疑难病例病原菌的检测体会

近几年来，经常发现临床病人反复感染，但是找不到病原菌。最近我室会诊了1例老年病人，因反复下呼吸道感染，3次住院、出院，均未治愈。原就诊医院在痰标本中，始终未发现致病菌，仅凭经验使用多种抗菌药物，效果不佳。     

两种血培养系统的需氧与厌氧瓶对模拟菌血症标本检测能力的对比研究

目的 对比BACTEC Plus需氧、厌氧血培养瓶和BacT/ALERT FA需氧瓶、FN厌氧瓶对模拟菌血症标本的检测能力.方法 采用健康献血者的5 ml无菌新鲜血液和定量菌液组成模拟菌血症标本202组,其中112组标本中加入定量抗菌药物以模拟患者接受抗菌药物治疗的情况.比较需氧瓶检测需氧菌、厌氧瓶检测专性厌氧菌和兼性厌氧菌,以及需氧瓶检测含有抗菌药物的需氧菌标本的平均检测时间(time-to-detect,TTD)和阳性率.结果 两种需氧瓶对需氧菌检测阳性率均为100%,对于102、103 CFU/ml两种浓度菌液,BACTEC Plus需氧瓶平均TTD分别为(13.69±3.74)h、(11.54±2.87)h,快于BacT/ALERT FA瓶平均TTD的(16.76±5.62)h、(14.47±4.30)h,两者比较差异有统计学意义(t=-5.674、-7.294,P＜0.01).对于专性厌氧菌,BACTEC Plus氧瓶和BacT/ALERT FN瓶阳性率分别为92%和100%,BacT/ALERT FN瓶的平均TTD分别为(22.60±9.16)h、(22.10±13.46)h,快于BACTEC Plus厌氧瓶平均TTD的(40.24±35.07)h、(34.88±17.34)h,两者比较差异有统计学意义(t=2.389、2.712,P＜0.05).对于兼性厌氧菌,BACTEC Plus厌氧瓶和BacT/ALERT FN瓶阳性率分别为100%和60%,BACTEC Plus厌氧的平均TTD为(13.24±7.82)h、(11.33±7.61)h,明显快于BacT/ALERT FN瓶平均TTD的(16.79±8.00)h、(19.27±14.71)h,两者比较差异有统计学意义(t=-3.440、-2.604,P＜0.05).对含有抗菌药物的需氧菌标本,BACTEC Plus需氧瓶和BacT/ALERT FA瓶阳性率分别为100%和57%,BACTEC Plus需氧瓶TTD多快于BacT/ALERT FA瓶.加人抗菌药物会延长TTD,且延长时间和两种培养的TTD时间差随抗菌药物浓度的增加而延长.结论 应根据患者的情况选择不同的血培养系统和培养瓶.对怀疑需氧菌或兼性厌氧菌感染,以及在进行血培养时已接受抗菌药物治疗的患者,选用BACTEC Plus需氧、厌氧血培养瓶;对怀疑厌氧菌感染的患者选用BacT/ALERT FN厌氧血培养瓶,能够更快地检出病原菌,并提高血培养阳性率.     

氟康唑纸片扩散法和浓度梯度法检测酵母菌耐药性的研究

目的 对比研究酵母菌氟康唑纸片扩散法和浓度梯度法的相关性。方法 分别应用纸片扩散法和浓度梯度法检测142株临床分离的酵母菌对氟康唑的敏感性；采用BIOMIC仪自动读取培养板上的抑菌环直径、记录试验结果并对质控数据进行核实；用WHONET-5．3软件分析结果，比较两者的相关性。结果 两种体外药敏试验方法的一致率可达82．4％，极重要误差率为0．7％，重大误差率为2．8％，次要误差率为14．7％。对于光滑念珠菌两种方法的检测结果有较大差异。结论 应用WHONET-5．3软件分析得出氟康唑纸片扩散法和浓度梯度法对于检测大多数酵母菌具有非常好的一致性，但对于一部分菌株需要进一步应用常量肉汤稀释法确定其最低抑菌浓度值。     

香港和北京两地血标本中革兰阴性杆菌的耐药性比较

目的 比较香港和北京两地血培养中革兰阴性菌的耐药性。方法 对1998—2003年从北京协和医院（n=530）和香港威尔斯亲王医院（n=2913）分离出非重复的血培养菌株，两地分别采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测其对亚胺培南，头孢他啶，头孢吡肟等13种抗菌药的敏感度。结果 香港（1471株）和北京（213株）的大肠埃希菌对阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟的耐药率范围分别为0．6％～5．0％和7．5％～23．5％。对庆大霉素、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢曲松和环丙沙星的耐药率范围分别为12．6％～28．4%．4%和29．4％～68．4％。两地的克雷伯菌属（香港586株，北京70株）对哌拉西林-三唑巴坦和头孢他啶的耐药率分别为3．3％～11．3％和4．3％～17．7％。对阿米卡星、庆大霉素、头孢噻肟和头孢曲松的耐药率范围分别为15％～10．1％和5．8％～27．1％。上述菌株及香港的330株包括肠杆菌属、柠檬酸杆菌属和沙雷菌属（ECS菌）都对亚胺培南和美罗培南敏感，而北京65株ECS群菌有4．6％耐药。ECS群菌对头孢吡肟耐药率分别为8．8％和14％。其他β内酰胺类对该菌群耐药率为28．4％～96％。香港伤寒沙门菌对所测试抗菌药敏感，而北京的菌株对氨苄西林和哌拉西林耐药率为9．1％～18．2％。香港不动杆菌属和铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率低于10％，但北京两者对亚胺培南的耐药率分别为13．6%～15．3％和8．8%～30．8％。结论 北京血培养中分离的革兰阴性杆菌对大多数抗菌药的耐药率高于香港。为两地革兰阴性菌败血症的经验治疗提供了有价值的参考信息。     

2005-2006年我国九家教学医院分离的常见呼吸道病原菌的耐药监测研究

目的调查2005-2006年中国社区呼吸道常见病原菌的耐药性。方法收集2005年1月—2006年9月全国9家医院社区呼吸道感染患者中分离的417株肺炎链球菌、208株流感嗜血杆菌、76株卡它莫拉菌和66株A群β溶血链球菌。琼脂稀释法测定莫西沙星等10种抗菌药物的最低抑菌浓度（MICs）。结果全国9家医院，青霉素中介的肺炎链球菌（PISP）为23．0％，青霉素耐药的（PRSP）为24．5％。来自儿童的肺炎链球菌对青霉素的敏感性明显低于成人组（30．6％vs．64．5％，P〈0．001）。成人组中，上海瑞金医院PISP和PRSP明显高于其他8家医院（PISP46．7％vs．15．3％，40．0％vs．17．3％，P=0．002）。青霉素对417株肺炎链球菌的MIC范围为0．008～4μg／ml。PRSP对头孢克洛、头孢丙烯、阿莫西彬克拉维酸和头孢曲松的敏感性分别为2．9％、2．9％、53．9％、58．8％，未发现对莫西沙星和左氧氟沙星不敏感的PRSP。19．2％的流感嗜血杆菌和92．1％的卡它莫拉菌产生β内酰胺酶。流感嗜血杆菌对头孢克洛、头孢丙烯的敏感性（88．9％、92．3％）低于其对阿莫西彬克拉维酸、头孢曲松、阿奇霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的敏感性（99．5％～100％）。卡它莫拉菌对上述药物的敏感性为92．1％～100％。9家医院流感嗜血杆菌β内酰胺酶的发生率最高的是杭州（41．9％）、广州（37．5％），其次是上海（26．3％～29．6％）、武汉（13．0％），最低的是北京和沈阳（≤3．3％）；成人组流感嗜血杆菌的产酶率高于儿童组（22．1％vs．11．1％，P〈0．05）。未发现对青霉素耐药的A群β溶血链球菌。肺炎链球菌、A群β溶血链球菌对阿奇霉素耐药率高于75％。莫西沙星对肺炎链球菌、A群β溶血链球菌的MICs比左氧氟沙星低4～8倍。结论不同年龄组、不同地区肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的耐药性均有差异。革兰阳性球菌对大环内酯类的高耐药性值得关注，莫西沙星对呼吸道病原菌有优秀的抗菌活性。     

要重视耐药监测

抗生素耐药的全球化已成为事实 ,各种医院及社区的病原菌均获得了对抗生素的耐药性。耐药菌株的出现及其传播 ,要求我们必须进行全球范围内的耐药监测[1] 。世界卫生组织 (ＷＨＯ)及其伙伴 ,包括制药工业通过各种培训、实验室的建设、室间质控等活动 ,努力提高耐药监测的水平、力度和深度[2 ] 。在各种国际性的微生物学和感染病学会议上 ,重要病原菌的耐药动态都是从较有影响的全球监测网络如ＳＥＮＴＲＹ、ＡＬｅｘａｎｄｅｒ、ＭＹＳＴＩＣ、ＰＲＯＴＥＫＴ、ＬＩＢＲＡ等获得的 ,其监测数据为临床提供非常有价值的信息。质量控制是耐药监…     

SEANIR监测中国15所教学医院不发酵糖革兰阴性杆菌对13种抗菌药物的药敏试验

目的分析SEANIR监测2008年中国15所教学医院医院获得性不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的敏感性,并评价帕尼培南体外药敏试验方法。方法收集2008年分离自中国15所教学医院医院获得性感染患者的非重复鲍曼不动杆菌349株、铜绿假单胞菌359株、嗜麦芽窄食单胞菌145株和洋葱伯克霍尔德菌100株,用琼脂稀释法测定13种抗菌药物的MIC,对比MH培养基和1:40 MH培养基对帕尼培南药敏试验结果的影响。结果鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的敏感率仅为51.6%～63.7%;多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性最强,且对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌仍具有较高的抑菌率(分别98.1%和72.8%)。多黏菌素B和阿米卡星对铜绿假单胞菌的抑菌率最高(分别为96.1%和83.3%),其次为用1:40 MH培养基测定帕尼培南、哌拉西林-他唑巴坦和美罗培南的抑菌率(72.4%～77.2%)。嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌对米诺环素和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑均较敏感(敏感率为78.6%～98.0%)。结论多黏菌素B对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,米诺环素对鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌,具有较强的体外抗菌活性。帕尼培南的体外药敏试验,鲍曼不动杆菌应采用MH培养基测定,铜绿假单胞菌应采用1:40 MH培养基测定,其抗菌作用与亚胺培南较为接近。     

头孢米诺等抗菌药物对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及拟杆菌属的体外抗菌活性

目的 比较头孢米诺等抗菌药物对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、拟杆菌属的体外抗菌活性.方法 琼脂稀释法测定16种抗菌药物对来自全国15家教学医院的945株大肠埃希菌和588株肺炎克雷伯菌的MIC值以及4种抗菌药物对50株拟杆菌属的MIC值.WHONET 5.4软件进行药敏数据统计分析.结果 1 533株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,不产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamases,ESBLs)和AmpC 628株,837株仅产ESBLs,68株产AmpC.头孢米诺对不产ESBLs或单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌敏感率均高于90%,其MIC50较头孢美唑低2～4倍,较头孢西丁低8～16倍;MIC90较头孢美唑低2～8倍,较头孢西丁低8～16倍.对单产ESBLs的菌株,头孢米诺体外抗菌活性优于第三、四代头孢菌素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、左氧氟沙星和阿米卡星,劣于碳青霉烯类药物,活性与哌拉丙林/三唑巴坦相仿.但对产AmpC的菌株,头孢米诺的敏感率低于20%.头孢米诺对拟杆菌属的敏感率为90%,高于头孢美唑(50%～70%)和青霉素(0%),活性与甲硝唑相仿.结论 头孢米诺对产ESBLs及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌以及拟杆菌属有良好的体外抗菌活性,提示头孢米诺可为临床治疗此类菌株感染提供一种选择.     

头孢米诺等抗菌药物对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及拟杆菌属的体外抗菌活性

目的 比较头孢米诺等抗菌药物对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、拟杆菌属的体外抗菌活性.方法 琼脂稀释法测定16种抗菌药物对来自全国15家教学医院的945株大肠埃希菌和588株肺炎克雷伯菌的MIC值以及4种抗菌药物对50株拟杆菌属的MIC值.WHONET 5.4软件进行药敏数据统计分析.结果 1 533株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,不产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamases,ESBLs)和AmpC 628株,837株仅产ESBLs,68株产AmpC.头孢米诺对不产ESBLs或单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌敏感率均高于90%,其MIC_(50)较头孢美唑低2～4倍,较头孢西丁低8～16倍;MIC90较头孢美唑低2～8倍,较头孢西丁低8～16倍.对单产ESBLs的菌株,头孢米诺体外抗菌活性优于第三、四代头孢菌素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、左氧氟沙星和阿米卡星,劣于碳青霉烯类药物,活性与哌拉丙林/三唑巴坦相仿.但对产AmpC的菌株,头孢米诺的敏感率低于20%.头孢米诺对拟杆菌属的敏感率为90%,高于头孢美唑(50%～70%)和青霉素(0%),活性与甲硝唑相仿.结论 头孢米诺对产ESBLs及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌以及拟杆菌属有良好的体外抗菌活性,提示头孢米诺可为临床治疗此类菌株感染提供一种选择.