缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的制备

[目的]探讨缓释血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的制备方法及其性能.[方法]采用溶剂浇铸-粒子沥滤法制备聚乳酸支架(S1)和纳米珍珠层/聚乳酸支架(S2),接着将PDGF-BB与纤维蛋白胶混合注入S2,冷冻干燥后制成缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架(S3).3种支架通过万能测试机测试抗压强度、扫描电子显微镜观察表面形貌以及阿基米德法测定孔隙率;利用ELISA法检测S3降解过程中PDGF-BB释放量.[结果]3种支架材料均具有良好的三维多孔结构,孔径分别为(330.0 ±55.6)μm、(322.5±50.8)μm和(303.3±47.0)μm,差异无统计学意义(P>0.05);孔隙率分别为81.0%±1.1%、82.5%±0.8%和80.2%±0.7%,差异无统计学意义(P>0.05);抗压强度分别为(3.6 ±0.12)MPa、(5.0±0.35)MPa和(5.1 ±0.26)MPa,S1与S2和S3有显著性差异(P<0.01).ELISA实验结果表明支架中复合的PDGF-BB释放长达30 d,呈持续缓慢释放.[结论]缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架为三维多孔结构,具有较好的力学性能,持续缓慢释放PDGF-BB,有望成为一种理想的骨组织工程支架材料.     

新型活性修饰聚乳酸组织工程骨的体外成骨研究

[目的]探讨氨等离子体改性、酰胺键接枝甘氨酸-精氰酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(GRGDS)短肽的活性修饰方法对消旋聚乳酸(PDLLA)组织工程骨体外成骨能力的影响.[方法]制备圆片状直径8 mm、厚1 mm的PDLLA三维多孔支架,分为三组:表面氨基化PDLLA(aminated PDLLA,A/PDLLA,A组),接枝肽A/PDLLA(peptides conjugated A/PDLLA,PA/PDLLA,PA组),以未经处理的PDLLA(P组)作为对照组.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测符组材料上骨髓间允质干细胞(BMSCs)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白-2(Bmp-2)和骨桥蚩白(OPN)mRNA的表达变化并进行ALP活性测定和钙黄绿素矿化荧光染色.[结果]qPCR结果示:第3 d,PA组各基因表达倍数均较P组高;除OCN外的各基因表达也均较A组高.第7 d,A组OCN(13.13±1.28)、Col-Ⅰ(23.71±6.51)和OPN(27.4±7.17)mRNA表达倍数为最高,PA组次之.第14 d,多数基因表达上调,A组和PA组表达倍数较对照组明显增高.PA组OCN(49.21±7.03)、ALP(24.26±3.41)和BMP-2(11.82±2.38)mRNA的表达较A组高,差异有统计学意义(P＜0.05).ALP活性检测结果示:A组和PA组ALP活性持续升高,P组活性第21 d较第14 d时略有下降.第7 d,A组和PA组之间ALP活性比较无统计学意义(P＞0.05),但均高于P组(P＜0.01);第14 d和第21 d,三组间ALP活性两两比较均有统计学意义,ALP活性PA组＞A组＞P组.钙黄绿素矿化荧光染色观察示,骨支架上钙盐沉积与ALP的活性变化趋势相平行.[结论]氨等离子体改性能够促进聚乳酸组织工程骨支架上BMSCs早期向成骨细胞分化,改性后接枝GRGDS肽的新型活性修饰PDLLA具有更好的促BMSCs体外成骨能力.     

瘦素在异位骨化模型大鼠骨化组织中的表达

瘦素(Leptin,LEP)作为一个骨调节因子,其骨科领域对其研究多聚焦在骨质疏松和关节炎方面.我们采用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测模型大鼠异位骨化(HO)分离组织中Leptin(10周)和Leptin mRNA(5、10周)表达,探讨Leptin在HO 形成中潜在的作用. 一、材料与方法 1.材料:山羊血清(美国Sigmaaldrich公司),兔抗鼠Leptin抗体、生物素酰化的山羊抗兔抗体(美国Santa Cruz 公司),链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)、DAB(美国Dako公司).     

复合振动仪治疗骨质疏松对骨代谢影响的临床观察

目的 观察复合振动仪治疗骨质疏松(OP)对骨代谢的影响.方法 70例OP志愿者随机分成复合振动组和对照组,每组35例.复合振动组采用自行研制的复合振动仪进行全身振动治疗,振动频率45～55 Hz,振动强度0.5～0.8 g,1次/隔天,30 min/次,连续3个月,对照组不进行任何干预,于试验开始前3天、试验后第1、3个月分别检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、钙磷乘积([Ca]×[P])的变化.结果 第3个月,复合振动组的ALP、OC、TRAP、[Ca]×[P]分别比试验前增加了44.6%、-9.4%、1.7%、7.5%,对照组的相应指标分别比试验前增加了22.8%、-13.3%、3.6%、4.7%,P值分别为0.108、0.788、0.606、0.171.结论 复合振动仪治疗OP对骨代谢的影响无统计学意义,但骨代谢的绝对值有变化.     

狄诺塞麦对低骨量妇女腰椎骨密度的影响及其安全性的meta分析

目的系统评价狄诺塞麦对低骨量妇女腰椎骨密度的影响及其安全性。方法检索Medline数据库、Embase数据库、Cochrane临床对照实验中心数据库、万方数据库、中国知网全文数据库、中国生物医学文献数据库有关狄诺塞麦治疗低骨量妇女的临床研究,按照纳入及排除标准筛选出随机对照试验,用jadad量表对纳入的研究进行质量评价。提取有效数据,采用RevMan 5.0.24软件进行meta分析。结果共纳入双盲、随机对照试验5项,采用固定效应模型进行meta分析,结果示狄诺塞麦治疗12月后,腰椎骨密度升高幅度比安慰剂对照试验高5.45%(95%CI,5.05%~5.84%),P<0.00001。对随访期间发生的严重不良事件、严重感染事件及腰背痛事件,采用固定效应模型进行meta分析,两组间并无显著差异。结论狄诺塞麦组相对安慰剂对照组可显著提高腰椎骨密度,两者的安全性近似。     

人黄韧带细胞体外原代培养方法的比较

目的 比较不同的人黄韧带细胞(LFCs)原代培养方法,优化培养条件,提高培养成功率.方法 采集成年腰椎间盘突出症患者后路椎间盘摘除术中的黄韧带,分别采用组织块法、酶消化法、胶原酶消化加组织块法体外原代培养LFCs,传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测...     

生长因子对鼠成骨细胞钙离子浓度变化的动态观察

我们应用粘附细胞仪（ＡＣＡＳ）,观察了血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）单独应用及与骨形态形成蛋白（ＢＭＰ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）联合应用,对鼠成骨细胞内钙离子（Ｃａ２＋）浓度的影响。报告如下。１．材料与方法：取１～２天龄ＳＤ纯种大鼠的颅盖...     

Orion锁定型颈椎前路钢板系统在颈椎外科中的应用

目的 研究和评估Ｏｒｉｏｎ锁定型颈椎前路钢板系统在颈椎外科的价值和作用。方法对６例颈椎疾病患者行颈前路减压,植骨融合,并采用ＡＣＬＰＳ内固定。结果 １６例中１３例获随访≥６个月。所有病例植骨均完全愈合,无一例发生网板螺钉松动、断裂等并发症。结论ＡＣＬＰＳ操作简单,可提供有效的固定节段稳定性,适用于颈椎失稳、颈椎外伤国、肿瘤及退行性变的治疗。     

复杂重症脊柱结核的治疗

目的探讨复杂重症脊柱结核的综合治疗方法。方法 2004年6月～2009年11月共收治45例患者,男30例,女15例。入院时合并脊髓压迫13例,伴有各种并发症32例,18例伴有后凸畸形。入院后常规检查并予术前处理及化疗,行单纯后路植骨融合内固定12例,前后路联合手术18例,单纯侧前方手术15例。术后根据细菌培养和药敏试验进行抗结核治疗,持续9～12个月。结果本组患者5例失随访,40例平均随访2.7年。33例植骨融合病例骨融合时间平均为4.7个月。13例脊髓压迫患者神经功能恢复率为84.6%。结论复杂重症脊柱结核可采取化疗为主、手术为辅,既重视合并症处理,又采取相对积极的手术,同时重视病原学和病灶局部处理的综合治疗。     

成人黄韧带细胞的体外培养

目的:探讨成人黄韧带细胞的体外培养方法,为研究黄韧带退变的发病机制奠定基础。方法:采集成年胸腰椎骨折患者后路减压术中的黄韧带,应用胶原酶预消化组织块培养法分离黄韧带细胞,并传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;传1、3、5代细胞培养1～8d,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸光度(OD)值,评价细胞增殖状况,并绘制细胞生长曲线;用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原的表达。结果:在原代培养第10～14天,黄韧带细胞开始从组织块迁出,细胞呈多种形态,主要为梭形和多角形,细胞接近融合时呈涡流状生长。传1、3、5代细胞生长曲线呈S形,同一代细胞在不同时间点的OD值差异有统计学意义(P0.001),同一时间点不同代次细胞的OD值无统计学差异(P0.05),细胞代次与时间点间无交互效应,各代细胞增殖状况无统计学差异(F=0.283,P=0.957)。传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光染色呈阳性。结论:胶原酶预消化组织块培养法能有效分离成人黄韧带细胞;体外培养的黄韧带细胞呈成纤维细胞样表型,细胞在传5代以内生物学特性稳定。