PLK1 及 STK15 基因在结肠癌细胞中的表达及其特异性抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响

目的 研究保罗样激酶1（polo-like kinase 1,PLK1）及丝氨酸/苏氨酸激酶15（serine/threonine kinase15,STK15）mRNA及其蛋白在结肠癌细胞中的表达,以及其特异性抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响。方法 选取人宫颈癌Hela细胞和人结肠癌HCT-116细胞、HT-29细胞及CACO-2细胞,以β-actin为内参照,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测PLK1 mRNA和STK15 mRNA的表达水平;采用Western blot法检测PLK1蛋白和STK15蛋白的表达水平;采用偶氮唑盐（MTT）法检测Dulbecco改良细胞培养基（DMEM培养基）、二甲基亚砜（DMSO）、SBE13（PLK1蛋白特异性抑制剂） 或VX-680 （STK15蛋白特异性抑制剂） 处理后4种癌细胞的增殖活性。结果 与Hela细胞比较,HCT-116细胞、HT-29细胞及CACO-2细胞的PLK1和STK15 mRNA及其蛋白的表达水平均较高（P＜0.05）。① Hela细胞：与DMEM组比较,SBE13组、VX-680组及SBE13＋VX-680组的增殖能力无明显变化（P＞0.05）。② HCT-116细胞和HT-29细胞：与DMEM组比较,VX-680组和SBE13＋VX-680组的增殖能力均降低（P＜0.05）,但SBE13组的差异无统计学意义（P＞0.05）。③ CACO-2细胞：与DMEM组比较,SBE13组、VX-680组及SBE13＋VX-680组的增殖能力均降低（P＜0.05）。结论 HCT-116、HT-29及CACO-2结肠癌细胞的PLK1 mRNA和STK15 mRNA及其蛋白的表达水平均高于Hela细胞,应用其特异性抑制剂可抑制部分结肠癌细胞系的生长。     

ＮＲＰ２表达抑制对结肠癌细胞ＬｏＶｏ移植瘤淋巴管生成和转移的影响

目的：探讨抑制Ｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎｓ-２（ＮＲＰ２）基因表达对结肠癌淋巴管生成和转移的影响。方法：采用ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉ）下调结肠癌ＬｏＶｏ细胞株ＮＲＰ２表达,接种ＮＲＰ２ＲＮＡｉ的ＬｏＶｏ细胞株于裸鼠,建立裸鼠结肠癌结肠原位移植瘤模型, 分别观察移植后４、６、８和１２周裸鼠结肠原位移植瘤淋巴管生成以及转移的情况。结果：成功建立结肠癌裸鼠原位移植瘤动物模型。下调结肠癌ＬｏＶｏ细胞株ＮＲＰ２表达能显著降低裸鼠结肠原位移植瘤的淋巴管密度以及远处转移。结论：抑制ＮＲＰ２表达可以抑制结肠癌的淋巴管生成和转移,它将是一个潜在的肿瘤治疗靶点。