RNA沉默PI3K、AKT基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的比较

目的探讨RNA技术分别沉默PI3K、AKT基因表达对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的比较,从而为卵巢癌的基因治疗提供有效的理论依据。方法体外合成PI3Kp110α、AKT序列特异性双链RNA(dsRNA),用lipofectamin2000转染人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法检测细胞活性,流式细胞仪法检测细胞凋亡率。结果 MTT法检测siRNA-AKT组细胞增殖能力降低大于siRNA-PI3K组,差异有统计学意义(P<0.05),而流式细胞术检测siRNA-AKT组细胞凋亡率则高于siRNA-PI3K组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外合成靶向AKT的siRNA更能有效地抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖及诱导细胞凋亡。PI3K通路并非AKT激活的唯一途径。     

非小细胞肺癌免疫治疗之假性进展和超进展

随着医疗技术日益发展,肿瘤治疗取得了显著的进步。其中,免疫治疗为肺癌患者开辟了一条全新的道路,其代表药物——PD-1/PD-L1抑制剂的应用显著延长了部分非小细胞肺癌(NSCLC)患者的整体生存率,但在使用过程中也可能出现假性进展或超进展(HPD)现象,其发生机制尚未明确。本文将对假性进展和HPD的定义、发生机制以及可供参考的生物标志物及鉴别方法进行系统地综述。     

皂角刺抗肿瘤活性成分的分离鉴定与活性测定

目的分离鉴定皂角刺中抗肿瘤活性成分。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,结合硅胶、葡聚糖凝胶等色谱方法追踪分离皂角刺抗肿瘤活性成分,根据理化性质和波谱数据鉴定化学结构,用半数抑制浓度(IC50)评价其抗肿瘤活性。结果从皂角刺中分离得到8个化合物,分别为黄颜木素(1)、槲皮素(2)、3-βacetoxyolean-12-en-28-oic acid(3)、木栓酮(4)、棕榈酸(5)、白桦醇(6)、β-谷甾醇(7),胡萝卜苷(8)。化合物1、3对7种体外培养的肿瘤细胞抑制作用较好,在测定浓度范围内剂量依赖关系良好;化合物3对Bel-7402、HeLa、HT1080、KB、A549、SGC-7901、Heps等7种肿瘤细胞株生长增殖均具有良好的抑制作用,IC50为11.61~18.73 mg.L-1;化合物1对除A549之外的6种肿瘤细胞株抑制作用良好,IC50为11.34~19.32 mg.L-1。结论化合物2~6和8为首次从皂角刺中分离;化合物1、3的抗肿瘤活性为皂角刺中首次发现。     

中药官桂的应用现状及其考证

目的研究中药官桂的应用现状及对其进行考证。方法采用性状鉴别法、显微鉴别法、薄层色谱法、高效液相色谱法对所收集的官桂样品进行鉴别,采用文献检索法进行官桂的相关考证。结果通过鉴别,官桂样品并不是同一品种,且有同一企业来源的两批官桂样品并不是同一品种的现象;通过考证,反映了官桂的来源复杂、标准规范不统一,临床上用的“官桂”与商品“官桂”并不相同。结论本研究首次通过实例报道了官桂的应用现状,结论是官桂的应用很混乱,同名异物现象很严重,应当加以重视,加强研究,争取统一其标准;相关企业要严格执行本地区有关官桂的地方标准,做到正本清源。     

飞蓬的化学成分研究

目的:研究飞蓬(Erigeron acer L.)全草的化学成分.方法:应用硅胶柱色谱法及制备型硅胶薄层色谱对其化学成分进行分离,并利用13C-NMR,1H-NMR和MS等方法鉴定分离得到的化合物.结果:从飞蓬的干燥全草中分离得到5个化合物,分别鉴定为α-香树脂醇(1)、β-香树脂醇(2)、咖啡酸(3)、槲皮素(4)、4′-羟基黄芩素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(5).结论:该5个化合物均为首次从飞蓬中分离得到.根据DEPT、HMQC、HMBC谱对化合物(5)的碳信号重新进行了归属,同时根据HMBC、HMQC、1H-1HCOSY谱首次归属了该化合物葡萄糖醛酸部分的2″～5″-H的信号.     

大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量的影响

目的:通过观察寒、热不同方剂对"病证结合"的消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量的影响,从药效学角度对该模型进行评价,并探讨其寒、热证的变化规律。方法:采用寒、热因素与消炎痛腹腔注射相结合,建立大鼠胃溃疡寒、热证动物模型,并比较寒热方剂对模型大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量的影响。结果:各模型组大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量显著升高,与空白组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);大黄黄连泻心汤可显著提升热性溃疡组大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量,理中丸可显著提升寒性溃疡组大鼠胃组织bFGF和血清VEGF含量(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄黄连泻心汤、理中丸可通过提升血清VEGF和胃组织bFGF含量,分别实现对热性和寒性模型大鼠胃黏膜的保护作用,是"方证相应"规律的体现,肯定了本实验所采用的胃溃疡"病证结合"造模方法确实可行。     

苓桂术甘汤配伍机制及药效物质基础研究

目的：研究《伤寒论》名方苓桂术甘汤（茯苓，桂枝，白术，甘草）的配伍机制及药效物质基础。确定方中各药味的君臣佐使关系和质量控制指标。方法：采用正交试验设计对方中组成药味进行药味与药量同时加减拆方。选择小鼠常压耐缺氧，对抗氯仿所致小鼠心律失常和利尿三项药理指标对所得16个处方进行药理实验；采用方差分析，逐步回归分析（SREG）与典型相关分析（CCOR）将所得药理数据和组方药味及药理相关联，探讨复方苓桂术甘汤的配伍机制；同时对各处方进行HPLC色谱指纹图谱研究。将所得药理数据和各指纹峰的峰面积（即各化合物的含量）相关联，探讨复方苓桂术甘汤的药效物质基础。并确定其质量控制指标。结果：确定了方中以茯苓为君。以桂枝为臣，佐以白术，使以甘草的配伍关系，与对该复方中药的传统诠释相一致；通过回归分析和相关分析从50个色谱峰中选取17个作为药效物质基础，其中桂皮酸，甘草酸和去氢土莫酸被确定为质量控制指标。结论：本研究为探讨复方中药的药效物质基础提供了有意义的尝试。     

土家药天珠散防治血管性痴呆的有效成分与作用机制研究

采用双侧颈总动脉永久结扎复制慢性低灌注型血管性痴呆大鼠模型,常规饲养60 d后灌胃给予天珠散0.1 g·kg^-1,给药体积0.02 mL·g^-1,连续3 d,制备含药血清;采用UPLC检测天珠散入血成分并推测其结构;使用Discovery Studio 3.5软件进行反向找靶,并将获得的潜在靶标基因在线提交DAVID数据库进行基因富集分析。该文共推断获得天珠散5个入血成分,鉴定其中4个成分为parishin B,parishin C,parishin,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷;经反向找靶,获得Fit value≥0.6的药效团模型861个,从KEGG,BIOCARTA获得经文献验证的信号通路Cytokine-cytokine receptor interaction,Apoptosis等 9条,提示天珠散改善血管性痴呆的药理作用与机制可能与上述入血成分及相关信号通路有关。对于少数民族传统经验方,在药效验证的前提下,综合采用血清药物化学、计算机辅助药物设计、系统生物学等技术,将有益于民族效验方物质基础、作用机制的快速发现。     

温中益气胶囊对幽门结扎型胃溃疡大鼠的治疗作用

目的： 研究温中益气胶囊对幽门结扎型胃溃疡大鼠的治疗作用以及对小鼠的抗炎、镇痛作用。 方法： 采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型。取清洁级健康SD大鼠60只,雌雄各半,随机分成空白组,模型组,阳性对照药三九胃泰颗粒组（3.69 g·kg^-1）,温中益气胶囊高、中、低剂量组（2.21,1.11,0.55 g·kg^-1）。每天ig给药1次,连续给药7 d,模型组和空白组给予等量蒸馏水。第5天给药后各组动物禁食不禁水48 h,末次给药后2 h麻醉,进行幽门结扎手术,缝合后直肠给药1次,禁食水。18 h后麻醉大鼠,颈总动脉取血。取全胃观察大鼠胃溃疡面积和溃疡指数,胃组织匀浆测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、H⁺-K⁺-ATP酶、生长抑素（SS）含量。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和热板刺激法进行抗炎和镇痛实验,测定小鼠耳肿胀度、抑制率及痛阈值的大小。分别取清洁级小鼠50只,随机分成空白组、阳性对照药三九胃泰颗粒组（5.19 g·kg^-1）、温中益气胶囊高、中、低剂量组（3.12,1.56,0.78 g·kg^-1）。 结果： 胃溃疡实验中,与空白组比较,模型组H⁺-K⁺-ATP酶活性和MDA含量显著增加（P<0.01）,SS和SOD活性显著降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,温中益气胶囊能显著减小大鼠胃溃疡面积和溃疡指数,降低H⁺-K⁺-ATP酶的活性和MDA含量并增加胃组织中SS和SOD水平（P<0.01,P<0.05）。抗炎、镇痛实验中,与空白组比较,温中益气胶囊能降低二甲苯致小鼠耳廓肿胀度,提高小鼠痛阈值（P<0.01或P<0.05）。 结论： 温中益气胶囊可能通过降低H⁺-K⁺-ATP酶活性和MDA含量、增强SOD活性、增加SS的含量来实现抗幽门结扎型胃溃疡作用,并具有明显的抗炎、镇痛作用。     

HPLC-ELSD法测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

目的:采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.方法:以乙腈-水为流动相梯度洗脱(0～12 min,乙腈19%→36%),Hypersil ODS柱(4.0 mm × 200mm,5 μm)为固定相,流速为1.0 mL·min-1,ELSD参数:漂移管温度45℃,载气流量1.5 L·min-1.结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的回收率分别为97.86%,96.24%和97.58%,RSD分别为1.36%,1.58%和1.13%(n=6).结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于三七止血胶囊的质量控制.