人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定

[目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclinD1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率。[方法]以cyclinD1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1￣4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclinD1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列。[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强。[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclinD1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclinD1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达。     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。     

软组织肉瘤手术加术中放疗的临床研究

目的：探讨软组织肉瘤术中放疗的意义。方法：对39例软组织肉瘤患者行根治或姑息性手术，术中放疗在术中放疗手术室进行，术中根据肿瘤大小，选择不同术中放疗限光筒及6～12MeV电子线1次照射15～25Gy，姑息手术者剂量加大至36Gy。术后辅以外照射治疗，常规设野，5／周，2Gy／次，总量40～50Gy。初发病灶10例，术后复发29例。结果：39例患者随访12～64个月，3、5年局控率分别为71．8％和64．1％。3年生存率为82．0％。结论：术中放疗具有较高的局控率，比之其他治疗具有许多优点，将获得较高的生存率。     

复方消经痛胶囊中香附、肉桂挥发油的提取和包合物工艺研究

目的研究香附和肉桂挥发油提取和β-环糊精包合的最佳工艺。方法采用正交试验,考察加水倍数、药材浸泡时间和蒸馏时间对挥发油提取量的影响;以挥发油包合率和包合物的收率综合评价,采用正交实验设计优选β-环糊精包合工艺条件。结果最优的提取条件为,药材浸泡12 h,加10倍量水,蒸馏8 h;最佳包合条件为,挥发油与β-CD的投料比为1∶6,包合温度为室温,包合时间为3 h。结论选出的提取和包合条件达到了挥发油收得率最高和包合收率较高,并且包合效果好的目的。     

《临证指南医案》老年病探析

复习《临证指南医案》(以下简称《指南》)中所有关于老年病的医案,旨在探讨《指南》关于老年病的论治思想。主要从老年人的生理病理特点、老年病的治疗及其调护等3个方面进行论述。生理病理方面,《指南》主要强调下元衰惫和阳明脉衰在老年病中的重要性,兼及阴血枯涸和虚实夹杂;治疗则重在固摄下元、调补奇经、注重通补和强调治疗本虚。《指南》中还特别强调老年人应宽怀静养,顺天之气以延年。     

华夏小葱制剂对大鼠脂肪肝形成中 活性氮与细胞因子损伤的影响

［摘要］目的探讨华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠的防治作用及其机制。方法SD大鼠60只，随机分为6组：空白对照组，模型对照组，华夏小葱低、中、高剂量组以及复方蛋氨酸胆碱（东宝肝泰片）组，每组10只。用高脂饮食、乙醇溶液并结合皮下注射小剂量四氯化碳的方法建立脂肪肝模型。结果模型对照组大鼠总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、血管内皮生长因子（VEGF） mRNA、细胞间黏附分子（ICAM） 1值显著高于空白对照组（P＜0.01）；华夏小葱低、中、高剂量组及复方蛋氨酸胆碱组TC、TG、NO、NOS、VEGFmRNA、ICAM 1值显著低于模型对照组（P＜0.01或P＜0.05）。结论华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠具有防治作用，其机制可能与降脂、减少活性氮及细胞因子对机体的损伤有关。     

盐酸阿夫唑嗪滴丸的制备和研究

目的制备盐酸阿夫唑嗪滴丸。方法采用正交试验法制备不同处方的滴丸。通过时体外溶出度和外观性状的考察,确定最优处方。结果处方为盐酸阿夫唑嗪:聚乙二醇4000:聚氧乙烯(40)硬脂酸酯:羧甲基淀粉钠:吐温80为2.5:20:1 0:1:0.2,滴丸10min体外溶出度99.4%。结论最优处方制备的滴丸,体外溶出良好,外观性状良好。符合滴丸的质量要求。     

婴儿型胆总管囊肿形成的病因分析

目的:探讨婴儿型胆总管囊肿形成的病因及炎症介质在其发生中的作用机制。方法:回顾性分析我院2000年—2006年收治的1岁以下的胆总管囊肿29例,采用免疫组化技术分别检测CD4、CD8、CMV、EBV在胆总管囊肿上皮细胞中的表达情况,并结合术中造影检查分析。结果:术中行胆道造影17例,其中显示胆胰管结合部囊肿11例,6例(54.5%)存在胆胰管合流异常。在囊肿壁上可以检测到CD4、CD8的表达,其中CD4表达11例(37.9%),CD8表达22例(75.9%)。在囊肿壁中可以检测到4例(13.8%)CMV表达,EBV表达为12例(41.4%)。结论:胰液逆流入胆道系统可以造成胆道上皮细胞破坏,病毒感染可以引起胆道上皮的炎症反应,引起CD8的高表达,胆道上皮破坏,脱落上皮形成蛋白栓阻塞胆总管远端造成胆总管囊肿的形成。     

多媒体课件在儿科护理学教学中的应用

多媒体课件对提高《儿科护理学》教学质量关系密切。多媒体课件制作应充分发挥其优势,灵活运用不同的课堂教学方式,使教学内容形象直观、教学过程生动多彩。同时注意避免多媒体教学中的误区,积极推进医学教育技术现代化改革的进程。     

牛血清白蛋白中氮含量测定不确定度分析

目的:建立牛血清白蛋白氮含量测定方法的不确定度评定方法。方法:确定不确定度来源,建立数学模型。结果:通过计算各分量不确定度,最终得出合成不确定度和扩展不确定度分别为0.08 mg 和0.16 mg,结论:本方法适用于凯氏定氮法中的不确定度评定分析,对于确定检测值的合理范围具有重要的参考意义。