层粘连蛋白酶联免疫分析方法的建立及初步应用

目的　建立酶联免疫吸附试验 ,对层粘连蛋白进行定量检测。方法　将鼠抗人层粘连蛋白单克隆抗体包被于聚苯乙烯微孔板 ,兔抗人层粘连蛋白抗体作第一抗体 ,酶标羊抗兔抗体作为第二抗体 ,在对有关试验条件进行优化后 ,检测 73份献血员标本。结果　本法的标准曲线为 2 5～ 16 0 0ng/ml,但在 5 0～ 80 0ng/ml范围内线性理想 ,其线性回归系数大于 0 .95。批内和批间变异系数分别为 8.6 %和 9.3% ,灵敏度为 2 5ng/ml,平均回收率为 98.1%。 17份样品用本方法与放射免疫法同时检测 ,其相关系数为 0 92 96。 73例献血员血清层粘连蛋白水平为 (115 .7± 17.3)ng/ml。结论　本方法可替代放射免疫法 ,用于人血清和组织液中层粘连蛋白的定量检测     

低剂量中子辐射对大鼠肾组织细胞外基质成分表达的影响

目的 研究低剂量中子辐射对大鼠肾组织细胞表达细胞外基质成分的影响。方法 大鼠随机分4组,分别接受不同剂量的中子照射后,取肾组织用胶原酶消化以分散细胞,采用放射免疫方法测定原代培养细胞上清中的细胞外基质成分的含量。结果 0.29 Gy和1.21 Gy的中子对HA和PC Ⅲ的影响不明显,但都显著刺激LN的增加;0.62 Gy的中子可显著抑制HA和PC Ⅲ,对LN的影响却不明显。中子对三种基质成分影响的量效规律有着一致性,均表现为中剂量(0.62 Gy)组的测定值比低剂量组和高剂量组的测定值低。结论 低剂量中子辐射可引起大鼠肾组织细胞分泌细胞外基质成分发生变化。     

从果蝇染色体DNA制备RNA探针及其染色体原位杂交定位

在相差显微镜下显微切割野生型黑腹果蝇唾液腺X染色体的1区片段,抽提该片段的DNA并与PGEM3Z质粒重组,然后转化到JM103 E.colt中,共切割12个染色体,抽提到大约10pgDNA,经重组、转化获得9个重组子。提取其中5个重组质粒分析其重组片段,2个约为0.6kb,另3个约为3.0kb。2个约为0.6kb重组片断用依赖DNA模板的SP6RNA聚合酶体外合成~3H标记的RNA,以此作探针进行染色体原位杂交定位,被克隆片段定位在果蝇唾液腺X染色体1E,1F位点上。本文结果表明重组到PGEM3Z质粒中染色体DNA可直接作为合成RNA探针的模板。     

ELISA法检测血清透明质酸在肝病诊断中的应用

透明质酸 (hyaluronicacid ,HA)系多糖大分子 ,为细胞外基质及结缔组织的主要成分。正常成人每日HA降解量为10～ 10 0mg[1] ,经肝内皮细胞摄取降解 ,肾小球滤过排除后 ,血清正常HA含量仅 <10 0ng/ml[2 ] 。然而 ,当HA“来源”增加(如类风湿性关节炎、硬皮病 )或“去路”受损 (肝肾疾病 )时 ,血清HA浓度显著升高。国内外临床研究证实 ,HA的定量检测具有极大的临床价值 ,与肝穿活检结果有很好的相关性 ,动态观察血清HA变化有助于 :(1)早期诊断肝纤维化 ;(2 )监测药物对慢性肝炎及肝纤维化的诊疗效应。综观国内文献就近几年有关HA临床应…     

一种Ⅲ型前胶原放射免疫分析方法的建立

目的 :从山羊胎皮中纯化Ⅲ型前胶原 (gPCⅢ ) ,建立血清PCⅢ放免测定法 ,并与用人胎皮提取的Ⅲ型前胶原(hPCⅢ )建立的方法进行比较。方法 :采用分级盐析沉淀和DEAE层析纯化制备 gPCⅢ纯品 ,采用氯胺T法标记纯化的 gPCⅢ ,用完全福氏佐剂在新西兰大白兔皮下注射取得抗gPCⅢ兔血清 ,用双抗体平衡加样法建立放射免疫测定法。并用本法和用hPCⅢ建立的放免法分别测定正常人 10 0例和各型肝病患者 2 0 0例。结果 :两法测定结果完全吻合 ,都显示出肝纤维化组PCⅢ升高最显著 ,慢性肝炎组也有显著升高 ,慢性迁延性肝炎组与其它肝病组无明显升高。结论 :gPCⅢ与hPCⅢ具有斜率近似的曲线 ,两者的基本结构也完全相似。两法测定的临床数据表明 ,用gPCⅢ建立的方法可初步代替hPCⅢ用以测定人血清中PCⅢ含量     

端粒酶是一种胚胎性肿瘤标志物

本文对不同时期的人流胚胎组织和肿瘤组织端粒酶活性进行了分析。胚胎组织普遍存在端粒酶活性,其活性水平随胚胎发育时期和组织种类而异。不仅多数恶性肿瘤组织有端粒酶活性,而且某些癌前病变组织如中－重度不典型增生的肠腺癌中也可检测到瑞粒酶活性。结果证实端粒酶是一个新的胚胎性的肿瘤标志物,端粒酶活性分析对肿瘤的早期诊断具有较高的参考价值。     

低剂量中子照射对大鼠细胞外基质成分的影响

目的　探讨低剂量中子辐射对大鼠肺组织细胞外基质的影响。方法　 12 0只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别接受 0 ,0 .2 9,0 .6 2和 1.2 0Gy的2 52 Cf中子源照射 ,分别在照后 3d ,1和 2个月时处死动物 ,取肺组织样品 - 30℃贮存。采用放射免疫方法测定其透明质酸、层连蛋白、Ⅳ型胶原和Ⅲ型前胶原的含量。结果　照射后各组肺组织透明质酸水平均无明显变化 ;层连蛋白水平在照后 3d ,与对照组相比低、中、高 3个剂量组均出现显著降低 ,直到照后 2个月仍未完全恢复到对照组水平 ;Ⅳ型胶原水平在照射后均出现升高趋势 ,但无显著性差异 ;Ⅲ型前胶原在照后早期出现升高趋势 ,但随后降低。结论　中子低剂量照射可引起肺组织某些细胞外基质成分的改变 ,但效应的形式和程度均随照射剂量及照后时间而不同。     

电离辐射诱导细胞凋亡的研究进展

电离辐射诱导细胞凋亡的研究进展陈铁河１印木泉２１．海军医学研究所（上海２００４３３）２．第二军医大学特殊毒理教研室细胞凋亡是一种有步序的按照某种特定的生理生化途径进行的细胞死亡形式。虽然细胞凋亡早在２０多年前就被Ｋｅｒ等人（１９７２年）所描述，但是直...