国产血竭总黄酮测定的方法学研究

为探讨国产血竭黄酮类化合物的测定方法,通过提取黄酮类化合物,并将黄酮类化合物通过化学定性、薄层层析及紫外光谱分析,发现国产血竭主要含有C环未共轭的黄酮类化合物,且其紫外光谱特征与二氢黄酮、二氢查耳酮及黄烷化合物的紫外光谱特征相似,据此推测国产血竭总黄酮的测定宜采用有针对性的测定方法。     

一种氯化铁诱导血栓生成的小鼠大脑中动脉远端缺血模型

目的 建立稳定的小鼠大脑中动脉远端氯化铁血栓模型，评价其造成的脑损伤及神经功能损伤程
度。
方法 C57BL6/J雄性小鼠随机分为脑缺血组和假手术组。脑缺血组用10%氯化铁（ferric chloride，
FeCl3）溶液诱导右侧大脑中动脉远端形成血栓。在术前、术后10 mi n、术后1 d和7 d观测术侧脑血流
和手术动脉血流量的变化。术后1 d观察脑组织梗死率。术后1 d、3 d、5 d、7 d用3种神经学评分[改良
加西亚评分（modified Garcia score，mGS）、改良神经损伤严重程度评分（modified neurological severity
scores，mNSS）和15分神经学评估表（15-point neurological evaluation scale，NES）]和胶黏纸测试评价小
鼠神经功能。术后7 d免疫荧光染色标记神经细胞核观察脑组织损伤，标记CD16/32、CD206和Iba1观
察胶质细胞表达。
结果 与假手术组相比，脑缺血组术后10 mi n、1 d、7 d脑表面血流和手术动脉血流下降，术后1 d脑
皮层梗死明显，术后7 d仍有明显脑组织损伤；脑缺血组术后1 d、3 d、5 d和7 d时3种神经学评分及胶
黏纸测试均提示小鼠神经功能不同程度损伤。术后7 d脑缺血组梗死周围皮层M1和M2型胶质细胞表
达增加。
结论 FeCl3溶液可诱导形成稳定的小鼠脑缺血模型，该模型可造成手术侧大脑中动脉远端及脑表
面血流量降低，皮层脑梗死，小鼠神经功能受损，梗死周围胶质细胞表达上调。本研究建立了稳定
氯化铁诱导血栓形成的小鼠脑缺血模型，为脑血栓形成和抗栓药物治疗提供了一种可靠的研究工
具。     

阿司匹林和氯吡格雷联合应用对小鼠脑缺血损伤后骨髓及脑内炎症反应的影响

目的 探讨小鼠脑缺血损伤后阿司匹林和氯吡格雷联合应用21 d对骨髓中性粒细胞炎症因子及脑内小胶质细胞极化的影响。      

首选阿立哌唑治疗72例精神分裂症临床观察

目的通过首选阿立哌唑治疗精神分裂症,以观察阿立哌唑的临床疗效和不良反应,以改变以往精神科首选氟哌啶醇,氯丙嗪等药物的观念。方法对72例精神分裂症患者进行为期8周的临床观察,采用t检验的统计学处理方法。结果72例精神分裂症患者均完成了8周的临床观察,显效率达到77.78%。未见严重的不良反应。结论阿立哌唑对于治疗精神分裂症的阳性症状和阴性症状均有明显疗效,阿立哌唑疗效稳定,服药依从性较好,药物不良反应也相对较少。     

阿司匹林和氯吡格雷联合应用 对小鼠脑缺血恢复期RAGE及 sRAGE表达的影响

目的 探索阿司匹林和氯吡格雷联合应用对小鼠大脑中动脉远端缺血再灌注模型恢复期晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）及可溶性晚期糖基化终末产物受体（soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE）表达的影响及其机制。 方法 60只C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组、溶剂组、阿司匹林和氯吡格雷联合组（双抗组）,每组20只。通过压迫大脑中动脉远端制作脑缺血再灌注模型（缺血60?min再灌注）,再灌注即刻灌胃,溶剂组给予饮用水100?μL,双抗组给予阿司匹林（剂量12?mg/kg,每只实际用量0.3?mg）与氯吡格雷（剂量12?mg/kg,每只实际用量0.3?mg）混悬液100?μL,每日1次,连续21?d。缺血1、3、5、7、9、11、14、21?d对小鼠进行神经功能评价。缺血21?d取材,酶联免疫吸附法检测小鼠血清sRAGE表达水平;免疫印记检测脑组织RAGE表达水平;实时荧光定量PCR检测CD16、CD32、CD11b、诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric-oxide synthase,iNOS）、CD206、精氨酸酶1（arginase1,Arg1）、转化生长因子β（transforming growth factor β,TGF-β）、几丁质酶样蛋白（chitinase-like 3,Chil3/Ym1/2）等炎症因子及RAGE的mRNA表达情况;免疫荧光染色标记RAGE、神经元特异核蛋白（neuronal nuclei,NeuN）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）,观察RAGE与神经元和星形胶质细胞共定位情况。 结果 双抗组小鼠3?d时胡须碰触评分和神经功能总分、9?d时神经功能总分优于溶剂组,差异有统计学意义（P=0.0067、0.0140、0.0406）。缺血再灌注21?d时,双抗组小鼠血清sRAGE表达水平高于溶剂组（1.099±0.541?ng/mL?vs.?0.319±0.341?ng/mL,P=0.0120）;脑组织iNOS（1.250±0.318 vs.?1.843±0.301,P=0.0164）及RAGE（2.105±0.300?vs.?2.732±0.249,P=0.0071）的mRNA相对表达较溶剂组下降。在小鼠脑梗死周边区RAGE与神经元具有共定位,与星形胶质细胞无共定位;双抗组RAGE+NeuN+细胞数量少于溶剂组（328.798±35.183个/平方毫米?vs.?814.437±165.758个/平方毫米,P=0.0012）。 结论 阿司匹林和氯吡格雷联合应用可能通过下调RAGE、上调sRAGE的表达水平,减轻炎症反应,从而发挥脑保护作用。     

前列地尔治疗早期糖尿病肾病疗效及安全性研究

2016年11月～2017年11月收治的早期糖尿病肾病患者100例,平分为对照组常规治疗,观察组常规治疗+前列地尔治疗。结果:血脂水平、临床指标总有效率:观察组高于对照组(P0.05)。不良反应差异不明显(P0.05)。结论:早期糖尿病肾病应用前列地尔,既可改善临床指标及血脂水平,又可提高治疗总有效率,不良反应可自行缓解,安全性较高。     

8例人造血管搭桥内瘘行血液透析的护理体会

慢性肾衰竭患者需要进行长期的维持性血液透析治疗,建立和维护理想的血管通路是进行有效血液透析的重要条件之一。采用自体动静脉内瘘是大多数透析患者长期维持治疗的主要方式。但慢性肾衰竭患者由于自身血管硬化或内瘘闭塞以及糖尿病患者常存在血管病变等原因使动静脉内瘘无法建立。因此人造血管搭桥内瘘是这类靠血液透析维持生命的患者的另一透析方式。     

长春西汀注射液在小鼠永久性脑缺血小胶质细胞表型转化中的作用研究

目的 研究长春西汀注射液对小鼠永久性大脑中动脉远端缺血后神经功能恢复及小胶质细胞表型 转化的影响。 方法 36只雄性C57BL/6J小鼠随机分为永久性脑缺血组6只、生理盐水组12只、长春西汀组12只和 假手术组6只,前三组用高频电刀凝断小鼠右侧大脑中动脉远端,制作永久脑缺血模型,假手术组 仅暴露大脑中动脉远端,不凝断血管。模型成功后,生理盐水组尾静脉注射生理盐水,每次150 μL, 每天1次,持续14 d;长春西汀组尾静脉注射长春西汀注射液,每次150 μL（4.55 mg/kg）,每天1次, 持续14 d。模型成功后3 d、5 d、7 d、9 d、11 d和14 d进行改良加西亚评分和转棒测试评价小鼠感觉和 运动神经功能;模型成功后14 d用免疫荧光标记神经元,评价各组神经元损伤情况,免疫荧光染色 梗死周围小胶质细胞表型标志物Iba1、CD16/32和CD206的表达,评价M1型（Iba1及CD16/32阳性）和 M2型（Iba1及CD206阳性）小胶质细胞表型转化情况。 结果 长春西汀组小鼠模型成功后11 d和14 d的改良加西亚评分和14 d的转棒测试中的时间及速度 测试结果均优于永久性脑缺血组,差异均有统计学意义。长春西汀组14 d时神经元损伤较永久性脑 缺血组（P =0.008）和生理盐水组（P =0.037）减轻。永久缺血组（P <0.001）和生理盐水组（P =0.005） M1型小胶质细胞表达高于假手术组;长春西汀组M1型小胶质细胞表达低于永久缺血组（P <0.001） 和生理盐水组（P =0.038）。长春西汀组M2型小胶质细胞表达高于假手术组、永久性脑缺血组和生 理盐水组（均P <0.001）。 结论 长春西汀注射液可能通过促进小胶质细胞表型由促炎向抗炎转变,减少神经元损伤,从而 在小鼠永久性脑缺血后发挥神经保护和促进功能恢复的作用。     

包皮环切术防治复发性念珠菌性包皮龟头炎

为观察包皮环切术防治复发性念珠菌性包皮龟头炎的疗效,选择包皮过长或包茎的复发性念珠菌性包皮龟头炎患者,随机分为治疗组(包皮环切 口服氟康唑)48例和对照组(口服氟康唑)54例.治疗后2周、2个月、半年、1年随访观察疗效.结果:2周后治疗组和对照组有效率分别为100%,98.1%,两组比较差异无显著性(P0.05).2个月、半年、1年后治疗组复发率分别为4.2%、6.3%及10.4%,对照组复发率分别为18.9%、26.4%及35.8%,两组复发率比较差异均有显著性(P<0.05).包皮环切术防治复发性念珠菌性包皮龟头炎的疗效确切,能有效防治复发.     

毛柳苷在脑缺血再灌注后抑制神经元自噬及神经保护作用研究

目的 通过动物模型和体外细胞培养探索毛柳苷（salidroside，SAL）对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其可能机制。方法 36只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（12只）、溶剂组（12只）和SAL组（12只）。线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉闭塞模型，缺血1 h后再灌注，而后即刻尾静脉注射150 μL SAL（剂量10 mg/kg，每只实际用量0.22 mg），溶剂组注射同等体积磷酸盐缓冲液，假手术组不给药。缺血再灌注后24 h进行小鼠神经功能缺损评分，神经元特异核蛋白（neuronal nuclei，NeuN）染色统计脑梗死率。取溶剂组小鼠全脑冰冻切片，自噬标记物微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3 beta，LC3B）分别与NeuN、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）免疫荧光共染，观察LC3B与梗死周边区神经元、星形胶质细胞共定位情况，以明确缺血再灌注后24 h产生自噬活动的主要部位。自噬标记物苄氯素1（Beclin-1）、自噬相关蛋白3（autophagy related protein 3，Atg3）分别与NeuN免疫荧光共染，进一步观察梗死周边区神经元自噬水平变化情况，并统计Beclin-1+/NeuN+、Atg3+/NeuN+细胞在单位面积（1 mm2）内的个数。原代大鼠神经元培养10 d后进行氧糖剥夺（oxygen glucose deprivation，OGD），将细胞分为以下6组：对照（control，CON）组、OGD 1 h后复氧1 h（OGD 1 h）组、OGD 1 h后复氧4 h（OGD 4 h）组、SAL组、OGD 1 h后复氧1 h/全程SAL治疗（OGD+SAL 1 h）组、OGD 1 h后复氧4 h/全程SAL治疗（OGD+SAL 4 h）组，CON组和SAL组不进行OGD，SAL剂量50 μmol/L。采用免疫印迹法检测各组细胞中自噬标记物LC3B、Beclin-1、Atg3、Atg5和Atg7的相对表达量；CON组、OGD 4 h组细胞进行LC3B、NeuN免疫荧光共染，观察OGD后神经元内LC3B表达变化情况，并统计LC3B+/NeuN+细胞在单位面积（1 mm2）内的个数。结果 缺血再灌注后24 h，SAL组小鼠神经功能缺损评分（5.8±1.4分 vs. 7.1±1.4分，P=0.0332）和脑梗死率（28.7%±9.7% vs. 39.9%±9.4%，P=0.0038）均低于溶剂组。溶剂组LC3B与梗死周边区神经元有共定位，与星形胶质细胞无共定位。SAL组Beclin-1+/NeuN+（312.4±45.6个/平方毫米 vs. 471.2±50.3个/平方毫米，P=0.0121）、Atg3+/NeuN+（322.5±26.5个/平方毫米 vs. 491.3±42.1个/平方毫米，P=0.0013）细胞数量少于溶剂组。大鼠原代神经元免疫印迹结果显示，OGD 1 h组（1.096±0.004 vs. 1.000±0.000，P=0.0174）、OGD 4 h组（1.213±0.019 vs. 1.000±0.000，P<0.0001）LC3B相对表达量高于CON组；OGD+SAL 4 h组LC3B、Beclin-1、Atg3相对表达量低于OGD 4 h组（0.833±0.029 vs. 1.213±0.019，P<0.0001，0.579±0.081 vs. 1.152±0.144，P<0.0001，0.726±0.182 vs. 1.091±0.177，P=0.0211）；OGD+SAL 4 h组LC3B、Beclin-1相对表达量低于OGD+SAL 1 h组（0.833±0.029 vs. 1.046±0.063，P<0.0001；0.579±0.081 vs. 0.921±0.09，P=0.0030）。CON组LC3B+/NeuN+细胞数少于OGD 4 h组（51.9±18.7个/平方毫米 vs. 584.2±34.5个/平方毫米，P=0.0002）。结论 SAL可能通过抑制神经元自噬在急性脑缺血再灌注损伤中发挥神经保护作用。