丙戊酸钠慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3及GABA-TmRNA表达的影响

目的通过研究丙戊酸钠(VPA)慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞γ-氨基丁酸转运体-3(GAT-3)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T) mRNA表达水平的影响,从星形胶质细胞的角度来探讨VPA的停药反跳机制。方法用含50 mg/L VPA的DMEM培养基将C6细胞培养2周后制成VPA慢性作用模型,采用半定量RT-PCR方法检测VPA慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的变化。结果(1)在VPA慢性作用下,相对灰度值(RV值,即GAT-3、GABA-T电泳条带与相应的β-actin灰度积分的百分比)为(39.1±0.5)%,低于正常对照组的(46±1.3)%;各停药组的RV值均低于VPA慢性作用组,其中停药24 h组的最低,为(11.7±1.6)%,停药30 min组的最高,为(38.9±0.6)%;而停药48 h组又升高到(33.5±1.1)%。(2)VPA慢性作用组[RV值为(71.31±6.91)%]与对照组[RV值为(34.77±3.26)%]相比,GABA-T mRNA表达明显上调;各停药组与VPA慢性作用组相比GABA-T mRNA的表达明显下调,其中停药12 h组[RV值为(25.36±7.68)%]降至最低。结论VPA慢性作用可使GAT-3 mRNA的表达下调,使GABA-T mRNA表达上调。VPA慢性作用后停药造成的GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的波动可能与VPA停药反跳有关。     

胰岛素受体及胰岛素受体底物-1、2在大鼠脑中的分布

目的:观察胰岛素受体(insulin receptor,InsR)及胰岛素受体底物-1、2(insulin receptor substrate-1、2,IRS-1、2)在正常成年大鼠大脑中的分布,为脑内胰岛素信号传导途径的研究提供理论依据。方法:应用免疫组织化学染色的方法观察正常成年大鼠脑中InsR、IRS-1、IRS-2的分布。结果:InsR、IRS-1、IRS-2在正常成年大鼠脑中广泛分布,在与学习记忆和能量代谢相关的脑区如大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团均有表达。结论:InsR及IRS-1、IRS-2在正常成年大鼠脑中广泛表达,但表达部位不完全一致,提示它们在大鼠中枢神经系统的正常功能活动中可能发挥不同的作用。     

经蝶垂体腺瘤切除术中可疑组织的鉴别和处理

目的 探讨经蝶垂体腺瘤切除术中可疑组织的分辨和处理方法。 方法 回顾性分析我科经蝶垂体腺瘤切除术中因难以确定性质而单独送检可疑组织20例患者的临床资料,对术中垂体腺瘤与正常垂体组织的分辨方法进行总结。 结果 20例可疑组织术后单独病检示:肿瘤组织与正常垂体混杂并存9例,正常垂体组织5例,肿瘤组织2例,其他性质组织4例。 结论 分辨垂体腺瘤和正常垂体组织主要依据术中外观、质地、血供以及可能存在的边界,若术中难以判断,则可取少量可疑组织单独送病理检查以明确组织性质,指导下一步治疗。     

APE1在宫颈癌的表达及其与锎-252中子放疗预后的关系

目的探讨脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（APE1）基因在宫颈癌中的表达情况及其与临床病理和锎-252中子放射治疗预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测10例正常宫颈组织、15例子宫颈上皮内肿瘤（CIN）组织、89例宫颈癌组织（接受锎-252中子刀放疗）中APE1的表达,并分析其与宫颈癌临床病理及患者预后的关系。结果宫颈癌组织APE1表达水平明显高于正常宫颈组织和CIN病例（P〈0．01）。APE1在正常宫颈组织和CIN病例均呈胞核表达,宫颈癌组织中APE1呈胞核表达（59例）、单纯胞浆表达（8例）或核浆共同表达（22例）。APE1表达强度与宫颈癌FIGO分期、病理分级和淋巴结转移情况有关（P〈0．05）,与年龄和病理分型无关。APE1亚细胞定位情况与FIGO分期、病理分级有关（P〈0．01）,与淋巴结转移情况无关。生存分析显示在APE1核表达组（中位生存时间70．9月）和APE1低表达组（中位生存时间75．8月）的生存时间明显长于APE1浆表达组（中位生存时间57．8月）和APE1高表达组（中位生存时间56．5月）（P=0．025,0．001）。结论APE1胞质异位表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,APE1亚细胞定位和表达水平对锎-252中子放射治疗宫颈癌的疗效有提示作用。     

非体外循环下冠脉搭桥术同期行肺癌根治术经验总结

目的:总结冠心病患者合并肺部疾病需同期完成不停跳冠状动脉旁路移植术及肺癌根治术的适应证选择及治疗经验。方法:2008年6月至2012年12月浙江大学医学院附属第一医院冠心病合并肺部肿瘤同期实施不停跳冠状动脉旁路移植及肺切除手术5例患者,肺部肿瘤TNM术前临床分期在II期及以下。冠状动脉造影提示三支病变3例,左主干及前降支病变2例。术中完成乳内动脉与左前降支吻合及大隐静脉旁路移植手术,全部5例同期行肺叶切除或肿块局部切除加局部淋巴结清扫。分析术前心肺功能评价的指标及手术适应证的选择依据,总结术中操作和围手术期处理要点。结果:全部5例患者手术过程顺利,搭桥1～4根,肺叶切除3例,肺肿瘤局部切除2例,平稳渡过围手术期,心肺功能恢复良好,均痊愈出院,术后肺部肿瘤病理诊断腺癌3例,鳞癌2例,pTNM分期IA 1例,IB 2例,IIA 1例,IIB 1例。结论:不停跳冠状动脉旁路移植术同期行肺癌根治术应严格把握手术指征,正确掌握术中、术后处理原则,同期实施手术治疗安全可行。     

脂质体介导a1,4-Gal T反义寡核苷酸对人脑胶质瘤细胞系SWO-38的作用

目的研究α1,4半乳糖糖基转移酶(α1,4Gal T)基因反义寡核苷酸(antisense oligonuc1eotide,ASO)对脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞的增值与凋亡的影响和与Fas表达的关系.方法采用脂质体介导的基因转染方法将α1,4Gal T基因ASO转入SWO-38细胞中.应用RT-PCR检测对α1,4Gal T mRNA表达的影响,克隆形成试验检测对细胞增值的作用,流式细胞术(FCM)和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的发生,FACS检测凋亡相关蛋白Fas表达的变化.结果脂质体介导的ASO转染后,经RT-PCR检测证实α1,4GalTmRNA基因的表达下降;克隆形成试验显示细胞生长明显受到抑制(P＜0.01);DNA电泳图像呈凋亡表现;FCM检测表明,导入α1,4Gal T基因ASO的SWO-38细胞的凋亡明显增加(P＜0.01);Fas蛋白表达水平明显下降(P＜0.01).结论α1,4GalT基因ASO可诱导脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞凋亡发生,其机制可能与fas基因调控有关.     

参芪颗粒对HIV／AIDS患者血清氧自由基代谢的影响

目的探讨参芪汤治疗HIV感染者／AIDS“气血两亏”型氧自由基及其可能的作用机制。方法应用参芪颗粒对HIV感染者／AIDS“气血两亏”型16例进行治疗,经3月的观察,对比前后临床表现及氧自由基的变化。结果治疗后HIV/AIDS患者症状改善、体征积分,提高超氧化物歧化酶（SOD）含量、增加还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活力。结论应用参芪颗粒治疗HIV感染者／AIDS“气血两亏”型,提高抗氧自由基水平,提高免疫功能,有明显临床疗效。     

CIK治疗肝硬化患者抗病毒疗效及对淋巴细胞和DC的影响

目的:观察自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)治疗对于慢性HBV感染所致的肝硬化患者淋巴细胞和树突细胞的影响以及其抗病毒疗效.方法: 33例肝硬化患者给予CIK细胞治疗,在治疗前后检测患者淋巴细胞亚群和mDC以及pDC的数量、病毒学标志以及其他不良反应.结果:CIK治疗后, 12例患者HBVDNA阴转,总有效率达51.5%.14例HBeAg阳性患者中有10例阴转, 5例患者出现HBeAb转换.在治疗无效病例仅CD8 T淋巴细胞、NKT细胞较治疗前有明显增高,而有效病例则表现出CD3 、 CD4 、 CD8 T淋巴细胞以及NKT细胞均较治疗前明显增高.且有效病例mDC、 pDC的数量较治疗前有明显增高.结论:CIK细胞治疗对于慢性HBV感染所致的肝硬化患者有一定的抗病毒疗效.其可诱导体内多种免疫活性细胞增高.     

改良的大鼠肝星状细胞分离方法

目的：探讨一种简便、高产的大鼠肝星状细胞（HSC）分离方法,为研究肝细胞相关实验提供细胞原材料。方法：应用悬浮缓冲液校正Nycodenz密度梯度分离液,使其浓度为11．3％（w／v）,采用单层一步梯度离心法分离HSC。采用台盼蓝染色排斥法鉴定细胞活率,desmin免疫细胞化学染色法鉴定HSCs纯度。结果：肝星状细胞得率每只大鼠约（4．0±0．5）×10^7个,细胞活力达到90％,细胞纯度达到95％。结论：本法简便、高产,是一种理想的分离肝星状细胞的方法,值得推广。     

术中椎旁肌封闭对控制腰椎手术后疼痛的疗效观察

【目的】探讨术中在椎旁肌肉中注射药物对控制腰椎手术后疼痛的治疗作用。【方法】153例腰椎后路手术患者,分为肌肉封闭组78例,注射利多卡因+罗哌卡因;对照组75例,不作封闭治疗。分别观察术后不同时间两组VAS疼痛评分、住院期间肢体感觉、肌力、腱反射、平卧翻身及下地行走时间等。【结果】术后1d、1周、2周VAS评分,椎旁肌封闭组为(5.75±0.76)、(4.22±0.80)、(3.37±0.79),对照组则为(7.82±0.69)、(6.32±0.79)、(5.53±0.79),各时间点相比差异有统计学意义(P<0.01)。椎旁肌封闭组对止痛药物的依赖性低,患者术后平卧翻身时间(1.85±0.31)d和下地行走时间(3.09±0.39)d均较对照组(2.09±0.36)d和(3.47±0.43)d缩短,差异有统计学意义(P<0.01)。观察期间封闭组没有发现明显的胃肠道反应、心血管系统异常反应、尿潴留等不良反应。【结论】术中椎旁肌封闭能有效控制腰椎手术后的早期疼痛反应疼痛,对术后功能恢复有利。