北京市49家三级医院医学实验室酶学检验结果测量不确定度的评定与分析

目的用"自上而下(top-down)"方法评定北京市49家三级医院临床实验室肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)常规检验结果的测量不确定度,鉴别并分析其主要来源。方法应用"top-down"方法,通过酶学参考测量程序赋值的人血清和实验室室内质控数据评估酶学检验结果的测量不确定度。以常规实验室重复测量赋值血清10次数据评估偏移引入的相对测量不确定度分量[ucrel(bias)];以连续3个月实验室室内质控统计数据评定实验室内复现性引入的相对测量不确定度分量[urel(RW)];再通过ucrel(bias)和urel(RW)计算相对合成标准不确定度(ucrel)和相对扩展不确定度(Urel)。结果 49家实验室测量不确定度的评定结果显示:对于CK、LDH、GGT 3个指标,在合成ucrel(bias)的3个分量中,测量平均值与赋值血清定值的相对偏移量值(brel)是ucrel(bias)的主要来源。3个指标ucrel(bias)引入的不确定度均大于urel(RW)引入的不确定度;ucrel(bias)的离散度亦明显大于urel(RW);并依CK、LDH、GGT次序顺序增大。CK、LDH、GGT指标Urel的中位数和四分位数分别为8.72%(6.08%,12.26%)、9.45%(6.66%,16.68%)、9.90%(6.28%,21.29%);若修正偏移,Urel将会有相当程度的改善,中位数和四分位数分别为4.77%(3.84,7.41%)、5.50%(4.06%,7.35%)、4.68%(3.56%,6.31%)。检测系统分组数据显示:依组成分组,其组间平均brel的差异均无统计学意义(P均0.05);据校准品分组,LDH、GGT指标组间平均brel的差异有统计学意义(P0.05)。结论 brel是实验室主要不确定度来源;使用某厂家校准品或不使用校准品的分析系统是产生偏移的主要因素。统一评估测量不确定度是改善酶学检验结果实验室间可比性的方式。     

北京市临床实验室GGT、CK、LDH及α-AMY测量结果的正确度调查

摘要：目的：了解北京市各临床实验室γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）及α-淀粉酶（α-AMY）常规测量系统测量结果的正确度。 方法：用北京市12家大型临床实验室GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统分别测量2个活性水平的人血清基质国家二级标准物质,以标准物质“认定值±不确定度”及E_n值为标准评价测量结果的正确度。 结果: 2个活性水平的标准物质,GGT测量结果范围分别为89.5~119.3 U/L、169.6~214.3 U/L;CK测量结果范围分别为197.0~224.7 U/L、372.0~446.7 U/L;LDH测量结果范围分别为169.0~225.7 U/L、260.7~372.0 U/L;α-AMY测量结果范围分别为40.0~69.3 U/L、162.3~271.0 U/L;GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统测量结果满足正确度标准要求的实验室比例分别为8%（1/12）、33%（4/12）、18%（2/11）和10%（1/9）。 结论：北京市临床实验室大部分GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统测量结果的正确度不能满足量值溯源要求。     

Doumas血清总胆红素参考方法标准曲线的复现

摘要：目的: 复现符合Doumas血清总胆红素(T-Bil)参考方法要求的标准曲线。 方法：用美国国家标准与技术研究院（NIST）研制的SRM916a配制200 mg/L T-Bil标准原液并在598 nm处测定摩尔吸光系数(ε),用T-Bil空白液和ε符合要求的标准原液配制5、10、15、20、50、100、150 mg/L 7个浓度工作标准液并在598 nm处测定吸光度,用最小二乘法绘制标准曲线并计算线性回归方程,计算各浓度工作标准液实测浓度与理论浓度差值。依据Doumas参考方法要求判断标准曲线的符合性。 结果：T-Bil标准原液ε的x±s（n=4）为(76 448±145) L·mol^-1·cm^-1,CV为0.19%;标准曲线线性回归方程为Y=0.007 70X-0.000 59,r²=0.999 98,各浓度工作标准液实测浓度与理论浓度差值分别为：第一次测量为-0.18、-0.01、0.07、-0.18、0.23、0.13、-0.45 mg/L,第二次测量为-0.16、0.01、0.18、-0.15、0.21、0.42、0.15 mg/L。 结论: 复现的血清T-Bil标准曲线符合Doumas参考方法要求。     

IFCC参考方法对两种测量系统GGT结果正确性的验证

采用IFCC参考方法和A、B两厂家测量系统(以下简称方法),同时测量20份不同浓度的新鲜单人份血清、ERM-AD452(有证酶参考物质)、RELA(Ring-trial,国际参考实验室室间质量评价活动)样本,有效数据采用MVSl.380软件按EP9-A2文件评价两厂家方法测量结果的正确性,并用Bland-Altman图...     

临床分离粪肠球菌和屎肠球菌菌株的检测及耐药性研究

目的分析粪肠球菌、屎肠球菌对抗菌药物的耐药性及敏感性,为合理使用抗菌药物提供证据。方法运用Phonex 100全自动微生物鉴定/药敏系统对临床分离的菌株进行鉴定和药敏试验。结果 103株肠球菌耐药率最高的药物依次为红霉素（94.2%）、环丙沙星（85.4%）、利福平（81.6%）,对万古霉素（94.2%）和替考拉宁（93.2%）的敏感性最高。发现万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌各3株。粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素的耐药率分别为22%和71.7%,对氨苄西林的耐药率分别为16.7%和86.8%。结论 肠球菌属总体耐药率较高,红霉素、环丙沙星、利福平对肠球菌的敏感率较低,已检测发现VRE,临床上应加强监测,并根据药敏结果、感染严重程度合理选择适当的抗菌药物。     

四种血清α-淀粉酶厂家系统测量结果的正确性评价

目的 寻找满足IS0 15189要求、测量结果正确的血清α-淀粉酶(AMY)常规检测方法.方法 收集2008年3至12月AMY活性为(40.0～ 750.0)U/L的50份不同浓度的人血清组成患者冷冻血清样本组,优选瑞士Roche公司、日本和光公司、深圳迈瑞公司、四川迈克公司4种AMY厂家系统,分别采用国际临床化学和实验室医学联和会( IFCC)参考方法和基于7170全自动生化分析仪的4种AMY厂家系统同时测量浓度为(70.1 ±3.7) U/L和(418.3 ±22.1)U/L的具有标准物质特性的冷冻血清和患者冷冻血清样本组.用Excel软件进行各厂家系统与IFCC参考方法测量结果的直线回归分析.采用MVS1.380软件的EP9-A2文件方法、Bland-Altman图形分析法和改良Bland-Altman图形分析法分别进行各厂家系统与IFCC参考方法测量结果的等价性判定、一致性评价和各厂家系统测量结果的正确性评定.结果 以IFCC参考方法测量结果做评价标准,Roche、和光、迈瑞、迈克公司厂家系统测量结果存在明显差异:(1)浓度为(70.1±3.7) U/L和(418.3±22.1)U/L的具有标准物质特性的冷冻血清各厂家系统测量结果分别为66.4、70.6、69.4、49.2 U/L和394.0、456.4、406.7、302.4 U/L.迈瑞公司系统结果与IFCC参考方法一致.(2)患者冷冻血清样本组的各厂家系统与IFCC参考方法测量结果的直线回归方程斜率分别为:0.934、1.070、0.930和0.731,截距分别为:0.886、6.249、5.388和3.574.按EP9 -A2文件方法评价,罗氏和光、迈瑞公司系统测量结果与IFCC参考方法等价.按Bland-Altman图形分析法评价,Roche和迈瑞公司系统测量结果与IFCC参考方法测量结果一致.各厂家系统平均偏倚分别为-6.11％(“平均偏倚±2s”分别为-2.81％和9.40％)、1.99％(“平均偏倚±2s”分别为10.35％和-6.36％)、-2.70％(“平均偏倚±2s”分别为2.37％和-7.77％)和- 34.72％(“平均偏倚±2s”分别为- 24.20％和- 45.24％).按改良Bland-Altman图形分析法评价迈瑞公司系统测量结果正确.各厂家系统平均偏倚分别为- 5.92％(“平均偏倚±2s”分别为-2.81％和- 9.03％)、2 10％(“平均偏倚±2s”分别为10.74％和- 6.53％)、- 2.64％(“平均偏倚±2s”分别为2.24％和-7.51％)和-29.51％(“平均偏倚±2s”分别为- 21.82％和-37.21％).结论 (1)不同厂家系统测量结果不一定都具有正确性,尽管各厂家系统测量结果都已声称具有溯源性.(2)当采用不同方法评价测量系统正确性时,同一厂家系统测量结果评价结论可能不一致.实验室应选择并建立常规方法测量结果正确性评价方法,选择并使用符合IS0 15189正确性要求的常规方法.     

冰冻人血浆醛固酮标准物质的研制

目的 研制冰冻人血浆醛固酮国家二级标准物质,用于血浆醛固酮的量值溯源、室内质量控制、实验室能力验证、相关试剂和方法的评估及验证等,促进血浆醛固酮检测标准化进程,实现结果互认。方法 收集无肉眼可见溶血、乳糜和黄疸的混合血浆材料,经过浓度配比、过滤、分装后,-70℃保存。参照JJG 1006-1994和JJF 1343-2012文件要求用常规测量方法评价标准物质的均匀性和稳定性。6家通过JCTLM认可和/或CNAS认可的实验室采用醛固酮ID-LC/MS/MS候选参考测量方法联合定值。分析不确定度来源并进行不确定度评定,定值结果用“认定值±不确定度”表示。参照美国国家临床实验室标准委员会EP14-A3文件要求评价互通性。结果 研制了2个浓度水平标准物质,均匀性良好(P>0.05),瓶间变异均<4%。-70℃以下条件可稳定半年;冰袋运输可稳定5d;复融后室温条件下可稳定4 h, 2～8℃条件下可稳定168h。2个浓度水平标准物质的定值结果分别为56.9±4.3和147±12pg/mL,k=2。标准物质在ID-LC/MS/MS法和2个常规方法间与临床血浆样本具有良好的互通性。结论 研...     

吡非尼酮抑制内皮素-1诱导下的乳鼠心肌细胞肥大及其作用机制研究

目的 采用内皮素-1（ET-1）诱导的心肌细胞肥大模型,研究吡啶酮类小分子化合物吡非尼酮（pirfenidone）对心肌肥大标志物如心房钠尿肽（ANP）、B型利钠肽（BNP）、β肌球蛋白重链（β MHC）等的影响,并探讨其作用的分子机制.方法 构建ET-1 诱导离体心肌细胞肥大模型,采用Real-time PCR 法检测吡非尼酮对ANP、BNP、β-MHC 等蛋白表达水平的影响;用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测吡非尼酮对ANP、BNP、β-MHC 等mRNA 表达水平,以及转化生长因子β（TGF-β）/SMAD 信号通路分子TGF-β1 及SMAD2、SMAD3 在心肌细胞中的mRNA 表达水平的影响.结果 吡非尼酮能够显著抑制ET-1 诱导下ANP、BNP、β-MHC 蛋白及mRNA 水平的表达,以及TGF-β1 、SMAD2、SMAD3 在心肌细胞中的mRNA 表达.结论 吡非尼酮对ET-1 诱导的心肌细胞肥大具有抑制作用,这一作用可能是通过抑制TGF β/SMAD 信号通路相关分子实现的.     

5’-核苷酸酶对肝癌、冠心病的临床意义

目的明确5’-核苷酸酶（5’-NT）在肝癌诊断的临床意义及与探讨冠心病发病的关系。方法采用日立7170A全自动生化分析仪,利用速率法测定对照组30例,肝癌组32例和冠心病组24例的5’-核苷酸酶水平。结果对照组、肝癌组和冠心病组的5’-核苷酸酶水平分别为6．58U／L、26．41U／／L、9．67U／L,肝癌组和冠心病组显著高于对照纽（P〈0．05）。结论5’-核苷酸酶是诊断肝癌的特异性指标,5’-核苷酸酶的升高在冠心病发病中有一定程度的保护。     

血清脂肪酶检测标准化的研究进展

血清脂肪酶测量对急性胰腺炎的诊断、鉴别诊断具有重要价值,其测量标准化是目前临床检验医学领域面临的一个重要问题。该文从脂肪酶的生物学特性及分类、测量方法、测量标准化现状等方面对血清脂肪酶的研究进行综述,旨在帮助读者进一步了解血清脂肪酶测量标准化的研究进展,更好地开展我国血清脂肪酶测量的标准化工作。