经阴道彩色多普勒超声对未破裂型输卵管妊娠的诊断价值

目的探讨经阴道彩色多普勒超声(TV-CDFI)在未破裂型输卵管妊娠的诊断与鉴别诊断的价值。方法对75例临床确诊的未破裂型输卵管妊娠的二维声像图、血供分布及血流动力学参数进行回顾性分析。结果未破裂型输卵管妊娠的二维声像图可分为三型,以“输卵管环”为特征性表现(占76%),回声多数(82.5%)高于同侧卵巢实质回声,多数(78.9%)位于卵巢内侧。“输卵管环”型和非特异性包块型以星点形血供分布为主,RI值比较无统计学差异(P>0.05)。胎心胎囊型血供最丰富,流速曲线呈高速低阻型。结论TV-CDFI对未破裂型输卵管妊娠的早期诊断价值较高,是一种有效的方法。     

Different effects of therapeutic ultrasound parameters and culture conditions on gene transfection efficiency

Objective： To investigate the effect of different therapeutic ultrasound （TUS） parameters and culture conditions on the cell viability and transfection efficiency of human cervical cancer cells （HeLa）. Methods： HeLa cells were cultured using two different protocols （in suspension or in monolayer）. Subsequently, cells were exposed to different TUS intensity （0.4 W/cm^2, 1.0 W/cm^2, 1.6 W/cm^2, 2.2 W/cm^2）, duty cycle （DC）（10%, 20%, 50%）, exposure time （1 min or 3 min）. Cell viability was analyzed by flow cytometry. Gene transfection of red fluorescent protein （DsRED） was detected. Results： TUS intensity and duty cycle had a great impact on the overall results （P〈0.01）. Cell injury were found to increase progressively with intensity （1.6 W/cm^2, 2.2 W/cm^2） and duty cycle （50%） and cell detachment was accompanied by ultrasound exposure in adherent cells Results of factorial design showed that the fashion of cell culture and the TUS parameters had interaction （P〈0.01）. The ideal conditions that cell viability above 80% producing maximum efficiency were noted to be at 1.0 W/cm^2 irradiated 3 min with a duty cycle of 20% in cell suspension. Conclusion： TUS parameters and transfection conditions have a great impact on the gene transfection and cell viability. Optimal parameters could enhance cell inembrane permeability, which facilitate to delivering the macromolecules into cells.     

Efficient Gene Delivery to Myocardium with Ultrasound Targeted Microbubble Destruction and Polyethylenimine

The aim of present study was to evaluate the feasibility and efficiency of enhanced green fluorescent protein （EGFP） gene delivery to myocardium in vivo by ultrasound targeted microbubble destruction （UTMD） and polyethylenimine （PEI）. SonoVue/DNA and PEI/DNA/SonoVue complexes were prepared. Gel electrophoresis analysis was performed to determine the structural integrity of plasmid DNA or PEI/DNA after UTMD. Solutions of plasmid DNA, SonoVue/DNA, PEI/DNA complexes or PEI/DNA/SonoVue complexes were respectively transduced into BALB/c mice hearts by means of transthoracic ultrasound irradiation. Mice undergoing PBS injection, plasmid injection or PEI/DNA complexes injection without ultrasound irradiation served as controls. Gene expression in myocardium was detected 4 days after treatment. Cryosections and histological examinations were conducted. Electrophoresis gel assay showed no damage to DNA or PEI/DNA complexes after UTMD. When the heart was not exposed to ultrasound, the expression of EGFP was observed in the subendocardial myocardium obviously. The strongest expression was detected in the anterior wall of the left ventricle when the heart was exposed to ultrasound alone. Injection of PEI/DNA complexes and UTMD resulted in the highest transfection efficiency and the distributional difference of EGFP was not obvious. No tissue damage was seen histologically. In conclusion, a combination of UTMD and PEI was highly effective in transfecting mice hearts without causing any apparently adverse effect. It provides an alternative to current clinical gene therapy and opens a new concept of non-viral gene delivery for the treatment of cardiac disease.     

能量多普勒超声联合Logistic回归模型及受试者工作特征曲线对早孕期流产的诊断价值

目的评价经阴道能量多普勒超声（TV—PDU）联合Logistic回归模型及受试者工作特征（ROC）曲线对不明位置妊娠患者进行鉴别分析，预测宫内早孕期流产（IUPA）的发生及其严重程度。方法应用TV—PDU检查子宫内膜（建模组），同时测定其血清β-HCG、孕酮，运用多因素h—gistic回归法对各研究变量进行分析，并建立回归模型和ROC曲线，应用ROC曲线分析确定各超声参数及临床指标预测判断IUPA的最佳阈值和评价各指标对IUPA诊断的准确性。另外选取60例患者（测试组）对该回归模型的真实性和准确性进行验证。结果多变量模型1（M1）选择内膜下血流阻力指数（RI）、最高流速（PSV）这两个参数，而内膜回声类型、血清孕酮、停经时间则进入多变量模型2（M2）。M1、M2的ROC曲线下面积分别为0．887、0．976，约登指数和阳性似然比分别为90．8％、87．5％和12．213、8．000。M2特异度和阳性预测值均低于M1，M1的诊断准确率较高，但M1、M2对IUPA的诊断价值均较单变量明显提高。M1、M2对测试组进行回代，模型稳定性较好。结论TV—PDU能简单、无创和有效地预测早孕期IUPA的可能性，内膜下血流动力学参数与IUPA联系密切。     

不育症患者精索静脉曲张程度超声分级与精液质量和性激素的相关性研究

目的 探讨不育症患者精索静脉曲张(VC)超声分级与其精液质量和性激素的关系.方法 选取128例VC患者和79例正常男性作为研究对象.使用彩超诊断仪进行检查;分析精液分析结果、精子DNA碎片指数(DFI)、性激素检查结果.结果 与正常组对比,VC组精液质量主要指标的差异有统计学意义(P<0.05).随着VC分级的递增,精...     

经阴道超声技术在多囊卵巢综合征诊断中的应用新进展

多囊卵巢综合征(PCOS)主要发生于育龄期女性,病因及发病机制不明,是一种临床表现复杂的内分泌代谢异常的疾病,通常表现为月经不调、不孕、肥胖、双卵巢呈多囊样改变等,近年来PCOS引起的不孕逐渐成为生殖领域的研究热点。PCOS患者在超声上的改变与部分内分泌指标相关,经阴道超声检查能清晰地显示PCOS患者卵巢改变情况(包括卵巢形态学改变、血流动力学改变及功能学改变),从而为临床诊断及有效治疗提供了一定帮助。今后三维能量多普勒超声、三维容积超声及实时超声弹性成像等超声新技术可能成为多囊卵巢综合征重要的诊断方法。     

超声辐照联合PEI增强体外基因转染的实验研究

目的 探讨超声辐照联合聚乙烯亚胺(PEI)增强子宫内膜癌细胞(Ishikawa)荧光素酶质粒(pCMV-LUC)基因表达的可行性.方法 以不同氮/磷酸盐比(N/P比)将2种不同分子量PEI与质粒DNA共孵育,制备阳离子复合物(PEI/DNA).利用凝胶阻滞实验测定PEI与DNA形成复合物时所需的比例,运用MTT法比较不同浓度PEI的细胞毒性.通过检测荧光素酶活性和细胞活力,评价不同分子量PEI对基因转染的影响及超声辐照的增强作用.结果 当N/P比达到3或更高时,PEI可有效地缩合质粒DNA.细胞毒性与PEI浓度相关.超声辐照均能提高裸质粒和复合物的荧光素酶活性(P<0.05),但前者的增加幅度显著小于后者(P<0.05),25 kDa显著优于750 kDa(P<0.01).适当的转染条件对细胞活力无明显影响.结论 超声辐照联合25 kDaPEI可明显提高基因转染效率,可为基因治疗提供一种高效的新方法.     

超声介导微泡破坏增强survivin短发夹状RNA质粒转染对基因表达及细胞凋亡的影响

目的 观察超声介导微泡破坏(UMMD)转染survivin短发夹状RNA质粒对宫颈癌细胞(Hela)survivin基因表达及细胞凋亡的影响.方法 构建靶向survivin基因的短发夹状RNA质粒(shRNA)真核表达质粒(pSIREN-S),将pSIREN-S和SonoVue微泡加入培养的Hela细胞,予以超声辐照(P+UMMD),或用脂质体法转染细胞(P+L),以空白对照(C)、pSIREN-S质粒(P)、超声辐照(US)、SonoVue(S)、pSIREN-S+SonoVue(P+S)、pSIREN-S+超声辐照(P+US)为对照,FITC-annexin V/FITC和7-AAD双染后分析细胞凋亡,RT-PCR和蛋白质印迹检测survivin mRNA及蛋白表达的变化.结果 酶切及测序分析证实pSIREN-S构建成功.P+L组的细胞凋亡率(31.58±3.12)%显著高于各对照组(P＜0.01),但仍低于P+UMMD组(43.86±4.44)%.P+UMMD组的mRNA及蛋白表达相对水平分别为(16.67±2.73)%和(21.33±3.55)%,显著高于其他各组(P＜0.01).结论 UMMD联合shRNA干扰技术能显著阻抑靶基因survivin的表达,有效诱导细胞凋亡.UMMD为以RNA干扰为基础的肿瘤基因治疗及研究提供新思路,有望成为一种高效的非病毒基因疗法.     

低强度超声联合托泊替康诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：研究低强度超声联合托泊替康诱导人肝癌细胞（HepG2）凋亡的协同效应以及相关的机制。方法：应用HepG2,实验分为托泊替康处理组、超声处理组、联合治疗组（托泊替康＋超声）,评估细胞生存活力、细胞凋亡,胞内托泊替康累积及空化效应。结果：当超声强度为0.8W/cm2及以上时,协同托泊替康能明显诱导HepG2细胞凋亡,1.0W/cm2超声辐照联合托泊替康时细胞凋亡率为12.88%,空化效应在凋亡诱导实验中促进了托泊替康胞内渗入,增加胞内积累。结论：联合低强度超声能增强托泊替康的凋亡诱导效应,空化效应是其协同增强的主要机制。     

基于以问题为导向的心脏超声临床教学探讨

心脏超声在超声教学工作中较难讲述,其实践性和操作性强,学生难以掌握。对心脏超声的教学主要应从两方面入手:培养学员心脏超声检查方法和超声诊断的思维能力。制定以问题为导向(PBL)的超声临床教学模式,使学生围绕问题对知识进行完整的构建,通过教师精心设计的问题,以学生为主体,形成学术性的教学框架。在心脏超声的教学工作中,合理应用PBL教学方法,既能显著提高超声临床教学质量,又能培养影像专业学生学习超声的兴趣和主动性,提高学生的综合能力。本文就PBL教学法在心脏超声临床教学中的应用进行探讨。