共聚焦激光扫描显微镜(MRC600)活体观测家兔大脑皮质内微循环的动物模型制作方法及其应用探讨

目的 :用共聚焦激光扫描显微镜活体观测家兔大脑皮质内微血管构筑及其微循环提供更近似于人类的动物模型。方法 :在开放颅窗的家兔动物模型上 ,荧光素标记血浆 ,罗丹明 6G标记WBC ,用共聚焦激光扫描显微镜活体观测正常状态下家兔大脑皮质内微循环 ,并经图像分析系统测量数据 ,用SAS软件包进行统计学分析。结果 :本研究探索用开放颅窗的家兔动物模型进行大脑皮质微循环的研究取得成功 ,作者认为采用开放颅窗的家兔动物模型使观察大脑皮质的深度达 2 5 0～ 30 0 μm ,对大脑皮质内微血管构筑及微循环进行活体观测 ,可进行连续断层扫描 ,或在同一层面进行连续定位扫描监测 ,所摄取图像经监视器及计算机摄入并存盘待分析 ,用图像分析系统进行观测血管口径 ,血流速度 ,血液流态 ,白细胞 ,红细胞运动等微循环指标 ,也可用标准Bio Radthruview软件三维重建 ,观察各种血管形态 ,研究大脑皮质微血管构筑。结论 :开放颅窗的家兔动物模型是更近似于人类的动物模型 ,适合用于脑血管疾病发病机理的研究     

Application of phage display peptide library to autoimmune diabetes: identification of IA-2/ICA512bdc dominant autoantigenic epitopes

Autoantigenic epitope mapping represents a critical issue in autoimmune diseases. The islet tyrosine phosphatase-like protein IA-2/ICA512bdc is a major autoantigen in type 1 diabetes (IDDM), but the epitopes responsible for autoantibody binding have been only partially defined. The aim of our study was to identify ICA512bdc epitopes, and in particular mini-epitopes, utilizing a novel strategy for autoimmune diseases. The study was performed in three sequential steps: (1) construction of a lambda-phage surface-displayed ICA512bdc cDNA library with the methodology of tagged random priming with peptides displayed as a fusion to the C terminus of the capsid protein D; (2) affinity selection of the resulting library, followed by immunoscreening, enzyme-linked immunosorbent assay and sequence analysis of positive clones, and (3) radioimmunoprecipitation to detect autoantibodies to the selected clones. This strategy resulted in the identification of two epitopes (IA-2 residues 761 - 964 and 929 - 979), which were recognized by 100 % and 62.9 % ICA512bdc-positive IDDM patients, respectively. Interestingly, the larger clone was detected also by a proportion (16.7 %) of new onset ICA512bdc-negative patients, thus suggesting that this region contains not only the main autoantigenic repertoire of ICA512bdc molecule, but is able to detect IA-2 autoantibodies in even higher percentages of patients. In addition, this study showed the existence of multiple epitopes located in the C-terminal domain of the IA-2 protein, one of which is formed by the 50 C-terminal amino acids, and provided evidence that the strategy used represents a valid tool for identification of epitopes within autoantigenic molecules.     

华北地区汉族群体15个短串联重复序列基因座遗传多态性分析

目的调查华北地区汉族人群15个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座遗传多态性分布和群体遗传学数据。方法应用毛细管电泳技术和五色荧光复合扩增的方法,检测597名汉族无关个体的15个STR基因座基因型。结果15个STR基因座的基因频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,所检测的15个STR遗传标记均具有高度多态性,杂合度均超过0.62,15个基因座的个体识别力在0.802~0.967之间,非父排除率在0.320~0·697之间,匹配概率在0.033~0.198之间。15个基因座的累积个体识别能力为0.999999以上,累积非父排除率为0.99999571,累积匹配概率为8.93×10-18。结论联合检测15个基因座可为亲缘鉴定和个体识别提供可靠的法医学证据,这15个STR基因座适用于中国人群的法医物证学检验。     

用细胞酶联免疫吸附法筛选分泌抗人B细胞分化抗原单抗的杂交瘤

用活化的人Ｂ细胞株３Ｄ５细胞免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取小鼠脾脏细胞与ＳＰ２／０细胞融合，融合后细胞置甲基纤维素半固体培养基生长。以０．５％甲醛处理的３Ｄ５细胞和ＣＥＭ细胞包被酶细胞反应阳性而与ＣＥＭ细胞反应阴性的克隆。再经间接免疫荧光染色后，用流式细胞仪复测以上所得３３个阳性克隆，结果３Ｄ５阳性ＣＥＭ阴性者２７例，占８１．８２％，表明ＣＥＬＩＳＡ法是一个粗筛抗人Ｂ细胞分化抗原的简便有效方法。     

二氧化硫吸入对小鼠脾细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨二氧化硫大剂量吸入对小鼠脾细胞凋亡和脾脏组织学结构的影响.方法:以不同浓度的二氧化硫分别对小鼠连续染毒7d,用透射电镜法、DNA琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞技术观察小鼠脾脏组织学结构和细胞凋亡改变.结果:在二氧化硫染毒组小鼠脾脏的红髓区和白髓区均有典型的脾细胞凋亡发生,在边缘区可见大量核变形淋巴细胞,此外还可见巨噬细胞出现明显的凋亡改变和网状内皮细胞受损.168mg/m3二氧化硫染毒可引起小鼠脾细胞凋亡率增加.结论:大剂量二氧化硫吸入可引起小鼠脾脏超微结构改变,在一定剂量和时间范围内可引起脾细胞凋亡加速,从而对机体的免疫功能造成一定损伤.     

左心室局部心肌梗塞时的组分式模型及计算机仿真

为研究左心室局部心肌梗塞时心肌各部分的能量供需状况及心脏辅助装置对改善心肌能量供给的影响，我们建立了一个由左心室正常区域心肌和梗塞区域心肌两部分组成的组分式模型，我们的模型以Ｓｕｎａｇａｗａ的模型为基础，并在此基础上加以扩展，与Ｓｕｎａｇａｗａ的模型相比，我们的模型允许梗塞区域心肌的收缩性在一定范围内变化，从而可以模拟各种不同范围和不同程度的梗塞情况。用建立好的左心室组分式模型取代我们原有的狗的心     

股骨胫骨髌骨三体人膝关节咬合运动数学模型

基于人膝关节的解剖特征，在文献［３］的基础上，引入了股骨髌骨关节，从而建立了一个完整的人膝关节在矢状面内运动的咬合数学模型。该模型包含了运动膝关节股骨与胫骨间及股骨与髌骨间的咬合滚动和咬合滑动。此模型可用来建立人腿的生物动力模型     

STAT3 couples with 14-3-3σ to regulate BCR signaling,B-cell differentiation,and IgE production

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蝎蜂毒肽对大鼠纤溶系统作用初探

本研究采用大鼠肢体血管灌流和整体给药两种模型，观察蝎蜂毒（ＳＢＰ）对血管理灌流液内纤溶酶原激活物（ＰＡ）活性、血浆优球蛋白纤溶性（ＥＦＡ）和纤溶酶（ＰＬ）活性的影响。结果说明，ＳＢＰ有明显激活纤溶系统作用；其机制可能涉及血管内皮细胞释放ＰＡ活性增加，进一步促使纤溶酶原活化为ＰＬ增多的途径。