大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态.方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10 μmol/L的5-氮杂胞嘧啶(5-aza)孵育诱导24h.培养4周,用免疫细胞化学染色方法鉴定心肌样细胞(cardiomyocyte-like cells);用全细胞膜片钳技术,检测胞膜内向钠电流,并与未经诱导的MSCs和急性分离的心肌细胞进行比较.结果MSCs经5-aza诱导后部分表达心肌特异性肌钙蛋白T,在诱导后4周记录到快速激活和失活的膜内向钠电流.与急性分离的心肌细胞比较,相同刺激脉冲下心肌样细胞所产生的电流幅值较小,Ⅰ-Ⅴ曲线向右偏移.结论经5-aza诱导后,MSCs可分化成具有兴奋性内向钠电流的心肌样细胞.     

应用连续小波变换提取脊柱手术中脊髓功能特征参数的研究

在脊柱外科手术中,为防止脊髓神经功能损伤进行术中脊髓功能监护十分必要。本研究以特发性脊柱侧弯矫形手术中脊髓功能的电生理监护特征参数提取技术为目标,试图解决监护参数在时域参数变异性较大、容易受干扰的问题。运用连续小波变换方法对手术中采集的体感诱发电位分析处理,提取信号在时频域的三个新的特征参数。通过本研究表明,在脊柱手术监护中,运用连续小波变换获得的时频域特征参数比单纯在时域分析参数具有更小的变异系数。因此时频域特征分析参数比单纯时域的幅值和潜伏期分析更稳定和可靠。在脊柱手术中如果应用时频监护参数可能会更有效地避免脊髓损伤。     

大鼠骨髓间充质干细胞培养一周后的细胞膜电流

目的通过研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)膜电流的状态,以探讨MSCs的电生理学特性。方法取健康SD大鼠的骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,培养1周后,利用膜片钳技术,以全细胞记录模式记录细胞膜电流。利用各种通道阻滞剂对记录到的电流进行鉴定、分析。结果培养1周后的MSCs未记录到内向膜电流,但显示有3种不同的外向电流在MSCs上单独或混合存在。利用氯通道阻滞剂D IDS不能阻断其外向电流,而在电极内液和细胞外液中使用钾通道阻滞剂后发现其膜电流幅度明显减小,提示所记录到的电流为钾电流,分别为:瞬间外向钾电流、超快速激活延迟整流钾电流及缓慢激活延迟整流钾电流。3种钾电流的电流-电压曲线与文献报道的相应钾电流相符。结论培养1周后的MSCs只表达外向钾电流,不同MSCs表达的钾电流差异较大,从电生理学角度提示MSCs具有多向分化潜能。     

大鼠骨髓间质干细胞诱导分化为心肌样细胞膜电流的研究

目的：研究大鼠骨髓间质干细胞（MSCs）诱导分化为心肌样细胞膜电流的状态。方法：按文献方法进行MSCs的诱导培养和鉴定。诱导后培养4周,用全细胞膜片钳技术,检测胞膜电流,并与未经诱导分化的MSCs进行比较。结果：未经诱导分化的MSCs不表达内向电流,只表达外向钾电流。MSCs经5-aza诱导后表达心肌特异性肌钙蛋白T,记录到2种膜内向电流,分别为钠电流（INa）和L-型钙电流（ICa）,以及3种外向钾电流,包括瞬间外向钾电流（Ito）,超快速激活延迟整流钾电流（Ikur）及缓慢激活延迟整流钾电流（Iks）。与未经诱导分化的MSCs相比,诱导后MSCs的钾电流以Ikur和Iks为主。结论：经5-aza诱导后,MSCs可分化成具有电压依赖性内向INa、ICa和外向Ito、Ikur、Iks的心肌样细胞。     

基于智慧教学云平台的小班化学习社区建构与效果分析

为了提高信息化教学趋势下小班化探究式教学的实效,利用智慧教学云平台,布局教学管理、课程设置、教师备课、课堂应用和督导监控等模块。以平台为媒介,通过学生端和教师端共建了实体课程的小班化探究式学习社区。在医学八年制教学中,按照实体课表构建设计了学习周期的内容,依托云平台进行课前、课堂和课后发布。学生在学习社区内主动学习基础性概念,在教师引导下进行知识应用的探究,并按照课堂或课后发布进行知识拓展。经过教学实证,基于智慧教学云平台的小班化学习社区,提交率、互动率和得分率均超过90%,学生参与度高。其既能充分利用信息化教学资源的优势,又能在课程教学中构建面对面学习社区,体现个性化教学的情感互动,促进学生自主学习能力和创新思维能力的提升。     

脑室周围白质软化症再髓鞘化的研究进展

脑室周围白质软化症（Periventricular leukomalacia,PVL）是一种与神经发育相关、以大脑损伤为主、并最终导致脑瘫和认知障碍的一种早产儿脱髓鞘疾病。其主要特征为大脑脑室周围白质的损害,其中最重要的靶细胞足成髓鞘前的少突胶质细胞（premyelinating oligodendrocyte,Pre—OLs）。PVL的发病机制主要与缺血缺氧损伤、全身感染和炎症反应、小胶质细胞活化、兴奋性氨基酸、自由基损害和大脑白质Pre-OLs自身的发育易损性相关。在PVL脱髓鞘损伤,中枢神经系统通过一系列髓鞘化相关机制来促进和恢复髓鞘的再生。包括转录因子的改变、转录后miRNA的调节以及各种组蛋白去乙酰化酶的表观遗传学渊控作用。其中,鞘磷脂基因调节因子是髓鞘化至关重要的因子,其主要作用是使Pre-OLs向成熟的少突胶质细胞分化,鞘磷脂基因调节因子也受其他转录因子调控。     

生物医学工程硕士生专业课教学的特点和对策

生物医学工程专业课学习是本专业的研究生到达培养科室接受的首要任务。作为工学类专业课程，教学中具有与其他医学类课程不同的特点和要求。但是，只要在教学中紧紧围绕本学科的自身特点，因材施教，强化基础，结合实践，尤其是注重电子工程学在医学中应用，将会对研究生强化科研技能，开展科研工作奠定良好的基础。     

医学本科生神经生物学个性化教学研究

神经生物学是一门多学科交叉的、综合性的前沿学科,主要学习和研究与临床医学密切相关的神经系统组织结构、神经递质、神经调质以及神经元信号传递、临床神经疾病的致病机理及神经生物基础等.在神经生物学教学实施中,针对教学对象的不同类别和层次,经过精选、优化教学内容,强化结构与功能相结合、局部与整体相互联系,突出学科前沿性的特点,在教学方法改革中,运用多种教学模式,加强了内容的交叉和整合.也设计了多层次的反馈与评价,达到教学要求的目标.     

一种适合膜片钳研究的成年大鼠DRG神经元急性分离方法

目的 建立一种适合膜片钳研究的成年大鼠DRG神经元急性分离方法.方法 采用结合酶消化及机械分离的方法,急性分离成年大鼠DRG神经元,用于膜片钳研究.结果 本方法可分离2～3个月的成年大鼠,不损伤神经元的基本结构和电生理学特性,形态上易于区分.结论 本方法步骤单一,操作简单,分离效率高,适合膜片钳研究.     

成年家兔心房肌细胞的分离和电生理记录

目的建立一种简单稳定的成年家兔心房肌细胞的分离、培养方法并进行电生理记录。方法麻醉后取出成年家兔心脏,采用Langendorff灌流装置及急性酶裂解法分离心房肌细胞,差速贴壁法进行纯化后培养于DMEM培养基。在倒置显微镜下观察细胞形态,利用透射电镜观察细胞超微结构,用免疫荧光染色法对心房肌细胞进行鉴定,利用全细胞膜片钳技术记录动作电位和内向钙电流和外向钾电流。结果本方法分离的心房肌细胞纯度和细胞存活率较高,并使用膜电钳技术成功记录了L-型钙电流和瞬时外向钾电流。结论该方法简便有效,细胞存活率高且为进一步进行各种电生理实验打下了基础。