光动力灭菌研究进展

细菌引起的感染是临床上常见的问题,尤其是抗生素耐药菌的出现给医疗卫生工作带来了严峻考验。光动力疗法是治疗肿瘤、血管性疾病的一种新的方法。目前的研究表明光动力疗法可以有效杀伤致病菌,为治疗感染性疾病提供了一种新的思路。本文为光动力灭菌影响因素、其作用位点方面研究进展的综述。随着新型光敏剂的不断开发、光动力影响因素研究的深入、光动力治疗方法的不断成熟,光动力灭菌将具有广阔的应用前景。     

两种新型竹红菌乙素衍生物在人胃腺癌BGC-823细胞中吸收规律的研究

目的探讨两种新型光敏剂5-氨基-1-戊磺酸竹红菌乙素衍生物（PENSHB）和15位脱乙酰基13位3-氨基-1-丙磺酸竹红菌乙素衍生物（DPROHB）在人胃腺癌BGC-823细胞中的吸收规律。方法以浓度为4μM的PENSHB、DPROHB对人胃腺癌BGC-823细胞分别孵育0、0.5、1、2、4和8 h,用荧光分析法测定细胞内光敏剂含量,通过浓度-荧光强度标准曲线换算成光敏剂浓度,绘制每种光敏剂的孵育时间-细胞含量的关系曲线。以浓度为0.5、1、2、4和8μM的两种光敏剂分别孵育BGC-823细胞4 h后,测定细胞内荧光强度,绘制光敏剂的孵育浓度-细胞含量关系曲线。结果 BGC-823细胞对PENSHB和DPROHB的吸收含量随孵育时间的延长而增加,两者变化趋势相近,孵育1 h内细胞吸两种新型光敏剂收含量增加较快,4 h达到平台。在本实验的浓度范围内PENSHB和DPROHB的细胞吸收量随孵育浓度的增高而增加,基本呈线性关系,上升趋势相似。两者在细胞内的吸收含量依赖孵育时间及孵育浓度。结论两种新型竹红菌乙素衍生物PENSHB和DPROHB在提高水溶性及光动力效应的同时,细胞吸收特性良好,是有潜在应用前景的新型光敏剂。     

578.2nm激光照射对视网膜功能学损伤的研究

目的从功能学的角度研究激光照射后视网膜功能的改变。方法健康灰兔6只共12只眼,按照激光进入眼底的功率密度分为正常组,阈值下组和阈值上组,每组4只兔眼。应用波长578.2 nm、脉宽20～40 ns的脉冲铜蒸汽激光照射兔眼底视乳头下方的后极部,照光时间100 s,眼底光斑直径2 mm。照光后1周用视觉电生理仪采集视网膜电图(electroretinogram,ERG),判定激光对视网膜功能学的损害。结果暗视ERG中,阈值上组和阈值下组的Ab(uv)与正常组相比存在显著差异;暗适应最大电反应中,阈值上组与正常组的Ab(uv)差异显著,阈值下组与正常组的La(ms)差异显著。结论低于损伤阈值剂量的激光照射视网膜出现视网膜功能的改变。     

光动力疗法中组织氧的测量技术

光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）是一种联合利用光敏剂、光和氧,通过光动力反应选择性地治疗疾病的靶向疗法。氧作为PDT的关键要素之一,直接决定毒性物质单态氧和其他活性氧的产量,进而影响PDT的疗效。PDT中组织氧的在体和实时监测是一个具有挑战性的技术难题,在过去的20年中,基于不同原理的各种组织氧的测量技术被相继开发和应用。笔者在阐述PDT中氧的作用机制基础上,详细讨论组织氧的直接和间接测量技术,分析各种测量技术的优点和局限性,展望组织氧测量技术在优化PDT治疗方案和评估疗效中的应用,简要评述面临的技术挑战。     

HMME-PDT对原代培养瘢痕成纤维细胞中Cyc表达的影响

目的观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSF)中细胞色素C(cytochrome C,Cyc)表达的影响。方法采用组织块法原代培养瘢痕组织来源的成纤维细胞,建立HSF的传代细胞系,实验用第4～6代细胞。取对数生长期的HSF细胞,分为对照组和HMME-PDT组,其中HMME-PDT组的处理方法为培养的HSF与4μg/ml的HMME避光孵育3h,PDT治疗采用波长为630nm的激光,功率密度10mW/cm2,能量密度2.5J/cm2,两组细胞爬片细胞经固定、打孔后加入Cyc(1∶50)抗体以及FITC标记的二抗(1∶100),荧光显微镜下观察Cyc的荧光强度。用PI单染后经FCM检测细胞凋亡率。每标本计数105个细胞,实验重复5次。结果对照组HSF的细胞浆中Cyc-FITC荧光微弱,PDT组荧光显著增强;PI染色分析表明对照组凋亡率低(2.45±0.22%),PDT组的凋亡率显著升高(30.54±3.78%),二者相比差异有显著意义(P0.05)。结论光动力治疗后导致的线粒体功能障碍可能在瘢痕成纤维细胞凋亡中发挥了重要作用。     

竹红菌乙素衍生物对小鼠S180肉瘤杀伤效应的研究

目的:观察新型光敏剂5-氨基-1-戊磺酸取代竹红菌乙素衍生物(PENSHB)对小鼠S180肉瘤动物模型的光动力杀伤作用,评价其对在体肿瘤的杀伤效应。方法:昆明小鼠双侧胸皮下接种S180肉瘤腹水瘤液,得到肿瘤模型。实验分为3组,每组6只小鼠。对照组(不作PDT处理);PENSHB1h组(5mg/kg,给药1h后照光);PENSHB6h组(5mg/kg,给药6h后照光)。尾静脉给药,     

Nd∶YAG激光照射大鼠皮肤组织的温度实验

目的验证激光与组织光热效应预示模型和计算结果,考查激光功率密度和照射时间与组织温度和损伤的定量关系,获得组织热效应的温度数据。方法连续Nd∶YAG激光照射活体皮肤组织,组织为全身麻醉状态下大鼠腹部皮肤,每次实验同时测量三路信号:表面照射点辐射温度、皮下1mm的内部温度和环境温度。为了获得不同条件下的温度数据,根据照射功率和时间进行分组。结果得到连续Nd∶YAG激光相同照射时间(t=1s)时不同功率(P=2、3、4、5W)、相同功率(P=5W)时不同照射时间(t=0·5、0·8、1·0s)以及照射功率较高时(t=0·5s,P=5、10、15W)的大鼠皮肤组织皮下1mm的温度。温度随着功率和照射时间的增加相应升高,温度响应形状相似,温度上升时间与照射时间相关。结论Nd∶YAG激光表面辐射温度远远低于皮下温度,对热效应研究意义不大。热电偶所测内部温度能够很好地反映激光功率、照射时间的变化,可用来验证相关模型和数值模拟结果。     

510nm激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的初步研究

为了探讨用激光防治血管成形术后再狭窄的可能性，以５１０ｎｍ激光照射体外培养的血管平滑肌细胞，以ＤＮＡ片断末端标记法观察细胞凋亡现象。结果显示，５０和７５Ｊ／ｃｍ２照射后４小时ＳＭＣ出现凋亡现象，２４小时凋亡最为显著，凋亡率分别为９．４％和６．１％。表明激光直接照射能引起平滑肌细胞凋亡。这可能有益于减轻血管内膜的增厚程度