养基,于37℃、体积分数为0.05的CO2孵箱培养,每24h半量更换培养液。④c-myc癌基因转染 肝细胞组、K-ras癌基因转染 肝细胞组、双癌基因转染 肝细胞组将已转染癌基因的骨髓基质干细胞,置于叠加的培养板半透膜的上方(细胞密度均为1×105个/cm2),再将肝细胞置于半透膜的下方(每孔细胞密度为3×105/cm2)进行共培养,其余步骤同常规培养。⑤通过反转录聚合酶式反应和细胞免疫组化检测骨髓基质干细胞分化情况。结果:①癌基因转染24h骨髓基质干细胞检测结果:单独转染c-myc或K-ras癌基因的细胞,其绿色荧光蛋白呈均匀一致分布;双基因转染的细胞,绿色荧光蛋白呈点片状分布。②各组骨髓基质干细胞向肿瘤细胞分化检测结果:c-myc癌基因转染组、K-ras癌基因转染组、双癌基因转染组的骨髓基质干细胞,均未向肿瘤细胞分化;c-myc癌基因转染 肝细胞组、K-ras癌基因转染 肝细胞组、双癌基因转染 肝细胞组的骨髓基质干细胞,均向肝细胞癌发展;空白对照组骨髓基质干细胞细胞均为阴性。此外,双癌基因转染 肝细胞组的骨髓基质干细胞分化增殖迅速,反转录聚合酶式反应和免疫组化检测发现,培养第7天出现甲胎蛋白表达,并迅速增加,而第7天出现的白蛋白和细胞角蛋白18表达迅速减弱,第14天消失。结论:转染癌基因的骨髓基质干细胞,在向肝细胞诱导的条件下,部分癌基因可以使干细胞分化为肝癌细胞;多癌基因转染时,更易于使干细胞分化为肝癌细胞。 相似文献
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国内干细胞移植治疗心血管疾病的临床研究与应用进展 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:一些研究证实,干细胞移植可以取代坏死心肌细胞、增加有功能的心肌细胞数量,并建立新血管来改善血供、改善心功能。本文旨在总结近年来国内干细胞移植治疗心血管系统疾病方面的情况。资料来源:应用计算机检索Medline、CBM、CNKI数据库2001-01/2006-11期间的相关文献。包括临床研究(不限研究对象年龄、性别)和基础研究,不限体内或体外研究。中文检索词包括“干细胞,移植,临床研究,心肌梗死,心衰”。英文检索词有“stem cell,bonemarrow,mesenchymal,transplantation”。资料选择:共收集到相关文献820篇,阅读全部文章的文题和大部分文章。纳入标准:①与干细胞移植相关。②与治疗心血管系统疾病相关。③与临床研究相关文献。排除标准:综述文献、重复性研究及Meta分析类文章。资料提炼:共得到符合纳入条件的文献225篇,排除595篇。选择其中30篇进行分析,其中英文13篇,中文19篇,其中中文有1篇为手工检索的增刊。资料综合:①国内于2002年陆续开展干细胞移植治疗心血管系统疾病的探索。②国内用于临床治疗的干细胞类型多为骨髓单个核细胞,其他有骨髓间充质干细胞、骨骼肌干细胞和外周血干细胞也见于临床实验的报道。③干细胞输注途径多以冠脉内注射为主,治疗的临床疾病主要为急性、陈旧性心肌梗死与慢性心功能不全等。结论:干细胞移植可以取代坏死心肌细胞、增加有功能的心肌细胞数量,并建立新血管来改善血供、改善心功能,已应用于临床,未出现安全性问题,故认为干细胞移植技术可以作为心血管系统疾病治疗的手段之一。 相似文献
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Lennard GH van den Boom Reinoud W Brouwer Inge van den Akker-Scheek Sjoerd K Bulstra Jos JAM van Raaij 《BMC musculoskeletal disorders》2009,10(1):119-4
Background
Prosthetic design for the use in primary total knee arthroplasty has evolved into designs that preserve the posterior cruciate ligament (PCL) and those in which the ligament is routinely sacrificed (posterior stabilized). In patients with a functional PCL the decision which design is chosen depends largely on the favour and training of the surgeon. 相似文献36.
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Andreas Zoubek Beatrix Hotzinger Georg Mann Christina Peters Wolfgang Emminger Eva Perneczky-Hintringer Helmut Gadner Gerhard Mostbeck Ernst Horcher Werner Dobrowsky 《Pediatric hematology and oncology》1994,11(6):613-623
A dose-intensive regimen of cyclophosphamide (140 mg/kg over 2 days), doxorubicin (Adriamycin, 75 mg/m2 over 3 days), and vincristine (1 mg/m2 on days 1,2, and 3 and 1.5 mg/m2 on day 9) was tested in 18 children and adolescents with poor-prognosis recurrent or refractory solid tumors. Nine were affected by neuroblastoma, 3 by Ewing's tumors, 2 by rhabdomyosarcoma, 2 by synovial sarcoma, 1 by hepatocellular carcinoma, and 1 by osteogenic sarcoma. All enrolled patients were heavily pretreated, including 2 patients after bone marrow transplantation. Forty courses were applied (median, 2). The overall response rate was 33% (2 complete remissions and 4 partial remissions). Responses were obtained in children with neuroblastoma, Ewing's tumors, and hepatocellular carcinoma. Myelosuppression [World Health Organization (WHO) grade IV after all courses] and cardiac toxicity (3 WHO grade I,5 WHO grade III, and 3 WHO grade IV) were the main side effects. Nephrotoxicity and hepatoxicity were not obserued. With further therapy consisting of surgery, radiotherapy, and high-dose chemotherapy [cisplatin, carboplatin/etoposide (VP16), or ifosfaamide/VP16 with or without autologous stem cell reinfusion after conditioning with melphalan/VP16/carboplatin], 3 complete remissions and 5 very good partial remissions were obtained. Ten of 18 Patients are alive after a median follow-up of 16 months. 相似文献
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合成了15个3α和β-取代苯申酰氨基-6β-羟基,乙酰氧基和苯甲酰氧基-托品烷类化合物。其中化合物5d,12c和12d对D-1和D-2受体都有一定的亲和作用。 相似文献
40.
Invasion of erythrocytes by Plasmodium falciparum malaria parasites: evidence for receptor heterogeneity and two receptors 总被引:19,自引:0,他引:19
Plasmodium falciparum malaria parasites with different capabilities of invading sialic acid-deficient erythrocytes were identified. Thai-2 parasites cultured in Tn erythrocytes invaded neuraminidase-treated and Tn erythrocytes twice as efficiently as Thai-2 parasites cultured in normal erythrocytes and seven to ten times more efficiently than a cloned line of Camp parasites cultured in normal erythrocytes. All three parasite lines required sialic acid for optimal invasion, but Thai-2 parasites cultured in Tn erythrocytes invaded neuraminidase- treated erythrocytes with 45% efficiency whereas Camp parasites invaded neuraminidase-treated erythrocytes with less than 10% efficiency. P falciparum malaria parasites probably possess two receptors: one that binds to a sialic acid-dependent ligand and another that binds to a sialic acid-independent ligand. Parasites may differ in the quantity or affinity of their receptors for the sialic acid-independent ligand. 相似文献