脑组织移植实验中的微血管新生与血管内皮细胞生存环境的研究

目的研究移植脑组织块内的微小血管的新生 ,探讨脑组织移植条件下微小血管内皮细胞生存的必要条件。方法用日本大耳白雄性成兔 ,1.2～1.5kg ,30只进行自体脑组织移植实验 ,3 %戊巴比妥钠静脉麻醉下施行自体脑组织移植手术。颅骨左右对称开骨窗 ,切取大脑皮质顶叶左右对称区域2mm×2mm×1mm脑组织 ,完全游离后 ,5s内迅速交换移植 ,移植组织中央插入标记物。术后10d再行开颅 ,使用微循环彩色摄像系统放大185倍 ,对移植脑组织内新生的微小血管进行画像解析 ,观测标记物周边有否新生血管及其形态特征。连同标记物一同切除左右移植区域的脑组织约2mm×2mm×1mm大小 ,迅速将标本放入20%甲醛溶液中固定 ,HE染色 ,制作蜡块 ,连同标记物一起制作切片。光镜下观察皮质颗粒层内神经细胞的形态 ,分析移植后神经细胞是否存活 ,是否有血管新生 ,血管形态与宿主血管的差异。新生血管内有否红细胞。为研究血管内皮细胞的生存条件 ,对人胎盘脐静脉血管内皮细胞进行培养。取胎盘脐带 (长度不小于20cm) ,放入无菌的营养液中 ,4℃保存运输 ,在1h内开始培养 ,把脐带放入无菌培养皿中 ,修剪丢弃损伤或血肿的组织,用无菌Hank's液反复冲洗去除污物。用缝合线将脐带静脉一端严密结扎 ,从另一端向脐静脉内灌注0.15%胰蛋白酶 ,再用H     

何首乌颗粒对亚急性衰老大鼠睾丸PCNA表达的影响

目的:观察何首乌颗粒(Heshouwu Granule,HG)对亚急性衰老大鼠睾丸PCNA表达的影响.方法:D-半乳糖(D-gal)连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型,检测HG灌胃前后模型大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞PCNA表达的变化情况.结果:D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸PCNA阳性细胞率明显下降,与正常大鼠比较差异显著(P<0.05,P<0.01);经HG灌胃后,二者均升高接近正常水平,与模型大鼠相比有明显差异(P<0.05,P<0.01).结论:HG可提高亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞PCNA表达水平,具有一定的延缓衰老作用.     

D-半乳糖衰老大鼠下丘脑弓状核超微结构的观察

目的:观察D-半乳糖衰老模型大鼠下丘脑弓状核超微结构的变化.方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,透射电镜下观察下丘脑弓状核超微结构的变化.结果:衰老模型大鼠下丘脑弓状核神经元出现线粒体嵴断裂、粗面内质网脱颗粒、高尔基体扩张等变化;另外,弓状核内的神经毡和部分突触也出现异常改变.结论:D-半乳糖可导致大鼠下丘脑弓状核超微结构发生明显改变,这可能是D-半乳糖致衰老的作用机制之一.     

酵母花环试验检测红细胞免疫功能的探讨

用自身血清及小鼠血清以酵母花环法检测了20名健康人红细胞免疫功能。结果发现自身血清致敏酵母R—C_3bR花环率(19.89±4.45)明显高于灭活自身血清致敏酵母R—C_3bR花环率(5.01±2.27),有非常显著差异(P<0.01),表明补体与RCIA密切相关。酵母花环法用小鼠血清恐不能确切地应补体缺乏个体的红细胞免疫状态,自身血清可能是较理想的补体源。本文还提出,用R—C_3bR花环率与R一IC花环率之和作为红细胞免疫功能的评价指标,较单用R—C_3bR花环率一个值更为准确,还对红细胞免疫功能低下的分类进行了初步探讨。     

干细胞因子基因cDNA克隆及其在造血干细胞中的表达

目的:克隆人干细胞因子基因cDNA,构建真核表达载体并转导脐带血造血干细胞,观察干细胞因子在造血干细胞中的表达,从而为脐血造血干细胞扩增及移植奠定实验基础。方法:实验于2005-09/12在承德医学院基础医学研究所和湖南师范大学医学院寄生虫病研究室完成。①实验材料:健康胎儿脐带由承德医学院附属医院提供,产妇均签署知情同意书;pcDNA3.1.大肠杆菌E.coliDH5α由本室保存;pUCm-T vector (promega公司);BamHⅠ,XbaⅠ(New England BioLabs公司):②实验方法:无菌收集胎儿脐带,胶原酶 胰蛋白酶 乙二胺四乙酸联合消化,分离培养人脐带内皮细胞。从上述含脐带内皮细胞的培养液中分离提取干细胞因子mRNA,用反转录-聚合酶链反应扩增干细胞因子cDNA.纯化的PCR产物与载体pUCm-T加入连接反应体系,构建及克隆pUCm-T/SCF质粒,其与pcDNA3.1分别进行BamHⅠ、XbaⅠ双酶切反应,产物经琼脂糖凝胶电泳后回收干细胞因子cDNA和pcDNA3.1片段,构建真核表达型载体pcDNA3.1/SCF。以密度梯度法 免疫磁珠法分离收集人脐血CD34~ 造血干细胞.导入pcDNA3.1/SCF,设立未转导对照组。③实验评估:转导后1～7 d检测两组细胞上清液中干细胞因子水平的表达。结果:①人于细胞因子基因cDNA克隆:扩增的人干细胞因子基因cDNA理论上应为690 bp,实际PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,紫外线下可见-预期大小的条带,证明干细胞因子mRNA提取成功,反转录合成的cDNA完整。②分泌型真核表达质粒pcDNA3.1/SCF的构建:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后电泳可见690 bp的插入片段,与干细胞因子基因序列相同,表明分泌型真核表达质粒pcDNA3.1/SCF构建成功。③脐血造血干细胞培养上清中的干细胞因子水平:培养第1～7天.转导pcDNA3.1/SCF的脐血造血干细胞上清中的干细胞因子表达水平均明显高于未转导对照组(P<0.01)。结论:成功克隆人干细胞因子基因cDNA,并构建了重组质粒pcDNA3.1/SCF,该质粒转导脐血造血干细胞后.能在短期内有效表达。     

64层螺旋CTA在颅内动脉瘤及血管畸形诊断中的临床应用

目的 探讨运用CT血管造影（CTA）诊断颅内动脉瘤及血管畸形诊断及治疗中的应用价值.方法 对30例原发性蛛网膜下腔出血的患者,进行CTA检查和DSA检查,CTA后处理采用多平面重建（MPR）,最大密度投影（MIR）,容积再现（VR）,DSA常规摄正、侧位、双斜位片.明确诊断后,行介入夹闭术或介入治疗,并术后复查.结果 CTA与DSA的诊断符合率达95%以上,30例病人33个动脉瘤和2个血管动静脉畸形.结论 CTA具有简便、快速、安全可靠的优点,在动脉瘤破裂急性期引起的蛛网膜下腔出血可单独作为诊断依据.指导手术治疗,并可以为确诊检查.     

十二导联穿戴式心电设备院前诊断室上性心动过速的回顾性研究

目的 探索十二导联穿戴式心电设备对于室上性心动过速(supraventricular tachycardia,SVT)院前诊断的应用价值.方法 选取2017年4月 ～2021年8月使用十二导联可穿戴式心电设备后诊断为室上性心动过速的356例患者,根据穿戴式心电图初步辨别SVT机制为房室结折返性心动过速(atrioven...     

神经肽Y、瘦素在Ⅱ型糖尿病大鼠垂体中的表达及丝胶的保护作用

目的:观察丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠垂体神经肽Y(NPY)和瘦素(leptin)表达的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、丝胶组和二甲双胍组.模型组、丝胶组和二甲双胍组均建立链脲佐菌素致Ⅱ型糖尿病模型,以血糖≥16.7 mmol/L为成模标准;丝胶组和二甲双胍组分别于成模后给予丝胶和二甲双胍灌胃35 d.采用酶法检测各组大鼠血糖、免疫组织化学显色和RT PCR观察各组大鼠垂体NPY和瘦素及mRNA的表达.结果:与模型大鼠相比,丝胶组和二甲双胍组大鼠血糖、NPY和瘦素及mRNA表达明显降低,且两组比较无明显差别.结论:丝胶可下调垂体NPY和瘦素的高表达,对Ⅱ型糖尿病垂体损伤具有保护作用;且作用与二甲双胍相当.