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41.
42.
目的观察正反义人TIMP-1转染和酶抑制剂干预HKC细胞对PTEN、VEGF/Flk-1的表达的影响,为研究TIMP-1对肾脏
器官衰老的影响机制提供参考。方法将正义和反义人TIMP-1基因转染至人近端肾小管上皮细胞(HKC),同时用与正义转染
组细胞酶抑制活性相当的MMP-2/MMP-9 抑制剂(MMP-2/MMP-9 Inhibitor Ⅲ, 100 μmol/L)干预24 h,RT-PCR;间接免疫荧
光法检测各组细胞PTEN、VEGF和Flk-1的表达。结果研究显示,与未转染和空载体转染组相比,正义TIMP-1转染组中PTEN
表达上调(P<0.05),明胶酶活性降低(P<0.05),VEGF和Flk-1 表达下调(P<0.05),而反义TIMP-1 转染组则相反(P<0.05);
MMP-2/MMP-9 inhibitor Ⅲ 100 μmol/L(酶抑制剂组)组PTEN、VEGF和Flk-1 表达与未转染和空载体转染组相比无显著差
异。结论肾脏器官衰老过程中高表达的TIMP-1,通过上调PTEN(非MMP依赖途径),进而下调VEGF、Flk-1表达,提示PTEN
在TIMP-1 介导肾脏衰老微血管生成障碍中起重要作用,为揭示TIMP-1 参与肾脏器官衰老分子机制提供了新的理论依据。
相似文献
器官衰老的影响机制提供参考。方法将正义和反义人TIMP-1基因转染至人近端肾小管上皮细胞(HKC),同时用与正义转染
组细胞酶抑制活性相当的MMP-2/MMP-9 抑制剂(MMP-2/MMP-9 Inhibitor Ⅲ, 100 μmol/L)干预24 h,RT-PCR;间接免疫荧
光法检测各组细胞PTEN、VEGF和Flk-1的表达。结果研究显示,与未转染和空载体转染组相比,正义TIMP-1转染组中PTEN
表达上调(P<0.05),明胶酶活性降低(P<0.05),VEGF和Flk-1 表达下调(P<0.05),而反义TIMP-1 转染组则相反(P<0.05);
MMP-2/MMP-9 inhibitor Ⅲ 100 μmol/L(酶抑制剂组)组PTEN、VEGF和Flk-1 表达与未转染和空载体转染组相比无显著差
异。结论肾脏器官衰老过程中高表达的TIMP-1,通过上调PTEN(非MMP依赖途径),进而下调VEGF、Flk-1表达,提示PTEN
在TIMP-1 介导肾脏衰老微血管生成障碍中起重要作用,为揭示TIMP-1 参与肾脏器官衰老分子机制提供了新的理论依据。
相似文献
43.
背景:已有研究证实经腹腔注射基因转染肾脏是一种简便有效的实验方法.目的:构建表达球形脂联素(gAd)的pIRES2-EGFP-gAd质粒,观察其在大鼠肾脏的表达.方法:以pET/gAd质粒为模板,PCR扩增目的片段,转化大肠杆菌,用EcoR Ⅰ BamH Ⅰ双酶切后,与pIRES2-EGFP荧光质粒连接,重组构建pIRES2-EGFP-gAd质粒.将构建成功的pIRES2-EGFP-gAd质粒采用脂质体介导经腹腔注射正常大鼠体内,于注射24,48,96 h和7 d留取肾脏标本进行冰冻切片,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在肾组织中的表达,同时采用Western bot检测肾组织绿色荧光蛋白的表达.结果与结论:重组构建的pIRES2-EGFP-gAd载体经双酶切电泳分析及DNA测序证实无碱基突变.在腹腔注射脂质体/pIRES2-EGFP-gAd转染复合物24 h,即可在肾小球肾间质检测到绿色荧光,注射48 h,荧光进一步增强,之后逐渐减弱,至注射7 d时,荧光强度明显减弱.Western bot检测的绿色荧光蛋白的表达结果与冰冻组织切片结果一致.说明脂质体能够介导pIRES2-EGFP-gAd真核载体在大鼠肾脏表达. 相似文献
44.
【目的】研究大鼠肾脏组织随增龄衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性的变化规律,并探讨其与肾脏衰老的关系,以寻找可用于评判肾脏衰老的相关指标。【方法】留取3,12,24月龄Wistar大鼠肾脏(每组各6只)。采用PAS和Masson染色观察肾组织病理变化;β-gal染色观察大鼠肾组织SA-β-Gal活性的变化。【结果】随增龄,老年大鼠肾组织出现肾小球肥大,节段性肾小球硬化,局灶性肾小管萎缩、间质纤维化和炎性细胞浸润;肾脏病理评分显示肾小球和小管间质病变评分随增龄逐渐增高,24月龄组评分值显著高于3月龄和12月龄组(P〈0.05)。大鼠肾组织SA-β-gal染色阳性面积百分比随增龄逐渐升高,24月龄组阳性百分比显著高于3月和12月龄组(P〈0.05),并与同月龄组肾脏病理评分(肾小球和肾小管间质)呈正相关(r=0.585和0.612,P〈0.05)。【结论】随增龄大鼠肾组织SA-β-Gal表达逐渐增强,可能作为大鼠肾脏衰老的一项检测指标。 相似文献
45.
目的:以β-半乳糖苷酶基因作为报告基因,探讨超声微泡介导在人肾近端小管上皮细胞(HKCs)中的转染效率和安全性。方法:体外培养HKCs,分为单纯超声组、单纯微泡组、裸质粒组、超声+质粒组、微泡+质粒组、超声+微泡+质粒组以及VigoFect+质粒组。超声+微泡+质粒组应用微泡和Plenti6-LacZ质粒转导HKCs后,给予不同强度不同时间超声辐照。采用X-gal染色观察细胞基因转导效率,台盼蓝染色观察细胞存活率,Hochest染色观察细胞凋亡率。结果:超声+微泡+质粒组转染效率高于其他各组;与VigoFect+质粒组相比无统计学差异(P〉0.05)。随超声声强增加和辐照时间延长,HKCs存活率下降,凋亡率升高。声强为0.3W/cm^2时,辐照时间为60s时,细胞存活率和转导效率均较高,而细胞凋亡率较低。结论:在适当超声强度和辐照时间条件下,超声微泡可安全、有效地促进肾小管上皮细胞的基因转染,是一种较理想的基因转导方法,这为肾脏病的基因治疗提供了实验基础。 相似文献
46.
目的:探讨医学生正念与心理弹性的关系以及抑郁、焦虑是否在其中起着中介作用。方法:采用整群抽样法,向431名中南大学的医学生发放肯塔基州觉知量表、心理弹性量表和抑郁焦虑压力中文简体版进行相关分析、回归分析和中介分析。结果:1医学生正念与心理弹性显著正相关(r=0.41,P0.01),描述和有意识地行动两个因子对心理弹性有显著的正向预测作用(β=0.40,0.28;P0.01);2抑郁、焦虑在正念与心理弹性之间均起着部分中介作用,中介效应分别占总效应的42.00%,26.38%。结论:正念的增加可以显著提高医学生的心理弹性水平。因此,对医学生的教育,不仅要注重专业知识的培养,也要重视培养他们心理弹性、正念等心理特质,减少抑郁、焦虑这些负性情绪的发生。 相似文献
47.
急性心肌梗塞急性期病死率高,严重危害病人的生命.因此,一旦确诊,应紧急处理,以保护濒死的心肌,缩小梗塞范围,改善预后.我科2006年1月-2009年1月对收治的34例急性心肌梗塞的病人进行了临床观察和护理,认识到对急性心肌梗塞病人的护理,从接诊到康复期的指导,每一个环节都非常重要,是不容忽视的.现将其观察及护理体会报告如下: 相似文献
48.
川芎素对高糖致人腹膜间皮细胞分泌FN和PAI-1的作用 总被引:2,自引:1,他引:2
目的研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌纤维连接蛋白(FN)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响,并进一步探讨川芎素对高糖致HPMC分泌FN和PAI-1的干预作用。方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立体外培养模型;用酶联免疫双抗夹心法(ELISA)检测HPMC培养液中FN和PAI-1蛋白质水平;用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN和PAI-1mRNA的表达。结果与单纯对照组相比,2.5%高糖刺激后,HPMC 培养液内FN和PAI-1蛋白质水平显著升高(P< 0.01),并上调HPMC FN和PAI-1的mRNA表达;加入低剂量(20,40μg/ml)川芎素后,FN和PAI-1蛋白质水平显著下降(P<0.01),mRNA表达水平下调。但随着剂量的加大,川芎素的上述作用减低乃至消失。结论高糖可引起HPMC FN和PAI-1蛋白质水平增加,并上调HPMC FN和PAI-1mRNA的表达,适当剂量的川芎素可拮抗高糖的上述作用。 相似文献
49.
目的对颅脑损伤去骨瓣减压术后颅骨缺损修补手术患者使用优质护理的实际效果进行研究分析。方法选择2013年1月至2017年1月我院治疗的颅脑损伤患者共80例作为研究分析对象,均进行去骨瓣减压术、颅骨缺损修补术,将全部患者分为观察组、对照组,对照组进行常规方式护理,观察组进行优质护理,对比两组患者的格拉斯哥预后评分以及并发症出现率。结果在格拉斯哥预后评分方面,观察组明显高于对照组(P0.05),在并发症出现率方面,观察组明显低于对照组(P0.05),差异有统计学意义。结论对进行去骨瓣减压手术的颅脑损伤患者使用优质护理方式具有显著的效果,能明显地改善患者预后,减少并发症的出现,在临床护理中值得推广应用。 相似文献
50.
随着我国人口逐渐老龄化及经济、医疗水平的不断提高,有越来越多的老年人因患某种疾病被迫长期卧床,这些老人无论是心理上或是生活上更需要社会关注和家人的照顾,做好他们的心理护理及并发症预防显得尤为重要.以下将我科2006年至2009年收治的23例长期卧床老年患者的护理体会报告如下: 相似文献