561例血液病患者染色体核型分析

目的探讨血液病患者有关核型改变及其意义。方法抽取骨髓标本2～5ml,采用骨髓细胞直接法、24h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术进行核型分析。结果 561例血液病患者中,常规细胞遗传学发现异常核型282例（50.3%）,其中结构异常116例（20.7%）,数目异常84例（15.0%）,同时有结构异常和数目异常82例（14.6%）。不同类型血液病患者染色体检测结果不同,在急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病（CML）、骨髓增生异常综合症（MDS）、再生障碍性贫血（AA）、骨髓增殖性疾病（MPD）、淋巴瘤、血小板减少症中异常核型分别为56.5%（109/193）、44.9%（57/127）、74.7%（62/83）、56.7%（34/60）、3.7%（1/27）、0%（0/15）、72.7%（8/11）、0%（0/5）,在急性混合细胞白血病、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、多发性骨髓瘤（MM）、慢性粒单细胞白血病（CMML）、淋巴瘤白血病、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、纯红再障、恶性组织细胞病等较少患者中,异常核型分别为25.0%（2/8）、0%（0/8）、20%（1/5）、0%（0/5）、100%（4/4）、40%（2/5）、0%（0/3）、100%（2/2）。M2伴t（8;21）,M3伴t（15;17）,M4伴inv（16）、t（16;16）,ALL伴t（9;22）CR率分别为88.2%、94.7%、80%、45.5%。结论染色体核型分析在恶性血液病诊断、分型、预后判断和指导治疗中具有重要意义。     

D-半乳糖致衰老大鼠骨髓间充质干细胞的特性

目的:观察D-半乳糖致衰老大鼠骨髓来源的间充质干细胞的形态学及生物学改变.方法:选择SPF级雄性SD大鼠10只, 随机分为2组:青年对照组和衰老模型组.衰老模型组大鼠每天用D-半乳糖颈背部皮下注射, 剂量为400 mg/kg, 连续注射4个月.分别从青年对照组和衰老模型大鼠的骨髓中培养出间充质干细胞(BMSCs).倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况, 流式细胞术(FCM)检测表面抗原, 比较两组原代细胞集落形成数量和增殖情况, 透射电镜下观察其形态和结构变化.结果:两组体外培养的原代和第3代骨髓间充质干细胞在形态上无差异,早期呈集落样生长.FCM检测显示, 两组BMSCs的免疫表型一致, CD29和CD44为阳性表达, CD34. 和CD45为阴性表达.两组细胞都具有成骨诱导和成脂诱导能力.与青年对照组相比, 衰老模型组BMSCs生长速度明显减慢, 集落形成能力明显地降低(P<0. 05).透射电镜观察发现, 衰老模型组BMSCs呈现衰老的 形态和结构变化, 核膜内折, 细胞质内存在大量空泡, 内质网和线粒体增大或肿胀.结论:大鼠骨髓间充质干细胞的增殖随年龄增长而降低;体外培养的衰老模型组骨髓间充质干细胞出现衰老征象.     

大鼠骨髓间充质干细胞对D-半乳糖致衰老大鼠骨质的影响

目的 研究大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)对D-半乳糖制备的衰老大鼠骨质疏松的治疗作用.方法 选用清洁级SD大鼠,每日皮下注射D-半乳糖400 mg/kg,连续注射4个月,制作衰老模型.MSCs治疗组在衰老模型制备成功后,给予尾静脉输注3×106个MSCs,1次/w,连续4 w进行生物治疗.对正常对照组、致衰老模型组、MSCs治疗组进行骨常规参数测定及比较;扫描电镜对大鼠股骨远端松质骨的形态结构进行观察.结果 致衰老模型组骨密度和血清雌二醇均比对照组有所降低(P<0.01),而血清钙、血清碱性磷酸酶均比对照组有明显升高(P<0.01).治疗组上述参数指标与模型组比较均呈现显著差异(P<0.01).扫描电镜显示,与对照组相比,模型组大鼠的骨小梁变细,断裂,数量减少,微损伤增多;而治疗组与模型组大鼠相比,骨小梁数量增加,骨吸收面减少,胶原纤维排列规律、整齐.结论 长期大量摄入D-半乳糖导致大鼠衰老的同时可能并发骨质疏松,而骨髓MSCs可以延缓此类老年骨质疏松的发生.     

白细胞介素15对人外周血单个核细胞抗肿瘤活性和T细胞受体谱型的影响

目的:探讨重组人白细胞介素15(rhIL-15)对人外周血单个核细胞(PBMC)抗肿瘤效应及T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)的影响.方法:应用LDH释放法检测rhIL-15作用前后PBMC对人急性髓系白血病细胞KGla的杀伤活性.分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照.建立TCB CDR3基因扫描技术,并用其检测rhIL-15作用前后5名健康个体T细胞克隆表型.结果:rhIL-15作用后PBMC对KG1a细胞的杀伤活性较rhIL-15作用前明显增强(P<0.05).基因扫描显示5名健康个体TCR CDR3谱型均呈高斯分布,各家族CDR3表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布.rhIL-15作用前后5名健康个体T细胞克隆表型无明显变化.结论:rhIL-15能显著提高PBMCs的抗肿瘤效应,并不改变T细胞的克隆表型.     

原发性急性髓系白血病预后相关因素分析

目的:探讨原发性急性髓系白血病(AML)患者预后的影响因素,为改善患者预后,延长生存期提供临床依据。方法:回顾性分析2006年6月至2010年12月在我院就诊的原发性急性髓系白血病(除外AML-M3)109例,采用Kaplan-Meier生存分析法分析患者性别、年龄、初诊时外周血白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数、骨髓涂片原始细胞百分数、细胞遗传学、首次诱导是否缓解与总生存时间(OS)及无复发生存期(RFS)的关系,log-rank检验对其可能的预后影响因素进行单因素分析,多元比例危险率COX回归模型进行多因素分析。结果:患者完全缓解(CR)率为56.88%,中位OS为9.5个月,中位RFS为5.5个月。年龄大于60岁、细胞遗传学高危组和首次诱导化疗未获得CR的患者OS及RFS较短(P<0.05),为预后不利因素,且对预后具有独立影响。结论:根据急性髓系白血病预后相关因素可对其进行预后判断,从而为个体化分层治疗提供临床依据,对延长患者总生存时间及无病生存期具有重要意义。     

去甲斑蝥素联合IL-12、IL-15处理增强PBMC对Raja细胞的杀伤效应【创新点评：中药抗癌药物去甲斑蝥素增强PBMC对淋巴瘤的杀伤－郑胡镛】

目的:探讨细胞因子IL-2、IL-15激活的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)处理后的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应及其可能机制.方法:锥虫蓝拒染法检测NCTD对Raji细胞和PBMC细胞增殖的影响;LDH释放法检测IL-2、IL-15激活后的PBMC对K562细胞和Raji细胞的杀伤;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2、IL-15诱导后PBMC表面NKG2D的表达,以及NCTD作用前后Raji细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表达.结果:NCTD抑制Raji细胞的增殖,具有剂量、时间依赖性(P＜0.05),但对PBMC增殖无影响(P＞0.05).在效靶比为10∶1、20∶1时,IL-2、IL-15激活的PBMC对K562细胞的杀伤率较未激活的PBMC明显增高[(52.42±3.89)％vs (15.82±5.12)％,(79.55±9.22)％vs(27.67±3.66)％,P＜0.05];PBMC对NCTD处理后Raji细胞杀伤率较未经NCTD处理的Raji细胞明显增高[(23.63±6.20)％vs (5.04±1.25)％,(41.80±4.09)％ vs (8.59±2.19)％;P＜0.05],且IL-2、IL-15激活的PBMC对NCTD处理后Raji细胞的杀伤率较NCTD处理前明显提高[(38.97±2.76)％ vs(13.19±3.67)％,(63.09 ±7.30)％ vs(19.89 ±4.15)％;P＜0.05].激活后PBMC表面NKG2D表达率升高[(44.91±5.85)％vs (25.28±7.69)％,P＜0.05].NCTD作用后Raji细胞表面NKG2D的配体ULBP2表达显著升高[(12.69±3.99)％vs(1.03 ±0.42)％,P＜0.05],而其他配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP3的表达无明显变化(P＞0.05).结论:NCTD联合细胞因子IL-2、IL-15处理能增强PBMC对Raji细胞的杀伤效应,其机制与NCTD上调Raji细胞表面ULBP2表达和细胞因子上调PBMC表面NKG2D表达有关.     

造血干细胞移植治疗自身免疫性疾病

近十余年来，造血干细胞移植技术(hematopoietic stem cell transplantation，HSCT)治疗难治性自身免疫性疾病(autoinmamedisease，ADs)，业已取得了可喜的成绩。国内外学者把病情进展快，造成明显残疾或早期死亡的ADs，归为“严重自身免疫病”(SADs)，其预期生存期为5～10年；近年随着医学科学的进展，自身造血干细胞移植的治疗相关病死率为1％～5％；对SADs患者，在发展到不可逆脏器损伤前，进行积极的治疗是合理的、必要的。现将HSCT治疗ADs的机制、适应证、方式和过程做简要叙述。     

艺术性的遗传半相合骨髓移植

现代移植免疫学理论和技术的发展，极大地推动着临床骨髓移植的进步，已从有血缘关系间(相关)的移植发展到无血缘关系(无关)间移植，从遗传上全相关间移植发展到半相合间的移植，从治疗低危险度恶性血液病发展到治疗高危险度恶性血液病，从住院病房中移植发展到门诊家庭中的移植。     

成体干细胞的分化潜能及在修复重建中的应用前景

目的 探讨成体干细胞（AS细胞）的分化潜能性及在临床修复重建中应用的可能。方法 检索医学和生物医学文献数据库中关于AS细胞研究的相关报道，并对AS细胞的最新研究进展作简要总结。结果 AS细胞存在于成体的各种组织中，具有自我更新能力和分化潜能性；部分成体干细胞，如骨髓皮肤、肝及脂肪等组织中的AS细胞，具有多向分化潜能，可向无关组织类型的成熟细胞横向分化；AS细胞是组织更新与修复的起源细胞，且与肿瘤的发生和衰老密切相关。结论 AS细胞具有多向分化潜能，在创伤修复等再生医学中有广阔的应用前景。