一种中药肾毒性成分体外检测方法的建立

通过常规方法培养可稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的HK-2细胞,应用Western blotting和荧光显微镜分析肾毒性药物阿米卡星对HK-2细胞GFP表达及荧光强度的影响。通过测算已知的4种中药肾毒性成分（汉防已碱、马兜铃酸、雷公藤甲素、芦荟大黄素）的IC₅₀和FC₅₀,分析两者的相关性。结果显示阿米卡星可诱发HK-2细胞内的荧光产生并在24 h内逐渐增强,GFP蛋白的表达在24 h时明显增加（与对照组比,P<0.01）。4种中药肾毒性成分的IC₅₀和FC₅₀之间具有良好的相关性。稳定表达GFP的HK-2细胞内的荧光强度的变化可以较好地反映细胞损伤程度。该方法的建立为中药成分的肾毒性的检测和早期预测提供了有力的工具。     

果蝇中枢神经元受体和离子通道电生理学研究进展

果蝇这个良好的实验材料使我们能将遗传学、分子生物学和电生理学等各种方法有机地结合起来 ,从而为研究无脊椎乃至脊椎动物神经元的信号转导、神经网络的信息加工及中枢神经系统活动规律等提供了一条捷径。自 2 0世纪 70年代以来 ,很多研究都致力于果蝇基因的克隆和DNA测序工作。然而 ,新近果蝇基因组序列测定的完成标志着对果蝇的研究已进入了后基因组时代 ,通过直接的生理学特别是电生理学方法去研究果蝇基因的生物学功能已成为当前的主要任务。本文综述果蝇中枢神经元受体和离子通道电生理学研究进展     

二甲双胍改善2型糖尿病合并舒张性心力衰竭患者心功能的临床研究

目的 研究二甲双胍对2型糖尿病合并舒张性心力衰竭患者心功能的影响.方法 采用单中心前瞻、随机、双盲对照研究,按随机数字表法将170例2型糖尿病合并舒张性心力衰竭患者分为二甲双胍组和对照组.对照组采用常规治疗;二甲双胍组在对照组治疗的基础上给予二甲双胍1 000 mg/d联合治疗.两组患者均在治疗前、治疗后3、6、9、12个月检测6 min步行距离(6MWT),超声心动图检测二尖瓣舒张早期最大血流速度/舒张晚期最大血流速度(E/A)、舒张早期E峰的减速时间(DT)、左室质量指数(LVMI),酶联免疫吸附试验检测血清脑钠肽前体氨末端(NT-proBNP)、生长分化因子(GDF-15)浓度.结果 随访12个月揭盲时,共失访12例,资料完整者158例,其中二甲双胍组80例,对照组78例.与治疗前相比,两组在治疗后3个月开始6-MWT增加而NT-proBNP明显下降(P＜0.05),对照组在治疗后9个月,二甲双胍组在治疗后6个月E/A、DT有明显下降(P＜0.05);与对照组相比,二甲双胍组在治疗后6个月开始6-MWT明显增加,治疗后9个月开始E/A、DT及NT-proBNP明显降低(P＜0.05).与治疗前相比,对照组在治疗后9个月开始LVMI、GDF-15明显降低(P＜0.05),而二甲双胍组LVMI在治疗后6个月,GDF-15在治疗后3个月开始明显降低(P＜0.05);与对照组比较,二甲双胍组在治疗后12个月开始LVMI明显降低(P＜0.05),GDF-15在治疗后6个月开始明显降低(P＜0.05).结论 二甲双胍可以通过增加2型糖尿病合并舒张性心力衰竭患者的左心室舒张早期的充盈量和改善左室重构程度而改善这类患者的心功能.     

氟桂利嗪联合阿司匹林治疗偏头痛

目的探讨氟桂利嗪联合阿司匹林治疗偏头痛的临床疗效。方法选取60例在2016年3月至2017年3月来我院接受治疗的偏头痛患者进行研究,将所有患者随机分为观察组以及对照组,每组30例,对照组予以单纯的氟桂利嗪治疗,观察组予以氟桂利嗪联合阿司匹林治疗,实验结束后,对两组患者头痛发作频次、头痛持续时间、头痛强度、血清hs-CRP水平以及不良反应发生率进行比较分析。结果观察组患者头痛发作频次、头痛持续时间、头痛强度、血清hs-CRP水平以及不良反应发生率明显低于对照组,P0.05。结论氟桂利嗪联合阿司匹林治疗偏头痛的疗效显著,可有效减少头痛发作频次,缩短头痛持续时间,降低头痛强度以及血清hs-CRP水平,还可减少不良反应发生率,值得临床广泛应用。     

梅毒螺旋体和淋菌混合感染3例报告

笔者从3例临床疑为梅毒病人的溃疡面印迹涂片行镀银染色找梅毒螺旋体,并同时做淋菌培养,真菌培养,血浆反应素环状卡片快速试验(rupid plasma reagin circle card test,RPR)。现将该3例早期梅毒和淋菌混合感染情况报告如下: 3例患者均为司机,年龄21—34岁,男性,其中2患者诉阴茎头及包皮溃疡4天,无痛无痒,尿时有针刺感而来院就诊。体查:2例阴茎头均有2个、冠状沟有1个约1.5×1.5cm~2溃疡,溃疡边缘质稍硬,溃疡面均有少许脓性分泌物。两侧腹股沟淋巴结肿大。     

临床实习对高职护生专业认同的影响

目的 通过分析临床实习对高职护生专业认同的影响,探讨如何提高高职护生对专业的认同,为专业教学提供依据.方法 采用随机抽样方法对我院2009级120名高职护生进行调查,评价护生在校期间（大二下学期）和进入临床实习后（实习后6个月）对专业的认同情况.结果 护生的专业价值现得分实习后高于实习前（P＜0.05）,专业期望得分实习后低于实习前（P＜0.05）;专业情感、专业意志、专业认识、专业技能得分与专业认同总分实习前后比较,无显著性差异（P＞0.05）.结论 临床实习可提高高职护生的专业价值观,降低专业期望.带教教师的工作态度、专业素养等对护生的专业认同有较大影响.     

小鼠BPI36-259抗菌蛋白在原核细胞中的表达及其抗血清的制备

目的采用原核表达系统获得小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白,免疫家兔制备目的蛋白特异性抗血清。方法利用生物信息学方法预测小鼠BPI功能片段,构建pUC57-muBPI1-281质粒;PCR扩增获得mu BPI36-259基因片段,构建pET28a-mu BPI36-259重组质粒;用IPTG诱导重组质粒转化的E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得以包涵体形式表达为主的mu BPI36-259目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得兔抗鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清;用间接ELISA法检测血清抗体特异性及其效价。结果成功构建了pET28a-mu BPI36-259重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)获得以包涵体表达形式为主的目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得小鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清(效价1∶10000)。结论在原核细胞中成功获得了以包涵体表达形式为主的抗菌蛋白,免疫家兔获得的特异性抗血清可用于小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白的检测。     

粪肠球菌和屎肠球菌临床分离株的毒力因子与耐药性分析

目的 检测临床分离肠球菌的耐药和毒力因子,比较粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性和毒力特征.方法 采用琼脂稀释法检测肠球菌对万古霉素(VAN)、四环素(TET)、环丙沙星(CIP)、红霉素(ERY)、复方新诺明(SMZ)、替考拉宁(TEC)、克林霉素(CLI)的耐药性;采用微量板测定肠球菌的生物膜形成能力;观察肠球菌的β溶血和明胶溶解结果,同时用PCR方法检测相应基因cylA和gelE.结果 粪肠球菌和屎肠球菌的耐药率分别为0%～100%和3.23%～96.77%,后者对环丙氟哌酸、红霉素的耐药程度高于前者.β溶血试验阳性率为19.23%,cylA基因阳性率为35.38%;明胶表型阳性率为21.54%,gelE阳性率为40.0%,其中有46.15%(12/26)阳性者未出现相应表型;生物膜形成检出率为36.92%;粪肠球菌3种毒力因子(表型和基因型)的阳性率均高于屎肠球菌.结论 屎肠球菌耐药率高于粪肠球菌,粪肠球菌毒力因子阳性率高于屎肠球菌.     

疡愈涂剂对人白细胞与血管内皮细胞黏附影响的分子机制

目的研究疡愈涂剂(YangYuTuJi,YYTJ)对白细胞与血管内皮细胞黏附影响的分子机制,探讨其促进皮肤创伤愈合的机制。方法用虎红染色法观察YYTJ高(132.5mg/L)、中(66.3mg/L)、低(33.2mg/L)浓度对中性粒细胞(polymorphonuclear,PMN)、人单核细胞(THP-1)与肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)黏附的影响,用荧光免疫细胞化学法观察YYTJ对HUVEC表面细胞间黏附分子-1(inter cell ularadhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和CD44表达的影响。结果 YYTJ和TNF共同作用HUVEC12h后,高浓度YYTJ能明显抑制HUVEC与PMN以及THP-1黏附(P<0.05),能明显抑制HUVEC表面ICAM-1和CD44表达(P<0.05)。中浓度YYTJ能明显抑制HUVEC表面VCAM-1和CD44表达(P<0.05,P<0.01)。低浓度YYTJ能明显降低HUVEC表面CD44表达(P<0.05)。结论疡愈涂剂通过降低TNF诱导的HUVEC表面黏附分子的表达,抑制白细胞与血管内皮细胞的黏附,从而抑制过度的炎性反应。     

下吸呼道感染者不动杆菌ESBLs耐药分析

目的分析引起下呼吸道感染的不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性菌的发生及对10种抗菌药物耐药情况。并对临床针对性治疗ESBLs耐药菌提出建议。方法采用全自动微生物分析仪鉴定细菌及用仪器法、双纸片协同试验法、标准纸片扩散确认法对下呼吸道感染标本中分离出的156株不动杆菌作ESBLs的检测，比较亚胺培南等10种抗菌药物对产ESBLs抗菌作用。结果产ESBLs耐药株占全部菌株的20．5％，其中鲍曼不动杆菌占56．2％，洛菲不动杆菌占25．0％。溶血不动杆菌占12．5％，醋酸钙不动杆菌占6．3％。亚胺培南对产ESBLs耐药菌表现出最强抗菌作用。结论不动杆菌对抗生素已产生多重耐药性，应注意不动杆菌所致下呼吸道感染。