组胺H2受体阻滞剂对再生障碍性贫血患者CD8+细胞抑制正常BFU-E生长的影响

由于抑制性Ｔ淋巴细胞不仅具有ＣＤ８抗原,而且还具有组胺Ｈ２受体［１］,为了解再生障碍性贫血（再障）患者ＣＤ８＋细胞对造血的影响及其组胺Ｈ２受体在红系造血抑制中的作用,我们观察了再障患者ＣＤ８＋细胞对正常红系爆式集落（ＢＦＵＥ）生长的作用以及组胺Ｈ２受体阻滞剂甲氰咪胍对此种作用的影响,现报道如下。病例和方法１　病例　再障患者１３例。其中男１１例,女２例;年龄１６～６１岁;重型再障（ＳＡＡ）Ⅰ型３例,ＳＡＡⅡ型２例,慢性再障８例,诊断均符合文献［２］标准。２　试剂　甲氰咪胍系美国Ｓｉｇｍａ公司产…     

甲基转移酶抑制剂对Raji细胞系增殖抑制的实验研究

 目的探索不同浓度甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)对甲基化细胞系Raji细胞的生长抑制效应,为临床应用提供实验依据.方法对5-Aza-CdR体外处理高甲基化致P15基因失活的淋巴肉瘤白血病细胞株Raji细胞,经流式细胞术、细胞生物学特征观察细胞的生长抑制效应.结果在(10-7～10-6)mol/L的范围内,随着药物浓度的升高,Raji细胞生长受到抑制,并表现出剂量时间依赖关系.5-Aza-CdR诱导细胞分化,阻滞于G0/G1期.结论甲基转移酶抑制剂抗DNA甲基化的白血病是可行的,值得进一步探索.     

恶性血液病中的P_(15)~(INK4B)基因甲基化

目的　探索特定基因操纵区CpG岛高甲基化对人类造血系统恶性肿瘤的作用。方法　利用甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)的方法 ,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行甲基化特异性聚合酶链反应 (PCR) ,测定了 2 5例急性髓系白血病 (AML) ,15例慢性粒细胞白血病 (CML) ,16例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 12例多发性骨髓瘤 (MM)患者P1 5INK4B基因在操纵区 5′ CpG岛异常甲基化的发生率。结果　P1 5INK4B基因异常甲基化的发生率 :AML为 84% ,CML为 0 ,MDS为 5 0 % ,MM为 75 %。高危型的MDS较低危型更易发生甲基化。在MM中 ,P1 5INK4B甲基化一般发生在早期 ,与骨髓象的幼稚程度关系密切。结论　调节细胞生长和分化的P1 5INK4B基因高甲基化是使P1 5INK4B 基因失活的主要原因之一 ,CpG岛高甲基化与恶性血液病的发生密切相关。     

In vitro inhibitory effect of CD_8~ cells from patients with aplastic anemia on normal CFU-GM growth was blocked by cimetidine

ＩｎｖｉｔｒｏｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆＣＤ＋８ｃｅｌｓｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｐｌａｓｔｉｃａｎｅｍｉａｏｎｎｏｒｍａｌＣＦＵＧＭｇｒｏｗｔｈｗａｓｂｌｏｃｋｅｄｂｙｃｉｍｅｔｉｄｉｎｅＷａｎｇＭｉｎｇｃｈｕｎ汪明春，ＹａｎｇＬ...     

乙型病毒性肝炎与再生障碍性贫血发病关系的研究

病毒感染是引起造血抑制的原因之一,肝炎病毒(hepatitis virus)的感染可能是再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)的致病原因之一。广东省乙型病毒性肝炎发病率较高,AA患者较多,我们采用国际标准化的PCR—酶标法,探讨了乙型病毒性肝炎病毒与AA发病的相关性。     

再生障碍性贫血与丙型和戊型肝炎病毒相关的研究

采用ＲＴ／ＰＣＲ和定量酶标标准化的测定方法，检测了先患肝炎后患者生障碍性贫血和先患者生障碍性贫血后患丙型肝炎的一率，并与对照组比较。     

彩色多普勒超声技术检测施他宁对肝硬化门脉高压的血流动力学影响

施他宁(Stilamin,Serono)为人工合成十四肽生长抑素,近年来报告用于治疗门脉高压所致的食通静脉曲张破裂出血疗效满意,但也有不同意见。为此,我们采用彩色多普勒超声技术检测了11例肝硬化门脉高压病人,在应用施他宁前后门脉系统血流动力学的变化,进一步为临床应用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 检测对象 11例均为住院病人,男8例,女3例,平均年龄49.2±12.3岁。其中肝炎后肝硬化8例,隐匿型肝硬化2例,肝硬化合并肝癌1例。肝功能按child-     

白介素12诱导T细胞凋亡时Fas/FasL表达和信号转导的研究

目的:为了解和探讨白介素12(IL-12)作用于T细胞,活化T细胞表面的IL-12受体β1/β2复合物,调节Th1/Th2平衡,诱导T细胞凋亡时对Fas/FasL表达和信号传导的作用。方法:用AnnexinV的方法流式细胞仪检测细胞凋亡;用半定量PCR的方法测定在不同抑制剂作用下对Fas/FasL信号传导的影响。结果:IL-12诱导人TIB-152、HTB-176和正常T细胞的凋亡;IL-12可上调T细胞的FasLmRNA表达。在IL-12作用6h后FasL的表达明显升高,表达的高峰值在24h。HA100抑制剂能促进T细胞的凋亡,PKC抑制剂是IL-12诱导T细胞凋亡信号传导的负性调节因子;AG490抑制剂不抑制IL-12上调的FasLmRNA表达作用,说明其阻断的Jak2通路不参与IL-12对FasL表达的信号传导过程;HA1004不影响T细胞表达FasLmRNA。结论:IL-12能诱导TIB-152、HTB-176和正常人T细胞的凋亡。FasL作为介导分子参与此过程,IL-12对T细胞FasLmRNA表达信号传递与PKC通路有关。而Jak2及PKA通路不参与此过程.     

IL-12诱导T细胞凋亡对Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响

目的:探讨白介素12(IL-12)诱导T细胞凋亡过程中对T细胞的Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响作用.方法:dUTP缺口末端标记法和Annexin V法;用FITC标记TNFR1,PE标记CD95,生物素标记FasL, 流式细胞仪检测3种T细胞(人淋巴瘤T细胞株HTB176、人急性白血病T细胞株TIB152和正常人T细胞)的百分率;用半定量PCR的方法检测FasL和TNFα的mRNA的表达作用.结果:HTB176和TIB152的细胞在IL-12处理1 h,生物素标记FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加,24 h达到高峰,但正常T细胞在24 h后才有反应;正常T细胞经IL-12处理1 h内细胞FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加,在以后的试验期 6、12、24 h始终保持恒定水平;但3种T细胞在IL-12作用下不促进细胞CD95和TNFR1及TNFα的表达.结论:IL-12诱导T细胞凋亡中有许多调节因子的协调作用,但作用机制是不同的.     

人乳头瘤病毒6b型L1基因的克隆及表达

目的研究尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)6b型晚期基因L1(HPV6bL1)在真核细胞内的表达。方法 PCR技术扩增原核重组质粒PQE40-HPV6bL1中L1基因,酶切后与真核表达质粒PEGFP-C1连接,转化入感受态大肠埃希菌DH5α,经扩增后酶切鉴定,挑选阳性克隆进行测序。以重组质粒PEGFP-HPV6bL1转染COS-7细胞,荧光显微镜下观察融合蛋白的表达,RT-PCR检测HPV6bL1 mRNA的表达。结果双酶切及测序鉴定显示,重组质粒中插入的目的基因片段及载体DNA大小、方向和插入位点均正确,PEGFP-HPV6bL1构建成功。重组体成功转染进COS-7细胞,在荧光倒置显微镜下可观察到细胞内有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测到HPV6bL1 mRNA的表达。结论建立了HPV6bL1绿色荧光真核表达系统,为研究该蛋白质的功能奠定了基础。