抗广州管圆线虫噬菌体抗体库的构建及初步筛选

目的以广州管圆线虫感染的小鼠脾细胞为源,构建抗广州管圆线虫抗体库,并筛选可用于广州管圆线虫病早期诊断的目的抗体。方法提取感染广州管圆线虫的小鼠脾细胞RNA,并逆转录合成cDNA第一链,PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻、重链基因先后连接到表达载体pComb3上,转化大肠杆菌XLI-Blue,构建组合文库。用广州管圆线虫排泄分泌抗原（EsAg）作为筛选抗原,进行富集筛选,用ELISA法鉴定阳性克隆。结果成功构建了小鼠抗广州管圆线虫噬菌体抗体文库,库容为2.32×106,滴度为1.7×1013cfu/ml。筛选到了抗广州管圆线虫排泄分泌抗原特异性抗体克隆5株,用过氧化物酶标记的抗M13抗体进行初步鉴定,具有一定的特异性。结论构建的抗广州管圆线虫噬菌体抗体库达到了要求,为研制广州管圆线虫金标诊断试剂盒奠定了基础。     

癫痫持续状态患者神经元损伤与氧化应激的关系

目的 探讨癫痫持续状态(SE)患者神经元损伤与氧化应激的关系.方法 以30例SE患者(SE组)为研究对象,检测其在癫痫发作6 h内的血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)及丙二醛(MDA)水平;以30例健康者作为对照组.结果 SE组血清NSE水平(26.98±4.16 ng/mL)高于对照组(16.34±3.11 ng/mL),T-SOD(77.22±18.42 U/mL)低于对照组(104.53±15.99 U/mL),8-OHdG(527.36±63.94 pg/mL)高于对照组(334.09±57.51 pg/mL),MDA(10.58±1.39 nmol/mL)高于对照组(5.33±1.76 nmol/mL)(P<0.001).SE组血清NSE水平与T-SOD呈负相关(r=-0.85,P<0.001),与8-OHdG、MDA呈正相关,相关系数分别为0.74和0.86(P<0.001).多元逐步回归分析显示,T-SOD、8-OHdG、MDA对NSE有显著影响,标准回归系数分别为-0.474、0.055、2.870(P<0.01).结论 SE患者体内存在氧化系统和抗氧化系统失衡,氧化应激可能参与了癫痫发作的病理生理过程,也是造成SE神经元损伤原因之一.     

138例短暂性脑缺血发作患者脑血管造影分析

目的 通过数字减影脑血管造影检查,分析短暂性脑缺血发作(TIA)患者脑动脉狭窄程度和分布,探讨TIA与脑动脉狭窄的相关性.方法 138例符合TIA诊断标准的患者,行数字减影选择性全脑血管造影,明确有无脑动脉狭窄、狭窄程度及分布.结果 138例患者中有116例共185支血管狭窄.其中闭塞血管48支,占25.9％,重度狭窄血管42支,占20.9％,中度狭窄血管52支,占32.8％,轻度狭窄血管43支,占25.3％;颅外段狭窄占60.2％,颅内段占39.8％;颅外段狭窄动脉中以颈内动脉颅外段最常见,占28.9％,而颅内段狭窄则以大脑中动脉最常见,占19.9％.结论 颅内外脑动脉粥样硬斑块形成伴狭窄是TIA的主要发病原因,数字减影选择性全脑血管造影可以确定TIA患者颅内外脑动脉粥样硬斑块形成及狭窄情况,对TIA治疗方案的选择起非常重要作用.     

血氨与HBV相关慢加急性肝衰竭患者90天预后的关系

目的探讨基线血氨(BLA)与HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者90 d预后的关系。方法回顾性分析解放军总医院第五医学中心2013年1月-2016年12月收治入院的789例HBV-ACLF患者,研究基线BLA与HBV-ACLF患者90 d预后的关系。采用Cox回归风险模型进行多因素分析。运用Kaplan-Meier生存曲线分析不同BLA水平患者的90 d生存率,并采用log-rank检验进行比较。结果通过多个Cox多元回归模型分析,BLA与90 d HBV-ACLF患者的死亡风险呈独立正相关(完整模型:风险比=1.007,95%可信区间:1.005～1.010,P0.000 01)。log-rank检验显示:未合并肝性脑病(HE)的患者中,BLA~(low)组,BLA~(mid)组和BLA~(high)组90 d的累计病死率逐渐增高(P=0.002 3);合并HE的患者中,BLA~(high)组90 d的累计病死率高于其他两组(P=0.012),而后两组患者90 d累计病死率无明显差异(P=0.18)。结论基线BLA与HBV-ACLF患者90 d死亡风险独立正相关,对治疗和预后判断有一定的临床价值。     

2014—2018年上海市浦东新区HIV抗体筛查与确证试验结果特征分析

目的对2014—2018年上海市浦东新区HIV抗体筛查与确证试验结果进行分析,了解该地区近几年HIV感染状况及防控检测工作的开展情况,为今后艾滋病的防治提供依据。方法对该辖区内HIV初筛有反应的标本用酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光法或免疫层析快诊试验进行复检,对复检有反应标本进行免疫印迹法(WB)确证试验。运用EXCEL和SPSS 16.0统计软件对数据进行整理与分析。结果2100份复检有反应标本进行确证实验,阳性为1485份(70.71%);阴性为452份(21.52%);不确定为163份(7.76%)。确证阳性男女性别比为7.95∶1。复核试验与确证试验的阳性符合率为91.33%。WB确证阳性标本条带100%出现gp160和gp120。71.43%不确定标本出现gp160。结论两次复检双阳标本确证阳性率高,一阴一阳的样本多为确证试验不确定或阴性。结果不确定标本可加做CD4、核酸检测和病毒载量等辅助检测。     

替莫唑胺治疗老年广泛期小细胞肺癌疗效观察

目的:观察对于60~85岁老年广泛期小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）患者给予一线化疗药物治疗后6月内复发后二线化疗药物临床疗效及耐受性。方法:选取2013年1月至2017年1月间在研究中心就诊的经过EP方案一线治疗后6月内复发的老年广泛期小细胞肺癌患者44例,分为替莫唑胺组（n=22）和对照组（n=22）。替莫唑胺组给予替莫唑胺每天150 mg/m2,连续服用5天,28天为一周期。对照组给予伊立替康65 mg/m2,d1、8+顺铂75 mg/m2分3天,d2~4,静脉输注。2周期复查评价治疗效果。对比两组有效率、疾病控制率、无进展生存期及不良反应发生率。结果:替莫唑胺组与对照组的有效率、疾病控制率分别为18％ vs 18％、23％ vs 27％,差异无统计学意义（P＞0.05）;替莫唑胺组与对照组的无进展生存时间分别为5.3个月和5.5个月,差异无统计学意义（P＞0．05）;替莫唑胺组的胃肠道反应、腹泻及骨髓抑制明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论:替莫唑胺口服28天一周期方案化疗有效率高,老年患者耐受性好,是经一线治疗后6月内复发的老年广泛期小细胞肺癌患者值得选择的化疗方案。     

益气逐瘀解毒颗粒调控 MMPs/TIMPs 平衡抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:探讨益气逐瘀解毒颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及机制。方法:将SD雄性大鼠给予CCl4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标,逆转录-定量PCR法和蛋白印迹法分别检测大鼠肝组织中基质蛋白酶1 (Matrix metalloproteinase1, MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13及基质蛋白酶抑制因子1 (tissue Inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)表达水平,肝组织苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining, HE染色)、MASSON染色检测肝纤维化程度。结果:治疗后与空白组比较,模型组的ALT、AST无显著性差异(P 0.05),MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达显著降低(P 0.05),TIMP-1基因表达显著升高(P 0.05),肝纤维化半定量计分(SSS)评分显著升高(P 0.01);与模型组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达明显升高(P 0.05),中剂量组MMP-9、MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),低剂量组MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达量无显著性差异(P 0.05),高、中剂量组MMP-13蛋白表达量显著升高(P 0.05),各剂量组TIMP-1蛋白表达量均显著下降(P 0.05),以低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),各药物干预组SSS评分显著降低(P 0.01);与阳性对照组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-2基因表达明显升高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中剂量组MMP-13蛋白表达显著升高(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组TIMP-1蛋白表达显著降低(P 0.05),低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组SSS评分显著降低(P 0.01)。结论:调控MMPs/TIMPs平衡可能是益气逐瘀解毒颗粒抗肝维化的作用机制之一,其通过升高MMP-13、降低TIMP-1表达水平,调控MMPs/TIMPs平衡,促进过度沉积的细胞外基质(Extracelluar matrix,ECM)降解,改善CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的肝脏功能,从而改善其肝纤维化程度。     

妊娠期糖尿病的研究进展

妊娠期糖尿病属于高危妊娠疾病,临床上包括两种疾病类型,妊娠后首次发病或发现的糖尿病称为妊娠期糖尿病,妊娠前已有糖尿病患者妊娠称为糖尿病合并妊娠.此病可能会导致产妇手术生产风险增加,还可能会出现巨大儿、肩难产以及妊娠期高血压等其他产科并发症等,甚至可能会影响新生儿的健康甚至其后代的健康状况.因此需要对妊娠期糖尿病进行尽早诊断,以便根据诊断结果对孕产妇提供相应的治疗干预措施,从而提高分娩质量,避免产妇出现不良妊娠结局.此病的发病原因众多,包括营养因素、遗传易感性与基因异常、脂肪细胞因子和炎症因子等等,而此病的常见治疗方法包括饮食营养疗法、运动疗法和降糖药物治疗等,文章总结了妊娠期糖尿病的发病因素和相关治疗进展.     

苓甲抗癌复方提取物在荷瘤小鼠中抗肿瘤免疫应答机制

目的:初步探究苓甲抗癌复方提取物(LAM)在荷瘤小鼠中抗肿瘤免疫应答机制.方法:LAM治疗荷瘤小鼠,检测小鼠生长、瘤块体积与重量的变化;流式细胞术和ELISA分析小鼠脾脏中Treg细胞、NK细胞和各种细胞因子;Western blot分析LAM对Treg细胞相关蛋白作用.结果:LAM抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,引发肿瘤坏死,抑制肿瘤促增殖蛋白Ki67的表达,降低血液中CA153的含量;降低脾脏中Treg细胞比例和血清中TGF-β与IL-10的含量,提高IL-2、IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B的含量和NK细胞的比例.结论:LAM抑制肿瘤的生长,并抑制Treg细胞的数量与功能,提高机体的免疫功能.     

高度依赖病房降低重症肝病患者ICU重返率的临床研究

目的探讨真实世界中高度依赖病房(HDU)和普通病房中重症肝病(SLD)患者重症监护病房(ICU)重返率的差异, 反映HDU在SLD患者诊疗管理中的作用。方法连续纳入解放军总医院第五医学中心ICU从2017年7月至2021年12月降阶梯至HDU及普通病房的重症肝病患者, 比较两组间的主要肝功能指标、终末期肝病模型(MELD)评分等, 分析转入不同病房的SLD患者病情严重程度、ICU重返率等的差异, 阐明HDU病房在SLD患者等级病房管理中的作用;采用受试者操作特征曲线计算曲线下面积(AUROC), 探讨基线MELD评分界定HDU收治范围的可行性。结果 SLD患者转入HDU时国际标准化比值、总胆红素、丙氨酸转氨酶、MELD评分等水平均显著高于转入普通病房组(P值均< 0.05)。转入HDU组中有70.7%的SLD患者MELD评分> 17, 而普通病房组中有61.9%的SLD患者MELD评分≤17。本队列总体ICU重返率为11.4%, 按照MELD评分四分位数P75分组, MELD评分>23的SLD患者ICU重返率(20.0%)显著高于MELD评分≤23的SLD患者(8.6...