一氧化氮介导的呱氨托美汀镇痛作用机理

目的:探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)介导的呱氨托美汀(Amtolmetin Guacyl,AMG)镇痛作用机理.方法:利用AMG对冰醋酸(AA)扭体小鼠的镇痛作用;测定其脊髓、脑和血液的NO2-,一氧化氮合酶(nitric oxide synthage,NOS)含量.L-Arg,L-NAME对AMG在AA与福尔马林(FA)致痛小鼠的镇痛作用;测定L-Arg,L-NAME对AMG在AA扭体镇痛小鼠脊髓、脑和血液的NO2-含量.结果:在AMG对AA扭体致痛小鼠镇痛作用中,AMG大剂量(300 mg·kg-1)组与中剂量(150 mg·kg-1)组小鼠脊髓与脑NO2-;与NOS含量和模型组比较显著降低(P<0.01;P<0.05).AMG+L-Arg组和AMG组比较小鼠15min内扭体次数显著增多(P<0.05);而AMG+L-NAME组和AMG组比较小鼠15min内扭体次数显著下降(P<0.05).L-Arg,L-NAME对AMG在从扭体致痛小鼠镇痛,AMG(150 mg·kg-1)组小鼠脊髓与脑NO2-;含量和模型组比较显著降低(P<0.05).AMG和L-NAME可减少FA致痛小鼠第二时相累计舔足时间.结论L-Arg和L-NAME可能对AMG镇痛作用有一定影响,AMG可能通过抑制脊髓与脑NO生成发挥镇痛作用.     

半胱氨酰白三烯受体1在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探索半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)在脑胶质瘤中的表达特点及其与胶质瘤病理级别的相互关系。方法采用免疫组化技术检测CysLT1受体在48例脑胶质瘤中的表达。结果 CysLT1受体在星形胶质细胞瘤和神经节胶质细胞瘤中均有诱导表达,表达强度(免疫活性指数)随着肿瘤恶性程度的升高而升高。结论 CysLT1受体在脑胶质瘤中诱导表达增强,并且表达强度(免疫活性指数)与肿瘤的恶性程度呈正相关。     

萘普替尼靶向表皮生长因子受体不同突变亚型的抗肿瘤作用研究

目的 研究萘普替尼对表皮生长因子受体（EGFR）不同突变亚型荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法 建立野生型EGFR人表皮鳞癌A431、L858R/T790M双突变EGFR非小细胞肺癌H1975、Del19突变型EGFR非小细胞肺癌HCC827及HER2高表达的胃癌N87的裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长至100 mm³左右将小鼠分组,A431荷瘤小鼠分组：对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg;H1975荷瘤小鼠分组：对照组、阿法替尼30 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg;HCC827荷瘤小鼠分组：对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60、0.29 mg/kg;N87荷瘤小鼠分组：对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg,每组10只动物。分组后即开始ig给药,对照组给予同体积去离子水,A431、H1975、HCC827、N87荷瘤小鼠分别给药14、21、7、14 d。观察相对肿瘤体积（RTV）、肿瘤增殖率及对肿瘤质量的抑制率,在体考察萘普替尼的抗肿瘤作用。结果 A431荷瘤小鼠：与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著减小（P<0.01）,肿瘤增殖率分别为26.6%、32.5%、34.8%、42.2%;瘤质量均显著降低（P<0.01）,抑瘤率范围在48.3%~73.9%;0.87 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg效果相当,3.5mg/kg组小鼠体质量显著降低（P<0.01）。H1975荷瘤小鼠：与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著降低（P<0.05、0.01）,肿瘤增殖率分别为14.5%、38.2%、65.3%;3.5 mg/kg为起效剂量,与阿法替尼30 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低（P<0.05、0.01）。HCC827荷瘤小鼠：与对照组比较,萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60 mg/kg组RTV降低极为显著（P<0.01）,肿瘤增殖率均小于40%;瘤质量呈不同程度地降低,抑瘤率范围52.9%~89.7%;0.6 mg/kg为起效剂量,1.75 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg作用相当,3.5、1.75 mg/kg组小鼠体质量显著降低（P<0.01）。N87荷瘤小鼠：萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg组RTV及瘤质量均显著低于对照组（P<0.05、0.01）,且肿瘤增殖率均小于40%,抑瘤率范围54.9%~95.00%;1.75 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg与阿法替尼12 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低（P<0.01）。结论 萘普替尼具有明显的抗肿瘤作用,其中对EGFR野生型或单突变型荷瘤抗肿瘤作用较好。关键词：萘普替尼;表皮生长因子受体;表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂;突变;非小细胞肺癌     

RP-HPLC法测定人血清中华法林浓度的方法学研究

目的建立一种简易的方法测定成人血清中华法林的含量,便于临床药物浓度监测。方法采用HypersilODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为(0.01 mol.L-1)磷酸二氢钾溶液-甲醇-磷酸(38∶62∶0.009),流速为1.0 m l.m in-1,检测波长为205 nm。结果华法林保留时间为8.7 m in,标准曲线的线性范围为0.0625~4.0 mg.L-1,r=0.9993,华法林的高、中、低日间、日内变异系数均在10%以下,回收率>90%。结论该法简便、快速重现性好,灵敏度高,可用于人血清中华法林药物含量检测及应用于临床治疗药物监测。     

反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中阿呋唑嗪浓度

目的:建立血浆中阿呋唑嗪的反相高效液相荧光检测方法。方法:采用Shimadzu LC-6高效液相色谱仪,ShimadzuC_(18)柱(150mm×4.6 mm),0.02 mol·L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH2.5)-乙腈(40:60)为流动相,激发波长374nm,发射波长378nm,流速:1mL·min~(-1)。结果:血浆中阿呋唑嗪能得到较好的分离,无明显的干扰峰。本方法专属性好,可信度高。最低检测浓度为0.78ng·mL~(-1),最低检测限是39pg,线性范围0.78～50 ng·mL~(-1),标准曲线:Y=8648.7X+767.8(r=0.999,P<0.05),回收率高于70%,日间、日内RSD均在10％以下。结论:符合生物样品的分析要求。     

卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对大鼠实验性心肌缺血及肝微粒体酶活性的影响

目的　观察卡托普利 (Cap)和低剂量阿司匹林 (Asp)相互作用对大鼠实验性心肌缺血及肝微粒体酶活性的影响。方法　建立异丙肾上腺素致大鼠实验性心肌缺血模型 ,采用正交设计给药方案 ,干式生化片测定LDH、CPK含量 ,同时观察心肌病理变化。采用差速离心法制备大鼠肝微粒体 ,测定细胞色素P4 5 0、b5含量及苯胺羟化酶活力。结果　Cap与低剂量Asp联用时对模型组血清中LDH、CPK水平存在明显的相互作用 ,且表现为拮抗效应。Cap显著减轻心肌组织病理损伤程度 ,而Asp对其无影响。Cap与Asp单用时对细胞色素P4 5 0含量无影响 ,但联用时较正常组及Asp单用组均显著增加。Asp降低细胞色素b5含量 ,联用Cap其含量明显增加。Cap单用时增加苯胺羟化酶活力 ,与Asp联用时活力进一步增加 ,而Asp本身对其无影响。 结论　低剂量Asp不减弱Cap对心肌组织病理损伤的保护作用 ,但二者联用对血清LDH、CPK的水平反而有促进作用 ,其机制可能与进一步诱导P4 5 0活性及苯胺羟化酶活力有关。     

大鼠实验性高脂血症和高脂血症性脂肪肝模型研究

目的　建立高脂血症和高脂血症性脂肪肝实验动物模型。方法　采用SD大鼠 30只 ,随机分为对照组 (n =10 )和模型组 (n =2 0 )。对照组喂普通饲料 ,模型组喂普通饲料并给予脂肪乳剂灌胃 (10ml·kg-1)。动态观察一般情况和血清TG、TC、ALT、AST、MDA、SOD和肝脏TG、TC、MDA、SOD的变化 ,并行病理检查。结果　 1wk后 ,模型组血清TG和TC明显高于正常组 ,形成了高脂血症模型。 2wk后 ,随机处死模型中的 10只 ,与正常组相比 ,发现血清TG、TC、ALT和肝脏MDA均明显升高 ,而肝脏SOD则明显降低 ,病理显示有 2只轻度脂肪变性。在第 3wk处死剩余动物 ,发现肝指数、血清脂质、ALT、AST、MDA和肝脏TG、MDA与对照组相比显著升高 ,而SOD则明显降低 ;光镜下所见模型组均出现弥漫性肝细胞脂肪变性 ,并有炎症病灶。结论　通过 1wk脂肪乳剂的喂养 ,形成了高脂血症模型 ;继续给予脂肪乳剂 ,2wk后形成高脂血症性脂肪肝模型。     

来氟米特对免疫性肝损伤的影响

目的　研究来氟米特对小鼠免疫性肝损伤的影响。方法　利用BCG+LPS诱导免疫性肝损伤;分光光度法检测血中ALT ,AST和NO水平及肝匀浆MDA和GSHpx含量;ELISA法测定血中TNF-α含量;细胞增殖法测定IL-1,IL-2及ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应。结果　在BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤中,来氟米特(4,12 ,36mg·kg^-1 )ig给药明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血浆ALT和AST活性及肝匀浆MDA含量,使降低的肝匀浆GSHpx水平增高。进一步研究发现来氟米特明显抑制免疫性肝损伤小鼠TNF-α的产生,降低增高的血清NO水平,抑制PM_Ф产生过高的IL-1,对低下的IL-2产生和ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应有进一步抑制作用。结论　来氟米特对免疫性肝损伤具有保护作用     

反相高效液相色谱法检测齐多夫啶的血药浓度

目的　建立齐多夫啶血药浓度的反相高效液相色谱检测方法。方法　以shim pack ,VP ODS 5 μm 4 6× 15 0mm为分离柱 ,流动相∶四氢呋喃∶水∶三氟酸 (10∶89 8∶0 2 ) ,流速 1 0ml·min-1;检测波长 2 67nm。结果　齐多夫啶浓度在 0 0 2～ 2 0mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系 ,日内及日间差均小于 5 % ,平均回收率为 96 4% ,血浆中最低检测极限为 10 μg·L-1。结论　本方法具有快速、灵敏、稳定的特点 ,能满足血药浓度检测的需要     

卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对心衰大鼠左室心肌组织c-fos蛋白表达的影响

目的 观察卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对冠状动脉结扎致心衰大鼠模型左室心肌组织c—fos蛋白表达的影响。方法 采用冠状动脉结扎致急性心肌梗死和心梗后慢性心力衰竭大鼠模型，按照正交设计试验方案给药5wk，采用免疫组织化学方法观察联用两药对左室心肌组织c—fos蛋白表达的影响。结果 急性心肌梗死组c—fos蛋白阳性颗粒数目明显增多，卡托普利各剂量组对心肌组织c—fos蛋白表达均无影响，且与低剂量阿司匹林无显的相互作用，而低剂量阿司匹林增加c—fos蛋白免疫反应阳性细胞分布，尤以急性心肌梗死组多见。结论 低剂量阿司匹林介导c—fos蛋白表达增加，可能是其拮抗卡托普利减轻心衰大鼠左室重建作用的机制之一。