Rb基因导入对膀胱癌细胞生长的抑制作用

由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链Fv(ScFv)基因.表达制备ScFv片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过Linker基因序列连接并克隆至pIg20表达载体,表达制备抗人肺癌scFv融合蛋白.现报道如下.l 材料与方法1.1 抗人肺癌单克隆抗体3D_3(McAb3D_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体pIg20,以SmaⅠ,XbaⅠ分别双酶切VH及pIg20质粒,以粘末端方式,将SmaⅠ-VH-Xba片段连接到pIg20载体,连接产物电穿孔法转染BL21菌,筛选鉴定.阳性子命名为pIgVH.1.2 将McAb3D_3轻链可变区基因(VL)克隆至pIgVH,以BgLⅡ、NcoⅠ分别消化中pIgVH及VL,以粘     

高危险人群预防艾滋病性病综合干预研究

目的探讨在娱乐服务公共场所高危人群（服务小姐）中开展预防艾滋病性病的健康教育和综合干预的方法、效果及可行性。方法调查员深入现场，采用面对面的深入访谈与咨询，免费分发宣传资料和安全套，实施外展健康教育，增设安全套自动售套机，推广使用安全套，运用调查问卷和访谈方法，评价下预效果。结果干预前后分别调查145人和106人。通过干预，服务小姐艾滋病预防知识水平有显著提高，对安全套预防艾滋病经性传播的态度和信念有明显转变。在与固定和非固定性伴侣行为中，最近1次安全套的使用率分别为63．21％和98．11％。在与非固定性伴性行为中，最近1周和最近1个月每次都用安全套的比率分别由86．21％上升为96．23％、84．83％．上升为95．28％。结论在娱乐服务场所开展预防艾滋病性病的健康教育和综合干预足可行的而且是有效的。     

高脂喂养联合链脲佐菌素注射的糖尿病大鼠模型特征

目的观察高脂喂养联合低剂量STZ注射的SpragueDawley(SD)大鼠2型糖尿病模型的代谢特征、病理学以及胰岛分子生物学变化。方法4周龄雄性SD大鼠36只随机分为三组(1)正常对照组(Control)9只,普通饲料喂养。(2)高脂组(HighFatchow,HE)9只,高脂饲料喂养,为普通饲料中添加20%脂肪(猪油和蛋黄粉各50%)和20%蔗糖。(3)糖尿病组(DM)18只。喂养4周后腹腔注射STZ(40mg/kg)。所有大鼠做灌胃葡萄糖耐量(OGTT)试验。放免法测定血清胰岛素,免疫组化染色观察胰岛β细胞的形态学特点,彩色图像分析系统测定胰岛素表达量,RT-PCR测定胰腺β细胞胰岛素mRNA表达水平。结果糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素水平(FINS)显著高于Control组和HE组大鼠(P<0.01),空腹血清甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平显著高于Control组(P<0.05);胰岛β细胞吸光度(A)显著低于高脂组大鼠(P<0.05),降低11.6%。胰岛素免疫反应阳性区占胰岛百分比显著低于Control组和HE组,分别下降31.9%(P<0.05)和43.1%(P<0.01)。胰岛素mRNA表达水平显著低于HE组(P<0.05)。STZ注射后48h(基线值)大鼠FBG水平的分布情况为A组(FBG<10.0mmol/L)占7/18;B组(FBG10~19.9mmol/L)占5/18;C组(FBG≥20mmol/L)占6/18。STZ注射后9d的OGTT结果与基线值相比,B组OGTT值总体变化最小,A组FBG的变异最大,达到25%。结论高脂喂养联合低剂量STZ注射的糖尿病大鼠模型模拟2型糖尿病发生的主要病理生理过程,具有高血糖、高胰岛素血症以及血脂异常等基本特征。     

野生型p53基因对卵巢癌细胞株生长及凋亡的影响

目的 探讨野生型p53基因对卵巢癌细胞生长抑制及凋亡的作用，为卵巢癌的基因治疗提供实验依据。方法 构建野生型p53基因重组腺病毒载体、体外转染卵巢癌细胞株CaOV3；应用生化染色、免疫组化、聚合酶链技术，检测外源基因的转染率及表达效果；应用细胞计数、MTT法（四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法）、流式细胞术和TUNEL技术（TDL-mediated dUTP-hiotin end labeling)，检测细胞生长及凋亡的情况。结果 野生型p53基因重组腺病毒载体可以有效地转染卵巢癌细胞株CaOV3，转染后的CaOV3细胞内可以检测到p53基因的cDNA及p53蛋白的表达；转染后的CaOV3细胞生长受到明显抑制，63％的细胞生长停滞于G0／G1期，40％－50％的细胞TUNEL呈阳性。结论 野生型p53基因的导入，可抑制卵巢癌细胞的生长并诱导细胞凋亡。野生型p53基因导入可能成为今后临床基因治疗卵巢癌的可行性方法之一。     

Protective effect of apolipoprotein AⅠ,AⅡ,CⅠand CⅡ on endothelial cells injury induced by low density lipoprotein

ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡⅠ，ＡⅡ，ＣⅠａｎｄＣⅡｏｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＬｉＪｉａｎ黎健，ＪｉａｎｇＬｅｉ蒋雷ａｎｄＬｉｕＱｉｎ...     

内皮祖细胞与氧化应激

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是成熟内皮细胞的前体细胞,参与损伤组织的血管新生和再内皮化。研究表明,氧化应激能引起EPCs的数量减少和功能减弱。虽然EPCs存在抗氧化酶系统,但是当细胞正常的氧化还原稳态失衡时,活性氧过度产生而聚积,引起氧化应激,导致细胞的衰老或凋亡。     

HDL抑制人脐静脉内皮细胞NADPH氧化酶4表达和活性氧生成

目的分析HDL对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内NAD-PH氧化酶4(NADPH oxidase4,NOX4)及其亚组分p22phox、p67phox、Rac1与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,研究HDL对LDL的拮抗作用。方法用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养HUVEC;用RT-PCR、Western印迹观察NOX4、p22phox、p67phox、Rac1表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内ROS的变化。结果HDL处理HUVEC能下调NOX4和p67phox mRNA和蛋白水平,但不影响p22phox和Rac1的表达。高浓度LDL刺激HUVEC时,NOX4表达上调,细胞内ROS生成增加,但p22phox、p67phox和Rac1的表达没有明显变化。用HDL预处理再加高浓度LDL刺激时,NOX4表达下调,ROS生成量减少;结论HDL可通过下调HUVEC NOX4表达降低ROS水平。     

我国社区老年卫生服务的规范化健康管理

随着我国人口和健康发展战略的前移和下移以及医学模式的转变,社区卫生服务在医疗卫生领域的作用越来越显得重要和突出。世界卫生组织早在20世纪80年代就提出“社区承担卫生保健责任”的构想．充分表明社区卫生服务在全球卫生工作中的战略地位。社区卫生服务的目的是要把80％以上居民的健康问题解决在社区,为居民提供全程优质的健康管理的卫生服务。提高居民的整体健康水平和生活质量。其内容包括：健康教育、健康促进、老年保健、妇幼保健、卫生防疫、疾病的预防、诊治和康复、社区心理卫生和精神保健等。     

p53基因诱导胱癌细胞HTB9凋亡及相关基因的表达

目的 研究野生型p53基因诱导膀胱癌细胞凋亡的作用,及其对凋亡相关基因bcl-2、bax和ICE表达的调控。方法 将野生型p53基因重组腺病毒载体转染人膀胱癌细胞HTB9,应用RT－PCR检测bax的mRNA表达水平,应用免疫组化法检测bcl-2、bax和ICE蛋白表达水平,以DNA琼脂糖凝胶电泳、脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术（TUNEL）和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 野生型p53基因导入可诱导HTB9细胞凋亡,凋亡细胞百分率可达50．4％;bax mRNA和蛋白水平增高,ICE和Bcl-2蛋白水平分别增高和下降。结论 野生型p53基因很可能是通过调控凋亡相关基因ICE、Bax和Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡。     

新生儿5μg和10μg重组酵母乙型肝炎疫苗初免后抗体免疫应答比较

目的 比较新生儿接种5 μg和10 μg重组酵母乙型肝炎(乙肝)疫苗后抗-HBs血清应答状况.方法 以山东、江苏、上海、广西、北京5省(自治区、直辖市)为研究现场,采用5 μg重组啤酒酵母乙肝疫苗(HepB-SC)和l0μg重组汉逊酵母乙肝疫苗(HepB-HP),按照“0-1-6”免疫程序完成初免的7～ 12月龄健康婴儿.调查对象采用问卷调查并采集静脉血,应用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)定量检测抗-HBs.抗-HBs＜ 10 mIU/ml者采用CMIA检测HBsAg,HBsAg阴性者采用巢式PCR方法检测HBV-DNA.比较不同HepB初免后的抗体应答率和抗体水平,采用多因素分析方法确定HepB种类对抗体阳转率和抗体水平的影响.结果 共观察8947名5μgHepB-SC初免(5μg组)和4576名10 μg HepB-HP初免(10μg组)婴儿.5μg组无应答、低应答、正常应答和高应答率分别为1.88％、15.18％、61.42％和21.52％,10μg组分别为0.15％、2.16％、29.42％和68.26％;5 μg组无应答、低应答和正常应答率高于10μg组,高应答率低于10 μg组,各应答率之间差异均有统计学意义(P＜0.01).5 μg组和10μg组初免后抗-HBs几何平均浓度分别为354.81mIU/ml(95％CI:338.84～363.08 mIU/ml)和1778.28mIU/ml(95％CI:1698.24～1819.70mIU/ml),差异有统计学意义(F=4517.17,P＜0.001).多因素分析显示,排除采血月龄、性别、出生体重、早产、母亲分娩前HBsAg状态等因素影响,两种HepB初免后抗体阳性率和抗体水平的差异仍有统计学意义.结论 新生儿使用10 μg HepB-HP初免抗体应答优于5μg HepB-SC.