人canstatin基因克隆及其重组蛋白的表达和纯化

目的 克隆人血管能抑素canstatin基因,构建其原核表达载体,表达并纯化出canstatin蛋白。方法 从人胎盘组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增出canstatin基因,克隆进质粒pUCm-T,将测序正确的目的基因片段插入质粒pET-22b( )相应位点,转化E.coli BL21,IPTG诱导蛋白表达。超声破碎菌体,Ni-NTA柱亲和层析纯化重组蛋白。结果 从人胎盘组织中提取总RNA,显示3条清晰条带,分别对应28S,18S,5S,分光光度计法测得总RNA浓度为1．8g／L;RT-PCR扩增出与预期目的基因canstatin长度一致的cDNA片段;构建出克隆质粒pUCm-T／canstatin,基因测序结果与GenBank公布的canstatin基因序列完全一致;构建出表达质粒pET-22b( )／canstatin,BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定证实构建正确;IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳分析表明在相对分子质量24kD左右出现新的蛋白表达条带,诱导后1h、2h、3h、4h表达蛋白占菌体总蛋白的百分比分别为18．2％、18．8％、23．0％和23．4％;诱导3h的菌体超声破碎后,Ni柱亲和层析,125、250mmol／L眯唑洗脱液SDS-PAGE电泳显示出清晰的单一条带。结论 成功克隆出canstatin基因,成功构建了其原核表达载体,并且成功表达、纯化出canstatin蛋白,为进一步研究其临床应用打下基础。     

耳鼻咽喉科护士专科培训方法探讨

目的提高耳鼻咽喉科专科护士的综合素质和服务水平。方法对新护士进行2个月的专科基础知识、基本技能、急救知识、工作程序及护士素质的培训。对工作年限≥5年的护士采取轮转手术室、门诊，观摩专科手术及对全体护士定期进行业务学习、查房、进修等方式的培训。结果培训后新护士各项考核成绩均〉85分，合格率达100％；患者满意度〉95％，科室经济效益和社会效益在医院名列前茅。结论针对性和综合性培训的方法能提升培训效果，有利于促进专科护理水平和质量的全面提高。     

胃肠道间质瘤的研究进展概述

胃肠道间质瘤（Gastrointestinal stromal tumors，GIST）是消化道最常见的间叶源性肿瘤。1983年Mazur首先提出GIST的概念。随着科学技术的发展，1999年人们认识到GIST起源于肠道间质干细胞-Cajal（interstitial cells of Cajal，ICC）。目前国内认为，胃肠道间质瘤（GIST）是一种免疫表型上表达KIT蛋白（CD117）、     

携带幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建

目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)技术从基因组DNA扩增ureB基因,克隆入pucmT载体,检测ureB基因序列,经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应进行鉴定。重组载体pIRES-ureB转入减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,再次转入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES-ureB转染COS-7细胞,SDS-PAGE Western印迹法检测pIRES-ureB表达蛋白的免疫原性。结果 扩增出长约1700bp的ureB基因,测序结果表明扩增出的ureB基因与基因库Hp ureB序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实ureB基因克隆人真核表达载体pIRES,并成功构建了Hp ureB基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,重组核酸疫苗稳定,并且Westem印迹法检测到特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的Hp UreB减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,为进一步探索其体内的免疫作用奠定了基础。     

非妊娠中年妇女急性戊型肝炎所致死亡1例报告

1病例资料患者女性,44岁,自由工作者。15 d前因周身关节及肌肉酸痛,自行口服“当归拈痛丸”1周,症状稍有缓解。10 d前因皮肤出现疱疹自行口服伐昔洛韦、甲钴胺片,4 d前发现尿黄、目黄,伴恶心,就诊于当地医院未明确病因。遂于2020年7月25日就诊于本院,门诊以“肝损伤”收入本科室。病程中有周身关节及肌肉酸痛明显、饮食欠佳、睡眠尚可,有陶土样便,尿色黄,近期体质量下降6 kg。     

lncRNA COLCA1/miR-423-5p/FAM172A分子轴对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA, lncRNA)COLCA1在皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma, CSCC)组织中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响、分子机制。方法采用qRT-PCR法检测COLCA1在正常皮肤组织和CSCC组织、细胞系及人角质形成细胞系中的表达;选择表达最低的细胞系,分别转染空白质粒(对照组)或COLCA1过表达质粒(实验组);采用MTT法和细胞划痕实验分别检测过表达COLCA1对CSCC细胞系增殖和迁移的影响;通过生物信息学法预测COLCA1潜在的分子机制。采用qRT-PCR和Western blot法检测过表达COLCA1对靶基因表达的影响。结果 CSCC组织中COLCA1的表达显著低于正常皮肤组织(1.01±0.20 vs 5.71±0.78,P<0.01)。CSCC细胞系中COLCA1的表达显著低于人角质形成细胞系(P<0.01),A431细胞系中的表达最低(P<0.01)。与对照组相比,过表达质粒可有效促进COLCA1的表达(1.00±0.04 vs 9.31±0.99,P<0.01)。过表达COLCA1可抑制A431细胞的增殖能力和迁移能力(P均<0.01)。COLCA1可能与miR-423-5p互补结合,miR-423-5p可能与FAM172A mRNA互补结合。与对照组相比,过表达COLCA1可抑制A431细胞中miR-423-5p的表达(1.00±0.05 vs0.20±0.05,P<0.01),并促进FAM172A在mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 COLCA1在CSCC组织和细胞系中呈低表达,过表达COLCA1可能通过miR-423-5p/FAM172A分子轴抑制CSCC细胞系A431的增殖和迁移能力。     

儿童性腺母细胞瘤8例临床病理学分析

目的:分析儿童性腺母细胞瘤的临床病理及分子遗传学特点。方法:收集上海交通大学附属儿童医院及复旦大学附属儿科医院儿童性腺母细胞瘤8例,根据临床表现、免疫组织化学及基因检测结果对其进行分析并文献复习。结果:8例患者年龄2~14岁,平均年龄8.2岁。社会性别均为女性。5例外阴异常,2例身材矮小,1例月经紊乱。5例核型为46,...     

“思政育人”在神经病学实习教学中的实践探讨

目的 探讨如何以“立德树人”的教育理念,通过加强医学高校实习教学中的课程思政建设来培养“德医双修、仁心仁术”的卓越医生。方法 文章以临床医学专业本科实习医生为研究对象,实习时间段为2022年1—7月,结合神经病学教与学中的专业特点,将课程思政与入科教育、调查问卷、教学查房、临床技能、临床专题讲座、病例讨论、出科考试各实习教学环节相融合。通过迷你临床演练评估（mini-clinical exercise evaluation,Mini-CEX）、临床操作技能直接观察评估（direct observation of procedural skills,DOPS）、病例汇报评估（subjective-objective-assessment-plan,SOAP）3种形成性评价方式来观察思政培养在临床实习中的教学效果,并以调查问卷的形式统计师生对教学体验的满意度。结果 研究结果显示,通过Mini-CEX测评,高达95%以上的实习医生在各项目中均符合要求,且50%以上的学生达到优秀标准;病例汇报中采用SOAP评估,总体得分均在90分左右。以DOPS来评价实习医生的技能操作,同样可见95%以上学生...     

盆腔淋巴结转移性前列腺癌大分割调强放疗联合内分泌治疗疗效分析

目的:探讨盆腔淋巴结转移性前列腺癌大分割调强放疗联合内分泌治疗疗效及预后。方法:回顾分析中国医学科学院肿瘤医院2006—2018年收治的42例Ⅳ A期前列腺癌行大分割调强放疗联合内分泌治疗病例的临床资料。前列腺及精囊腺放疗总剂量67.5 Gy分25次,盆腔淋巴引流区处方剂量45～50 Gy,1.8～2.0 ...