HCN4基因体外转染大鼠MSCs建立起搏离子通道

目的：通过构建HCN4腺病毒载体,以大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）为基因转染的平台,观察HCN4外源基因对MSCs转染效果及其功能表达。方法：携带HCN4腺病毒载体体外转染MSCs,测定转染效率,免疫荧光法测定HCN4蛋白表达,膜片钳全细胞记录If电流。结果：携带HCN4腺病毒载体体外转染MSCs后可检测到HCN4蛋白及If电流表达。结论：携带HCN4腺病毒载体转染大鼠MSCs后可使MSCs表达HCN4蛋白及If电流,可为生物心脏起搏治疗提供合适的靶基因及种子细胞。     

非ST段抬高急性心肌梗死的临床特点及治疗现状

目的 探讨非ST段抬高急性心肌梗死（non-ST-segment elevation acute myocardial infarction,NSTEAMI）的临床特点及治疗现状。方法 回顾分析我院急性心肌梗死300例的临床资料,根据心电图有或无ST段抬高分为两组,对比分析其临床特点和治疗情况。结果 NSTEAMI病人的发病年龄大、女性比例高、静息性胸痛和心律失常的发生率低（P〈0．01）;NSTEAMI病人血中肌钙蛋白I阳性率、肌钙蛋白T、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶的水平低（P〈0．01或P〈0．05）;两组病人冠状动脉病变的Gensini评分、单支、双支和多支病变之间的差异无统计学意义（P〉0．05）：NSTEAMI病人接受血运重建和抗血小板药物的比例低（P〈0．01）。结论 NSTEAMI病人发病年龄大,女性比例高,胸痛和心律失常发生率低,血中心肌损伤标记物水平低,冠状动脉病变程度与ST段抬高急性心肌梗死病人差异无统计学意义。     

剂量指数结合头围在儿童头颅低剂量CT检查的应用

目的 探讨剂量指数(DRI)结合头围在降低儿童头颅CT检查辐射剂量的可行性.方法 将行头颅CT检查的300例患儿依据其头围进行分组,头围≤450 mm为A组,450 mm＜头围≤500 mm为B组,头围＞500mm为C组;三组患儿分别采用随机数表法再分为若干亚组,各亚组分别依次选取27、26、25、24、23、22等6...     

65例产后出血的防治体会

产后出血是产科常见的并发症，在世界范围内仍是产妇死亡的主要原因，在我国仍居首位。所以正确掌握产后出血的处理和预防，对我国育龄妇女的健康尤为重要。现将我院1999—2000年间65例产后出血的情况总结如下，以进一步探讨产后出血的防治措施。     

两种钙磷材料表面壳聚糖修饰对人牙髓干细胞黏附和增殖的影响

目的探讨羟基磷灰石-磷酸三钙(HA-TCP)和煅烧骨(CBB)两种材料表面壳聚糖(CS)修饰,对人牙髓干细胞黏附和增殖力的影响。方法采用壳聚糖通过物理化学方法修饰两种钙磷材料表面,然后随机分CBB、CBB+CS、HA-TCP、HA-TCP+CS四组接种人牙髓干细胞,通过细胞计数检测其黏附率和增殖量;MTT法检测不同接种时间细胞增殖力变化;扫描电镜观察材料表面形态、细胞黏附、增殖和基质分泌状况。结果细胞接种5d,细胞计数、增殖力检测和扫描电镜均显示壳聚糖修饰组材料表面的细胞黏附率、增殖活力和细胞数量、状况、基质分泌均显著高于未修饰组(P<0.01)。未修饰组细胞黏附率和增殖力检测,HA-TCP组均高于CBB组(P<0.05或P<0.01)。两种材料壳聚糖修饰后细胞黏附率CBB+CS组较高,而5d增殖力HA-TCP+CS组较高,细胞生长状态和基质分泌两组无显著差异。结论两种钙磷材料表面壳聚糖修饰均能显著促进人牙髓干细胞的黏附和增殖,均可作为人牙髓干细胞良好的支架材料用于组织工程化牙本质牙髓复合体的构建。     

右心室快速起搏致心力衰竭犬的心室电生理特性

目的: 研究右心室快速起搏致充血性心力衰竭(CHF)犬心室电生理特性。方法： 16只犬随机分为正常对照组（n=7）和CHF组（n=9），应用右心室快速起搏（240 pulse·min^-1）4-5周制作CHF犬模型，应用心脏电刺激和单相动作电位（MAP）记录技术测定心室生理指标。结果： （1）CHF组心室有效不应期、心室MAP时程、复极后期及传导时间均延长，分别延长26%（P<0.01）、43%（P<0.01）、318%（P<0.05）和19%（P<0.01）；（2）CHF组心室有效不应期与MAP时程的比值减小13%（P<0.05）；（3）CHF组兴奋恢复时间离散性增加185%（P<0.01）；（4）CHF组室颤阈值降低48%（P<0.01）。结论： CHF异常的心室电生理特性可能是导致恶性心律失常及心脏性猝死发生的基础。     

NF-κB在卵巢癌顺铂耐药株COC1/DDP中的表达及意义

目的 探讨NF-κ B在卵巢癌COC1/DDP顺铂耐药中的生物学作用.方法 应用Westernblot法检测COC1、COC1/DDP两细胞株细胞核内NF-κ B p65蛋白表达差异.结果 COC1/DDP细胞核内NF-κ B p65蛋白表达明显高于亲本株COC1.结论 COC1/DDP对顺铂耐药可能与NF-κ B核内活化表达有关.     

重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体基因腺相关病毒血 清型2/1杂合载体的构建及其在HepG2肝细胞的表达

 【目的】 构建含绿色荧光蛋白(EGFP)重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体(SR-BI)基因腺相关病毒(rAAV)2/1杂合载体,观察其在HepG2肝细胞的表达&#65377;【方法】以pCMV.SPORT6-SR-BI质粒为模板PCR扩增目的基因cDNA,将其克隆至pSNAV2.0-IRES-EGFP-LacZa载体中,经酶切及测序鉴定后,脂质体介导转染BHK21细胞,经G418筛选得到含SR-BI基因的BHK/SR-BI-IRES-EGFP载体细胞株,用携带rep2-cap1基因的辅助病毒(rHsv/r2cl)感染该细胞株&#65377;通过细胞孵育&#65380;裂解和病毒纯化,得到杂合载体rAAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP病毒&#65377;免疫荧光显微镜检测绿色荧光表达,计算转染效率,Western Blot检测转染后SR-BI蛋白的表达&#65377; 【结果】 酶切鉴定表明pSNAV2.0-SR-BI-IRES-EGFP重组成功,基因测序显示装入pSNAV2.0-IRES-EGFP-LacZa质粒中的SR-BI基因正确;成功构建了rAAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP病毒载体&#65377;转染HepG2肝细胞后免疫荧光显微镜检测最佳MOI值为1 × 105时, 以此值转染HepG2肝细胞荧光高效表达; Western Blot检测未转染组及rAAV2/1-IRES-EGFP组HepG2肝细胞均有SR-BI蛋白表达,rAAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP组SR-BI蛋白表达水平较rAAV2/1-IRES-EGFP组及未转染组显著增加&#65377;【结论】 成功构建了rAAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP杂合载体系统,转染后SR-BI蛋白在HepG2肝细胞高效表达,为SR-BI生理学作用机制及临床应用的深入研究奠定基础&#65377;     

基质金属蛋白酶9高表达对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的 观察基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase 9,MMP 9)高表达对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响,以阐述其在糖尿病足伤口愈合中的可能机制.方法 本研究在中山大学孙逸仙纪念医院内分泌专科实验室完成.大鼠皮肤成纤维细胞与高糖(22 mmol/L)+高同型半胱氨酸(100 μmol/L)联合孵育建立体外MMP 9高表达细胞模型,另设正糖(5.5 mmol/L)孵育对照组.Realtime PCR、ELISA和明胶酶谱法检测MMP 9 mRNA、蛋白表达量及活性,流式细胞仪检测细胞增殖功能,CCK-8检测细胞活力,ELISA法检测细胞胶原(羟脯氨酸)分泌能力、划痕实验评价细胞横向迁移能力、Transwell法评价细胞纵向迁移能力.计量数据以均数±标准差(x-±s)表示,两组间均数的比较采用成组t检验,以P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与对照组比较,MMP 9高表达组大鼠皮肤成纤维细胞的MMP 9 mRNA、蛋白表达量及活性,分别升高6.05倍、4.12倍和1.58倍(P＜0.01);与此同时MMP 9高表达组大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例、增殖指数、细胞活力、胶原(羟脯氨酸)分泌量、6h横向迁移率和纵向迁移细胞数,分别下降29.8％、18.1％、23.3％、68.7％、45.0％和21.4％ (P ＜0.01).结论 MMP 9高表达的皮肤成纤维细胞增殖减慢、活力下降、迁移和胶原分泌能力降低,提示MMP 9可能抑制成纤维细胞的生物学行为.     

TACE治疗肝癌的不良反应临床观察

目的探讨TACE治疗肝癌的不良反应情况,为其临床防治提供依据。方法通过回顾性分析81例(Child-pugh A级)肝癌切除术后复发患者TACE术后出现的不良反应情况,与同期同级的267例初诊中晚期肝癌患者进行对比。结果复发组ALT、AST在TACE术后1周恢复至术前水平,而STB、DBIL、STP、A、ChE在术后2周恢复至术前水平,无严重不良反应;中晚期组肝功能均需要2周才能恢复至术前水平。结论 Child-pugh A级肝癌在TACE术后肝功能损害为可逆性;TACE对肝脏合成功能及储备功能损伤持续时间长,恢复较慢。