5-杂氮-2'-脱氧胞苷对卵巢癌HO8910细胞WWOX基因甲基化状态及其生物学行为的影响

目的:检测卵巢癌HO8910细胞株中WWOX基因甲基化状态,探讨5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对WWOX基因甲基化状态及其对HO8910细胞株生物学行为的影响。方法:将HO8910细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测两组细胞WWOX基因甲基化状态;蛋白印迹法检测两组细胞WWOX蛋白的表达。体外实验:分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、体外侵袭实验及流式细胞仪等分析5-Aza-CdR对HO8910细胞生物学活性的影响。体内实验:用处理前后的HO8910细胞株分别接种于BALB/c裸鼠腹腔,观察两组裸鼠的生存时间及肿瘤生长情况,并采用Western blot分别检测两组裸鼠肿瘤组织中WWOX蛋白的表达。结果:(1)WWOX基因在HO8910细胞株中呈甲基化状态,经5-Aza-CdR处理后呈去甲基化状态。(2)Western blot检测结果显示,5-Aza-CdR处理组WWOX蛋白表达水平高于对照组(0.71±0.023 vs 0.13±0.012,P<0.05)。(3)5-Aza-CdR处理组各时间点的细胞增殖能力较对照组下降(P<0.05)。(4)体外侵袭实验显示,5-Aza-CdR处理组穿膜细胞数较对照组少(92.2±4.7 vs 172.1±5.2,P<0.05)。(5)流式细胞检测显示5-Aza-CdR处理组中67.13%的细胞阻滞于G0/G1期,较对照组高(21.52%,P<0.05)。(6)裸鼠体内实验表明,5-Aza-CdR处理组裸鼠体内的致瘤能力明显低于对照组,且5-Aza-CdR处理组WWOX蛋白表达水平明显高于对照组(0.65±0.031 vs 0.25±0.047,P<0.05)。结论:5-Aza-CdR能逆转HO8910细胞WWOX基因甲基化状态,并抑制细胞增殖。     

读片窗

患者男,23岁.因"血压高9年伴间断多汗、头痛、视物模糊"入院.体验:血压220/130mmHg(1mmHg=0.133kPa).     

极低出生体重儿液体平衡管理中的护理干预分析

随着新生儿监护病房(NICU)的监护设备及治疗手段不断完善,极低出生体重儿(VLBWI)存活率逐年显著提高,由于VLBWI体内各脏器功能不成熟,易发生各种并发症.VLBWI是指出生体重<1 500 g的新生儿.胎儿肺内充满液体,皮肤呈透明状,缺乏角质层,尿量多,肾浓缩功能确有限,出生后突然由液体环境进入气体环境,机体必须作出快速调整,以适应这一变化.     

大鼠脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子-α与脑水肿的相关性研究

目的 探讨脑缺血再灌注后缺血脑组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与脑梗死组织水肿的关系.方法 SD大鼠随机分为脑缺血再灌注组(n=44)和假手术组(n=40).应用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2 h后再灌注模型,分别在再灌注后6 h、24 h、3 d、7 d通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法确定梗死灶大小,采用干、湿重法检测脑组织水含量评价脑水肿程度,以酶联免疫吸附法测定缺血脑组织TNF-α含量.结果 缺血脑组织TNF-α含量在再灌注6 h即升高,为(445.8±91.7)pg/ml,3 d达高峰,为(715.5±121.3)pg/ml,与假手术组和其他时间点比较均有显著差异(P均＜0.001),此后逐渐下降,7 d时仍显著高于假手术组[(478.1±145.5)pg/ml对(148.5±101.7)pg/ml,P＜0.005];脑组织水含量的起始变化滞后于TNF-α含量的增高,脑缺血再灌注24 h才显著增高(P＜0.001),3 d达高峰(P＜0.001),7 d时仍高于对照组(P＜0.05);脑梗死体积演变与TNF-α水平变化一致.结论 TNF-α与大鼠脑缺血再灌注后脑水肿和梗死体积变化有关,对脑组织有损害作用.     

线粒体钙离子单向转运体对脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响

目的 研究线粒体钙离子单向转运体(MCU)对脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响,探讨MCU作为治疗胶质瘤新靶点的可能性。方法 Western印迹法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤干细胞(T456,T4121,T387和T3832)和胶质瘤细胞(U87和U251)中MCU蛋白和mRNA表达水平。构建短发夹RNA干涉阴性对照(shNT)、shMCU#1和shMCU#2质粒,利用磷酸钙转染法包装病毒,转染上述4种胶质瘤干细胞,分别获得该4种细胞的shNT、shMCU#1和shMCU#2细胞,并用RT-qPCR检测MCU敲低效果。将上述转染的细胞接种到96孔板中,于培养第0,2,4和6天用CellTiter-Glo?Luminescent细胞活力检测试剂盒检测细胞活力;第6天用成像显微镜观察每孔形成肿瘤球的大小并计数。用MCU抑制剂DS16570511 25和50μmol·L^-1处理脑胶质瘤干细胞(T456和T4121)、人神经干细胞(16157)和人星形胶质细胞(NHA),同时设溶剂对照(0.1%DMSO)组,于培养第0,2,4和6天检测细胞活力,第6...     

适应性支持通气加肺复张在颅脑损伤合并急性呼吸窘迫综合征患者中的应用

目的 观察适应性支持通气加肺复张在颅脑损伤合并急性呼吸窘迫综合征（ ARDS） 患者中的应用价值。方法 颅脑损伤合并ARDS 患者30 例, 男18 例, 女12 例; 年龄15 ～76 岁, 先运用同步间歇指令通气（ SIMV） 模式, 设置潮气量（ VT） 为8 mL/kg, 呼吸末正压（ PEEP） 为0, 吸入氧浓度为60% 。以上模式维持8 h 后随机在SIMV ＋ 压力支持通气（ PSV） 及辅助自主呼吸（ ASV） ＋ 肺复张策略（ LRM） 中选择一种模式继续通气, ASV 的分钟通气量设置应与SIMV 的相同。通气时每一模式按0、5 及10 cm H2O 依次增加PEEP 水平, 每一PEEP水平的通气时间为60 min。4 h 后换为另一种通气模式, 仍按0、5 及10 cmH2O 设置PEEP, 每一PEEP水平的通气时间仍为60 min。其中使用ASV模式时加用LRM, 即每一PEEP 水平通气开始时短时间使用高水平压力控制通气（ PCV） , 压力设为40 cmH2O, 屏气时间持续30 s, 然后转为ASV 模式, 每个PEEP 水平通气50 min 时, 记录两组的血气、呼吸力学、血流动力学、颅内压等指标。结果 与SIMV 模式相比, 在同一PEEP 下ASV 模式时呼吸频率、气道峰值压（ PIP, 不包括在短时间使用LRM） 、平台压（ Pplat） 和肺内分流（ Qs/Qt） 、中心静脉压、颅内压均显著下降（ P 〈0. 05） , 氧合指数（ PaO2 /FiO2 ） 和氧分压（ PaO2 ） 增加（ P 〈 0. 05） 。两种通气模式的血流动力学数值比较差异无统计学意义（ P 〉 0. 05） 。结论 与传统的SIMV 模式相比,ASV ＋ LRM模式更有利颅脑损伤合并ARDS 患者的通气治疗。     

重症监护病房呼吸机相关性肺炎病原学以及耐药性分析

目的:探讨重症监护病房呼吸机相关性肺炎病原学以及耐药性.方法:对我院2007年2月-2011年7月ICU内出现呼吸机相关性肺炎的患者99例作为研究对象,并对取痰液标本进行病原学以及耐药性分析.结果:革兰阴性菌的检出明显高于其他菌属,在G-杆菌中铜绿假单胞菌以及大肠埃希菌最为常见,G+球菌中以金黄色葡萄球菌以及肺炎链球菌最为常见；所有菌属均对常规抗菌药物有一定的耐药性,但其对万古霉素的敏感性仍然较高.结论:加强对ICU呼吸机相关肺炎进行分离致病菌并对其进行耐药性检测,以指导合理使用抗菌药物,有助于改善患者预后.     

心脏及下肢深静脉联合超声检查在肺动脉栓塞诊断中价值

目的 探讨心脏及下肢深静脉联合多普勒超声动态观察在肺动脉栓塞诊断中的应用价值.方法 对49例临床怀疑肺动脉栓塞的患者进行检查,通过彩色多普勒超声动态观察测量右房、右室、主肺动脉及左右肺动脉分叉处、下腔静脉、下肢静脉等处有无血栓回声及血栓所致心腔间接征象.结果 49例临床怀疑肺动脉栓塞患者中,确诊为急性肺动脉栓塞7例、慢性肺动脉栓塞23例.彩色多普勒超声表现的直接征象肺动脉血栓,下肢静脉血栓,间接征象右房室腔增大、肺动脉扩张、三尖瓣返流、肺动脉高压等.结论 超声检查通过直接或间接征象可明确诊断肺动脉栓塞,尤其适合于具有高危临床症状患者的筛查.两者相互补充、相互结合应用才能全面评价和准确诊断肺动脉栓塞.