AMD3100动员造血干/祖细胞的实验研究

目的观察AMD3100对造血干/祖细胞(HSC/HPC)动员作用。方法 C57BL/6小鼠分为两组:实验组皮下注射AMD3100 5mg/kg;对照组皮下注射等体积的生理盐水。分别于0、0.5、1、2、4、8及12h取血,检测外周血白细胞计数、流式细胞术检测KSL细胞及KL细胞。结果用药30min后,实验组白细胞、KSL细胞及KL细胞明显高于用药前及对照组(P<0.05),2h达到高峰,随后逐渐下降,到24h下降到用药前水平。结论 AMD3100对HSC/HPC有一定的动员作用,动员速度快,作用时间短。     

携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达

目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清。分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定。慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达。结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1。质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞。神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达。结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9-IGF-1,并在神经干细胞内获得表达。     

亚低温联合载神经干细胞的纤维蛋白支架对颅脑创伤的修复作用

目的 研究大鼠颅脑创伤 （TBI） 后原位移植神经干细胞 （NSCs） 治疗的可能性, 探讨载有 NSCs 的纤维蛋白支架及与亚低温（MHT）联合对 TBI 的治疗作用。方法 从孕 14 d SD 大鼠皮质组织中分离 NSCs, 与纤维蛋白支架共培养, 应用扫描电镜观察支架及 NSCs 的形态, 并通过免疫荧光检测细胞类型。将 48 只雄性 SD 大鼠随机分成 TBI 组 （A 组）、 TBI+NSC 组 （B 组）、 TBI+MHT 组 （C 组）、 TBI+NSC+MHT 组 （D 组）, 每组 12 只。A 组通过液压损伤仪行 TBI 造模; B 组 TBI 后接受 NSCs 移植治疗; C 组 TBI 后接受 MHT 治疗; D 组 TBI 后接受 NSCs 与 MHT 联合治疗。分别在第 14、 28 天通过神经功能缺陷评分 （mNSS） 和水迷宫实验对大鼠进行神经功能评价; 28 d 后取脑组织切片, 行细胞免疫荧光检测, 观察移植后的 NSCs 在体内分化情况。结果 电镜扫描显示, NSCs 与纤维蛋白支架共培养 3 d 后形态无明显改变; 免疫荧光提示 NSCs 特异性标志物 Nestin 阳性表达, 表明神经干细胞在纤维蛋白支架上存活; D 组大鼠的 mNSS 在第 14 天和第 28 天均低于 A、 B、 C 各组; 水迷宫结果显示, D 组大鼠逃避潜伏期短于 A、 B、 C 各组; D 组 28 d 后脑组织取材可追踪到 BrdU 标记的神经干细胞分化为了神经元。结论 纤维蛋白支架与 NSCs 生物相容性良好, 具有可降解性。亚低温与载 NSCs 的纤维蛋白支架对大鼠 TBI 后的神经功能修复具有协同作用。     

基于ROS-NLRP3通路探讨麦粒灸治疗佐剂性关节炎大鼠的作用及机制

目的 探讨麦粒灸通过调控ROS-NLRP3炎性通路从而对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)发挥抗炎镇痛效应的分子机制。方法 将47只雄性SD大鼠通过SPSS软件随机程序分为空白组、模型组、模型艾灸组、ROS过表达组、ROS过表达艾灸组。其中空白组7只,其余4组每组10只。对空白组大鼠从右后足垫进行皮内注射无菌生理盐水,其余通过右后足垫皮内注射弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant, FCA)诱导关节炎(Adjuvant arthritis, AA)大鼠模型。FCA造模后,ROS过表达组和ROS过表达艾灸组于造模后第2天皮下注射鱼藤酮油溶液(1.5 mg·kg^-1)制备ROS过表达模型。模型艾灸组和ROS过表达艾灸组造模后7 d取大鼠足三里穴、肾俞穴进行麦粒灸治疗,各穴5壮,两侧交替。艾灸治疗6天为1个疗程,疗程之间休息1 d,共治疗3个疗程。空白组、模型组及ROS过表达组按同法固定,不予艾灸治疗。造模、治疗前后观察大鼠足跖肿胀度、热痛阈及屈腿嘶鸣评分变化;治疗结束后取材,采用ELISA法检测大鼠血清中IL-...     

中西医结合治疗常年性变应性鼻炎78例疗效观察

目的观察中西医结合治疗常年性变应性鼻炎的治疗效果。方法将160例常年性变应性鼻炎患者随机分为2组,治疗组78例采用中西医结合方法治疗,对照组82例采用单纯西医方法进行治疗。结果治疗组总有效率为97%,对照组为89%,2组比较有显著性差异(P0.05)。结论中西医结合治疗常年性变应性鼻炎可明显提高有效率。     

三联疗法治疗难治性原发性胆汁性胆管炎的临床研究

目的 探讨熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）联合泼尼松龙、免疫抑制剂治疗难治性原发性胆汁性胆管炎（primary biliary cholangitis,PBC）的临床疗效。方法 选取2017年6月至2019年6月于温州医科大学附属平阳医院就诊的难治性PBC患者59例,所有患者在原有UDCA治疗的基础上加用泼尼松龙和免疫抑制剂（硫唑嘌呤或吗替麦考酚酯）,记录患者在基线和治疗3、6、12、18、24个月时的实验室检查、免疫指标、肝纤维化无创性评估数据,探讨影响难治性PBC患者预后的因素。结果 所有患者基线时谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、γ-谷氨酰转移酶（γ-glutamyl transferase,GGT）、总胆红素（total bilirubin,TBiL）、免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G和IgM均高于正常值范围,白蛋白（albumin,ALB）均低于正常值...     

1万例献血员血清抗HCV检测

１万例献血员血清抗ＨＣＶ检测广州血液中心检验科（５７００６０）陈自从１９８９年Ｋｕｏ氏等［１］应用分子克隆技术获得丙型肝炎病毒抗原，同时建立了抗ＨＣＶ（Ｃ１００抗体）诊断试验，抗ＨＣＶ已成为调查丙型肝炎感染最广泛应用的方法。我站自１９９２年１０月开始...     

66例急性胰腺炎患者中血清IL-22诊断及其临床意义

[目的]探讨急性胰腺炎患者血清白细胞介素-22(IL-22)的水平及意义.[方法]采用酶联免疫吸附法检测66例急性胰腺炎患者和60例同期住院的非胰腺疾病患者血清IL-22的水平.[结果]急性胰腺炎患者血清IL-22水平显著高于对照组,与患者的年龄及性别无关,重症胰腺炎患者血清IL-22水平高于轻度胰腺炎患者.[结论]急性胰腺炎患者血清IL-22的水平较对照组增加,且与病情严重程度相关,可作为急性胰腺炎诊断和病情评估的潜在生物学靶点.     

造血干细胞移植前清髓及非清髓性照射预处理对小鼠血管内皮的影响

目的 探讨在造血干细胞移植前清髓及非清髓性全身照射(TBI)预处理对小鼠血管内皮的影响.方法 将6～8周龄雌性Balb/c小鼠随机分为正常对照组(正常小鼠)、致死剂量TBI组(~(60)Co 8.5 Gy)和减低剂量TBI组(~(60)Co 5.0 Gy).TBI后定期观察小鼠的生存状态,计数外周血白细胞;采用流式细胞术检测外周血中内皮细胞和内皮祖细胞的变化;通过病理切片及透射电镜观察小鼠小肠及肝脏的组织结构和血管内皮的超微结构.结果 致死剂量TBI组小鼠外周血白细胞减少,同时内皮细胞及内皮祖细胞增加,与正常小鼠相比,差异有统计学意义(P<0.05).减低剂量TBI组小鼠外周血白细胞先降后升,内皮细胞与内皮祖细胞同样也出现增加,与正常小鼠相比,差异有统计学意义(P<0.05);与致死剂量TBI组比较,其外周血内皮细胞和内皮祖细胞增加幅度明显降低(P<0.05).两个TBI组小鼠的病理切片均可见肝脏实质细胞水肿及小肠炎症细胞浸润,肝脏的超微结构可见血管内皮完整性受损,致死剂量TBI组受损更为显著.结论 清髓及非清髓性剂量TBI预处理均可引起小鼠血管内皮早期损伤,其损伤程度与剂量相关,且外周血中内皮细胞的变化可以反映血管内皮损伤的程度.