研究性实验教学的探析

研究性实验教学是高等院校人才培养的重要手段,也是新型实验教学理念的具体体现.文章介绍了高等医学院校研究性实验教学内容及常用的几种教学模式,剖析了如何通过研究性实验项目的科学设计,激发学生的科研兴趣,活跃学生的思维,促进学生对综合知识的运用,以培养学生创新能力、实践能力及研究能力.可为实验教学内容和方法改革提供借鉴.     

多药耐药基因转染的CIK细胞耐药性研究

目的：将多药耐药基因（mdr1）转入CIK细胞,观察转染前后其对顺铂的耐药性及对Lewis肺癌细胞杀伤活性的影响。方法：常规方法培养CIK细胞,在细胞对数生长期,将mdr1的重组质粒转染CIK,通过RT—PCR鉴定耐药基因表达：M1Tr法检测CIK细胞对顺铂敏感性的变化。同时检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性变化;Western blot检测细胞中mdr1编码的P—gP蛋白表达的变化;通过计算瘤重抑制率（TWU检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用。结果：转染mdr1后的CIK细胞mdr1mRNA阳性,在转染后的CIK细胞中,P—gP的表达较转染前CIK细胞及转染空质粒的CIK细胞明显增高,差异有统计学意义（P〈0．05）,转染mdr1基因后的CIK细胞对顺铂的耐药性明显提高,转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性无明显变化（P〉0．05）。结论：将mdr1基因转入CIK细胞后,细胞获得了多药耐药性,同时保持了原有的对肿瘤细胞的杀伤活性。     

京尼平抑制高糖诱导的大鼠心肌H9c2细胞氧化应激及凋亡损伤

目的:探讨京尼平(genipin,GEN)对高糖损伤的大鼠心肌H9c2细胞的抗氧化作用和抑制细胞凋亡的机制。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,高浓度(50 mmol/L)葡萄糖处理H9c2细胞建立细胞损伤模型,分为正常糖对照组(NC组,葡萄糖浓度为5.6 mmol/L)、高糖损伤组(HG组,葡萄糖浓度为50 mmol/L)、正常糖+京尼平组(NC+GEN组)和高糖+京尼平组(HG+GEN组,京尼平浓度为10μmol/L)。CCK-8法检测细胞活力;酶标法和WST-1法分别测定细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;微板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;荧光探针DCF检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;ELISA法检测核小体片段的聚集值;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞内线粒体膜电位变化;利用Western blot法检测线粒体内抗氧化酶锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD),以及早期凋亡蛋白细胞色素C(Cyt C)、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:与HG组比较,HG+GEN组细胞活力显著升高(P 0.05),细胞内MDA的含量及细胞上清液中LDH的活性明显降低(P 0.05),细胞内SOD活性升高(P 0.05),细胞内线粒体膜电位明显升高(P 0.05),ROS水平降低(P 0.05),核小体片段聚集程度显著降低(P 0.05)。HG组线粒体内抗氧化酶Mn-SOD比NC组降低(P 0.05),但线粒体内凋亡蛋白Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平比NC组显著升高(P 0.05),而HG+GEN组与HG组相比,Mn-SOD升高(P 0.05),Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平显著降低(P 0.05)。结论:京尼平对高糖损伤的心肌H9c2细胞具有抗氧化保护作用和抑制细胞凋亡的作用。     

生物化学在线教学系统的构建

生物化学作为医学科学发展中的前沿学科,历来受到极大的重视。随着网络技术的进步与发展,结合生物化学的学科特点,开发了一整套网络在线辅助教学系统,突破了时空的界限,建立了以学习者为中心的教学模式,引导学生自主性地学习,培养学生的探索性与创新性,从而提高教学质量。     

肌肽对高糖诱导的H9c2细胞损伤的拮抗作用

 目的：探讨肌肽对高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的拮抗作用。方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2,细胞分为正常对照组、高糖损伤组和肌肽预保护组。MTT法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,并利用Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-8、caspase-9和caspase-3)活性片段的表达。结果：细胞存活率随着高糖刺激时间和高糖浓度的增加而逐渐降低,而肌肽预保护组细胞的存活率显著高于高糖处理组（P<0.05)。高糖组ROS水平比正常对照组明显增加（P<0.05),而肌肽预保护组与高糖组相比ROS水平降低（P<0.05)。高糖组caspase-8、caspase-9和caspase-3活性片段表达量比正常对照组显著升高(P<0.05),而肌肽预保护组与高糖组相比,caspase-9和caspase-3活性片段表达量显著降低（P<0.05),而活化caspase-8相对含量无明显变化（P>0.05)。结论：肌肽能够拮抗高糖诱导的H9c2心肌细胞氧化应激和凋亡损伤。     

血清总胆汁酸、胆固醇、AST/ALT比值与肝硬化Child-Pugh分级的关系

目的：探讨肝炎后肝硬化患者不同Child-Pugh分级与血清总胆汁酸（TBA）、胆固醇（CHO）、AST/ALT比值的相互关系。方法：选取临床诊断为肝炎后肝硬化患者76例,按Child-Pugh评分进行分级（A、B、C级）;对照组48例为健康体检者,并检测血清TBA、CHO、AST/ALT比值。结果：肝硬化组与对照组比较,血清TBA升高,血清CHO降低,AST/ALT比值升高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。肝硬化患者Child-Pugh分级A、B、C级之间比较,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论：肝硬化患者血清TBA、CHO、AST/ALT比值联合检测有助于肝硬化患者进行肝功能分级,并有助于评估肝功能受损程度。     

如何提高临床生物化学检验实验课教学质量

临床生物化学检验是医学检验专业的核心课程,专业性强,授课方法灵活、多样。实验教学是该课程教学的重要内容。要提高临床生物化学检验实验课教学质量就得改变以往旧的教学体制和教学内容,及时吸收新的科学技术和社会发展最新成果,提高学生的操作技能,培养学生的创新意识,为培养适合时代需要的新型检验人才打下良好的基础。