p53基因表达在辐射诱导骨髓细胞凋亡和修复中作用研究

目的 探讨p53基因表达在辐射导的骨髓细胞凋亡和修复中的改变与作用。方法 经^60Coγ射线以5．5Gy全身辐射78只LACA小鼠。于照后4wk内分批活杀，将骨髓分别进行HE染色和超薄切片，并进行P53蛋白LSAB免疫组化染色和突变型p53(mtp53)cDNA-DNA原位杂交。结果 照射后小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象；照射后6h,造血细胞凋亡显著，并出现凋亡的典型改变；P53蛋白于造血细胞凋亡及修复时均明显增多，而mtp53DNA仅于修复期呈阳性。结论 p53基因表达与了辐射诱导的骨髓细胞凋亡和凋亡后的修复过程。     

FDP对微波辐射后大鼠海马COX表达的影响

目的探讨1, 6-二磷酸果糖(FDP)对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)表达的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为假辐射组(5只),辐射组(10只)和辐射+药物组(10只)。采用30mW/cm²微波辐射,辐射+药物组于辐射前3d 腹腔注射350mg/kg FDP,连续给药3或10d,1次/d。于辐射后6h和7d活杀取海马,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和图像分析检测大鼠海马组织COX亚基Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达,通过Western blot和图像分析检测大鼠海马组织COX Ⅰ蛋白表达变化。结果辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达均较假辐射组降低,药物组大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA与相应辐射组相比均见表达增加,以给药后3d(辐射后6h)组增加最为显著(t_{COX Ⅰ}=3.2205,t_{COX Ⅱ}=3.5762,t_{COX Ⅳ}=3.0408,P<0.05)。辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ蛋白表达均较假辐射组减少,给药后3d(辐射后6h)与辐射后6h相比COX Ⅰ蛋白表达升高(t=2.9614,P<0.05),给药后10d(辐射后7d)与辐射后7d相比改变不显著。结论FDP对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因COX表达降低有一定的促恢复作用。     

骨折端微动对骨形态发生蛋白-2表达的影响

目的 研究骨折端微动时轴向应力对骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法 72只新西兰大白兔分为微动组与固定组，利用免疫组化及原位杂交方法检测两组动物骨折端BMP-2蛋白及mRNA表达的不同。结果 BMP-2蛋白及mRNA表达于间质细胞、成骨细胞、成软骨细胞、骨细胞及骨基质。在骨折愈合过程早期高度表达，峰值位于骨折后14d，其后表达水平降低。BMP-2蛋白及mRNA染色阳性指数术后14、21、28d微动组大于固定组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 骨折端微动时BMP- 2蛋白及mRNA表达在特定时间增强。     

微波辐射对大鼠海马线粒体形态及能量代谢的影响

目的探讨微波辐射对大鼠海马线粒体形态及能量代谢的影响。方法采用30mW／cm^2微波辐射30只雄性Wiser大鼠，于辐射后6h、1d、3d和7d活杀取海马，采用电镜观察线粒体超微结构改变，酶活性染色显示线粒体ATP酶活性改变，分光光度计测定线粒体琥珀酸脱氢酶（succino denhydrogenase,SDH）、单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）活性，高效液相色谱测量线粒体腺苷酸含量的变化。结果30mW／cm^2微波辐射后6h，海马线粒体大小、形状不规则，辐射后1和3d线粒体损伤加重，出现肿胀、空化、嵴紊乱、短小、数量减少等改变。SDH活性和ATP含量在辐射后6h降低，3d降至最低（P〈0．01），7d呈恢复趋势。ATP酶和MAO活性变化一致，于辐射后1和3d活性升高最为显著（P〈0．01）。结论微波辐射可损伤大鼠海马线粒体结构与功能，使线粒体能量代谢酶异常。     

急性放射性皮肤溃疡形成早期应用生长因子的意义

目的探讨急性放射性皮肤溃疡形成早期b-FGF、VEGF及其受体的表达和意义。方法以50Gy60Coγ射线单次局部照射建立急性放射性皮肤溃疡动物模型,以手术方法建立单纯皮肤伤口动物模型,采用免疫组化、原位杂交等方法检测伤口及溃疡组织内b-FGF、VEGF及其受体的表达。结果创伤组伤后5～10d,肉芽组织内b-FGF、VEGF表达呈强阳性;照射后21～28d,放射性溃疡肉芽组织内b-FGF、VEGF表达呈阳性,但较创伤后5～10d明显减弱。结论辐射诱导的b-FGF、VEGF表达减弱与急性放射性皮肤溃疡愈合延迟有关。     

高场强电磁脉冲辐射对小鼠肝损伤效应的初步研究

目的　研究高场强电磁脉冲辐射对小鼠肝的损伤效应。方法　二级昆明小鼠 2 0 4只 ,分为对照组 ( 2 4只 )和辐射组 ( 180只 ) ,辐射组小鼠又根据照射剂量分为 8× 10 3 V/m、2× 10 4V/m和 6× 10 4V/m辐射亚组。对照组不作任何处理 ,辐射组采用高场强电磁脉冲 (EMP)源 ,分别对所有小鼠进行全身辐射 ,于辐射后 6h、1d、3d、7d、14d、1个月、3个月、6个月、9个月及 12个月观察不同场强电磁脉冲辐射对小鼠肝病理形态的影响 ,并与对照组 14d、3个月、6个月及 12个月进行比较。结果　辐射后小鼠肝病理改变呈进行性发展趋势 ,早期 ( 6h～ 3d)以肝实质细胞变性为主 ,中后期 ( 7d～ 1个月 )以肝细胞坏死为重 ,晚期 ( 3～ 12个月 )肝细胞增生活跃 ,可见非典型性增生与癌肿。结论　电磁辐射对小鼠肝具有损伤效应 ,尤其对肝实质细胞损伤严重 ,且远后效应显著。     

单纯和放射复合伤伤口愈合中循环血T淋巴细胞亚群的变化及其与愈合延迟的关系

目的：研究放射复合伤伤口愈合中循环血T淋巴细胞亚群的变化规律及其与愈合延迟的关系。方法：用免疫组织化学方法检测循环血T淋巴细胞亚群。结果：伤口区病理形成学观察表明,大剂量局部照射后能导致伤口愈合延迟;照射后白细胞数出现下降,伤后3-5日降低较为明显,显著低于单纯创伤组;伤后2组动物循环血T淋巴细胞及其亚群均出现降低,然而照射组始终低于单纯创伤组,致伤后28日仍然有显著性差别。结论：照射后循环血T淋巴细胞及其亚群的降低和白细胞数的下降是辐射延迟伤口愈合的重要原因。     

微波辐射对原代培养睾丸支持细胞的影响

目的 探讨微波辐射是否对原代培养睾丸支持细胞具有损伤效应.方法 建立原代培养睾丸支持细胞模型,经平均功率密度为30、100 mW/cm2微波辐射5 min,于辐射后6 h采用Annexin和V-PO双标、Fluo-3-AM荧光标记结合流式细胞术(FCM)和激光共聚焦显微镜(LSCM)检测支持细胞细胞周期、细胞凋亡坏死及胞内Ca2+含量的变化. 结果 30 mW/cm2微波辐射后6 h G0-G1和G2-M期细胞数明显减少(分别为62.57%±3.22%、8.25%±1.75%),S期细胞数明显增加(29.17%±4.87%),与对照组(分别为79.18%±0.24%、11.17%±0.50%、9.64%±0.62%)比较,差异有统汁学意义(P<0.05或P<0.01),但细胞凋亡和坏死率及胞内Ca2+含量无明显改变;而100 mW/cm2微波辐射后6 h G0-G1期支持细胞数明显增加(87.69%±1.32%),G2-M和S期细胞数明显减少(分别为7.41%±0.60%、4.87%±0.91%),与对照组的差异有统计学意义(P<0.01);胞内Ca2+含量及细胞凋亡坏死率明显增加,差异亦有统计学意义(P<0.05或P<0.01). 结论 100 mW/cm2微波辐射可引起培养支持细胞生长抑制及凋亡与坏死增加,胞内Ca2+升高是其损伤的重要机制.     

微波辐射对大鼠心脏窦房结功能的影响

目的观察微波辐射后大鼠心率、心电图(ECG)的动态变化特点,以反映微波辐射对心肌和窦房结功能的影响。方法采用0、5、10和50 mW/cm2的微波源辐射20只二级Wistar雄性大鼠,辐射时间为6 min,分别于辐射前、辐射后即刻、3 d、7 d、14 d、28 d、3 m、6 m采用多道生理记录仪检测大鼠心率和ECG变化。结果 5 mW/cm2组大鼠于辐射后6 m内心率和ECG未见明显异常;10和50 mW/cm2组大鼠心率呈辐射后即刻加快,3 m后减慢的双相改变趋势,且ECG于辐射后即刻出现窦性心律不齐及窦房结内游走性心律;50 mW/cm2组大鼠心电图P波振幅降低。结论 10～50 mW/cm2微波辐射可影响大鼠窦房结功能,且此影响与微波辐射剂量呈正相关。     

近似熵在微波辐射致猕猴脑损伤检测中的应用

目的基于近似熵与相对功率谱对微波辐射后猕猴脑电图进行分析,探讨应用近似熵衡量微波辐射对脑损伤程度的可行性。方法雄性猕猴15只,根据平均功率密度不同,随机分为假辐射组、2 mW/cm2、5 mW/cm2、7 mW/cm2、11 mW/cm2微波辐射组,采用BIOPAC公司生产的MP-150多导生理记录及分析系统,分别于辐射前及辐射后即刻、1 d、3 d、7 d、14 d和30 d,对猕猴脑电图(EEG)近似熵和δ、β频段相对功率谱进行检测。结果 (1)7 mW/cm2组近似熵于辐射后即刻明显下降,11 mW/cm2组近似熵于辐射后即刻、1 d和3 d明显下降。(2)7 mW/cm2组于辐射后即刻,δ频段相对功率谱显著升高,β频段相对功率谱明显下降;11 mW/cm2组于辐射后即刻、1 d和3 d,δ频段相对功率谱显著升高,而β频段相对功率谱则明显下降。(3)2 mW/cm2和5 mW/cm2组近似熵与相对功率谱于辐射后各时间点均未见明显变化。结论 (1)7 mW/cm2和11 mW/cm2微波辐射可引起猕猴脑电生理功能损伤,且与辐射剂量相关;(2)近似熵可客观反映微波辐射对脑功能的损伤,对其进行监测和预测,可望成为一个新的评价微波对脑损伤的敏感指标。